李平 余雙強(qiáng) 曾舟華
摘要:研究了溫和條件下超聲波、超聲波結(jié)合稀酸和超聲波結(jié)合稀堿等預(yù)處理甘薯渣發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的工藝。結(jié)果表明,超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理的方法最好,且獲得了最佳的工藝條件為固液質(zhì)量比1∶15、超聲波功率250W、超聲波處理時間30min,預(yù)處理用10g/L的NaOH,纖維素酶用量35IU/g底物,生料酵母菌接種量0.75%。在該條件下乙醇產(chǎn)率達(dá)到22.4%,與傳統(tǒng)工藝相比,產(chǎn)率提高了19%。
關(guān)鍵詞:甘薯渣;超聲波;稀堿;預(yù)處理;發(fā)酵;乙醇
中圖分類號:TS261.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2012)24-5748-04
隨著人類社會的發(fā)展進(jìn)步,全球范圍內(nèi)能源緊張和環(huán)境污染問題日益受到重視。從長遠(yuǎn)看,被廣泛應(yīng)用的化石燃料(包括石油、煤和天然氣)正逐步走向枯竭,發(fā)展非糧益農(nóng)的替代能源是當(dāng)前全球面臨的重大科研課題。甘蔗渣含有蔗糖,美國和巴西合作用甘蔗渣做乙醇[1-3],獲得成功。甘薯渣也含有淀粉,中國民間已有成熟的甘薯渣造酒工藝。中國大部分地區(qū),尤其紅土壤地區(qū)的山坡地適合種甘薯。在缺糧年代甘薯曾是農(nóng)民的半年糧,種植面積很廣。在豐衣足食的當(dāng)代,尤其經(jīng)濟(jì)較發(fā)達(dá)地區(qū),甘薯被少量用作糧食,主要用來喂豬,經(jīng)濟(jì)效益不高。農(nóng)民改種芝麻、黃豆、棉花等農(nóng)作物,導(dǎo)致適合種甘薯的大量山坡地拋荒。甘薯葉、藤、根都是喂豬的好飼料,甘薯種植面積縮小是導(dǎo)致豬飼料漲價的原因之一。在鄂東地區(qū)開展上述課題研究,有助于武漢市生態(tài)示范型城市圈的建設(shè),對于建立具有中國特色的生態(tài)能源生產(chǎn)基地有著重大的戰(zhàn)略意義[4]。
甘薯渣含淀粉、纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、粗蛋白、粗脂肪和灰分等。降解纖維素效果最好的是纖維素酶。纖維素酶是一類能夠?qū)⒗w維素降解為葡萄糖的多組分酶系的總稱,它們協(xié)同作用,將纖維素降解為寡糖和纖維二糖,最終水解為葡萄糖[5,6]。當(dāng)采用纖維素酶水解甘薯渣制造乙醇[7-10]時,纖維素酶必須接觸吸附到纖維素底物才能使反應(yīng)進(jìn)行,因此,纖維素對纖維素酶的可及性是決定水解速度的關(guān)鍵因素。纖維素的結(jié)晶結(jié)構(gòu)以及表面狀態(tài)、多組分結(jié)構(gòu)、木質(zhì)素對纖維素的保護(hù)作用以及纖維素被半纖維素覆蓋等結(jié)構(gòu)與化學(xué)成分的因素致使甘薯渣難以水解。因此,必須經(jīng)過預(yù)處理使纖維素、半纖維素、木質(zhì)素分離開,切斷它們的氫鍵,破壞晶體結(jié)構(gòu),降低聚合度[11-13]。
生料釀酒是微生物利用生淀粉直接進(jìn)行生長、繁殖及代謝的過程[14,15]。生料釀酒工藝與傳統(tǒng)發(fā)酵酒精工藝比較,具有節(jié)約能源、操作簡便和出酒率高等特點(diǎn)[16]。利用甘薯渣中大量的淀粉生產(chǎn)酒精、優(yōu)化發(fā)酵工藝參數(shù),不僅可以提高甘薯深加工產(chǎn)品的附加值,延長產(chǎn)業(yè)鏈,而且可以緩解環(huán)境污染問題。通過超聲波和超聲波結(jié)合酸堿預(yù)處理木質(zhì)纖維素[17-19]后,再在生料酵母的作用下發(fā)酵生產(chǎn)乙醇。為此,對甘薯渣超聲波預(yù)處理和超聲波結(jié)合酸堿預(yù)處理生料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的工藝進(jìn)行了研究。
