趙鑫
不用接種箱、種植無人管理的情況下成功培養(yǎng)和收獲靈芝的實踐,很適合中小學開展。實驗流程如下。
1 購買菌種、尿素、瓊脂
到農(nóng)業(yè)用品銷售部購買一管靈芝菌種、一小瓶尿素粉、一包瓊脂、1.5 kg石膏粉,花費20~30元。
2 配制母種培養(yǎng)基
在生物實驗室里配制馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基。稱取洗凈去皮的馬鈴薯200 g,切成薄片,加水1 000mL,煮沸20 min,用8層紗布過濾取其濾液;然后加入18 g瓊脂,邊煮邊攪拌至瓊脂完全融化,并用上述紗布過濾;再在濾液中加水至1 000 mL,加蔗糖20 g攪拌溶化。用試紙檢查溶液的pH,pH為5~6為宜,千萬不要大于7.5??捎脤嶒炇?0%鹽酸、30%氫氧化鈉(濃度不要太高,5%左右鹽酸和氫氧化鈉也可以)調(diào)節(jié)pH。
3 裝管滅菌
用漏斗趁熱將上述培養(yǎng)基裝到5~20只試管中,裝管時要盡量避免培養(yǎng)基沾污試管壁,裝入的量一般為試管總長的1/5~1/6,以便滅菌后放置斜面。
培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口上塞上棉塞以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)面造成污染,并保證有良好的通氣性能。
加塞后,將全部試管用麻繩捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙(可用書的封面紙代替),以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期。
將上述培養(yǎng)基在高壓鍋中高壓蒸氣滅菌1 h。
將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50 ℃左右(以防斜面上冷凝水太多),將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上,擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。
將滅菌培養(yǎng)基放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)24~48 h,以撿查滅菌是否徹底。
4 接種培養(yǎng)
通常接種環(huán)在火焰上充分燒紅,冷卻,先接觸一下培養(yǎng)基,待接種環(huán)冷卻到室溫后,方可用它來挑取母種,迅速地接種到新的培養(yǎng)基上。塞好棉塞于實驗室中進行培養(yǎng),27℃左右為宜,因此選擇在五六月份進行培養(yǎng)為好。
5 配制靈芝的培養(yǎng)基
產(chǎn)棉區(qū)宜用棉子為原料,占97%,石膏占2%,尿素占0.2%,蔗糖占1%的比例。為了使靈芝長得更好,可加入少許維生素片、“12康”等一些過期的保健品藥。按比例配制好,再加水,使含水量達60%~65%,即用手握濕料,指縫間有水滲出而不下滴為準。然后調(diào)節(jié)pH在5~6之間。裝入瓶中,松緊適當,占瓶子空間的3/4左右。
6 在蒸汽中或火焰上接種
待擴大培養(yǎng)的試管中長出許多靈芝菌絲后,就按照接種的原理將長有菌絲培養(yǎng)基分成小塊接種到培養(yǎng)瓶的小洞里,如圖1所示。也可以在爐子上的火焰上方來進行接種。瓶口蓋上滅菌后的厚棉并用繩子扎好,或蓋上組織培養(yǎng)用的透氣瓶蓋。
7 培養(yǎng)靈芝
夏天7~8月最適合靈芝的生長,如圖2所示,將臉盆和培養(yǎng)瓶放在此時的教室里。最好能將培養(yǎng)瓶的下方用墨汁將瓶子涂黑或用黑布遮擋起來,這樣靈芝的菌蓋就更容易向上長出。暑假結(jié)束時,靈芝就會鉆破棉蓋結(jié)出大大的靈芝菌蓋來,等著人們來采摘呢(如果是用組織培養(yǎng)用的瓶和蓋,也會頂開蓋子或玻璃紙)。