1 材料與方法
1.1 材料
甘薯渣來源于湖北省武穴市荷葉村,當(dāng)年產(chǎn);生料釀酒酵母由江西省南昌市星火高新技術(shù)研究所生產(chǎn);纖維素酶產(chǎn)生菌由經(jīng)濟(jì)林木種質(zhì)改良與資源綜合利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗室選育得到;氫氧化鈉由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn);硫酸由常州市科豐化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。
1.2 方法
研究做了4種情況的對比試驗。
傳統(tǒng)方法(空白對照試驗)[20]:將干甘薯渣粉碎,過0.40mm篩,?。担埃绺适碓郏尤牍桃嘿|(zhì)量比1∶15的去離子水,混合均勻。加35IU/g的纖維素酶,按0.75%的接種量接入生料釀酒酵母。在無菌條件下放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),于30℃發(fā)酵7d。
超聲波結(jié)合稀酸預(yù)處理甘薯渣發(fā)酵制備乙醇工藝:將干甘薯渣粉碎,過0.40mm篩,?。担埃绺适碓?,加入固液質(zhì)量比1∶15的去離子水,混合均勻。再分別在500mL燒杯中加入150mL的不同體積分?jǐn)?shù)的稀硫酸,超聲波功率為250W,處理時間為30min。處理后濾干,用去離子水洗滌殘渣至中性,加35IU/g的纖維素酶,按0.75%的接種量接入生料釀酒酵母,加入冷水,在500mL三角瓶中混合均勻。無菌條件下放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),30℃發(fā)酵7d。
2 結(jié)果與分析
2.1 固液質(zhì)量比對乙醇產(chǎn)率的影響
2.2 超聲波處理時間對乙醇產(chǎn)率的影響
2.3 超聲波功率對乙醇產(chǎn)率的影響
2.4 酵母菌接種量對乙醇產(chǎn)率的影響
2.6 超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理中NaOH濃度對乙醇產(chǎn)率的影響
2.7 4種工藝的比較結(jié)果
試驗結(jié)果表明,最佳的因素水平組合為超聲波功率250W,固液質(zhì)量比1∶15,超聲波處理時間30min。在此條件下對預(yù)處理后甘薯渣發(fā)酵制乙醇,乙醇產(chǎn)率為20.5%,比未經(jīng)任何預(yù)處理的乙醇產(chǎn)率提高9%以上,這表明用超聲波預(yù)處理發(fā)酵制乙醇的效果不是很好,在超聲波處理最佳因素水平下結(jié)合稀酸預(yù)處理,當(dāng)稀硫酸的體積分?jǐn)?shù)為0.5%時,效果最好。超聲波結(jié)合稀酸預(yù)處理時乙醇的產(chǎn)率為20.8%,要高于單獨(dú)的超聲波預(yù)處理,比未經(jīng)任何預(yù)處理的乙醇產(chǎn)率提高了10.6%。超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理,與未進(jìn)行超聲波處理的稀堿預(yù)處理相比較,超聲波能有效增加NaOH與半纖維素的反應(yīng)性,也能增加其與木質(zhì)素的反應(yīng)性。當(dāng)NaOH的濃度為10g/L時效果最好,所得的乙醇產(chǎn)率最高。預(yù)處理后的結(jié)果表明,超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理可有效提高NaOH對薯渣的處理效果。超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理的乙醇產(chǎn)率為22.4%,與傳統(tǒng)工藝相比,乙醇產(chǎn)率提高了19%。由以上試驗結(jié)果可知,利用超聲波對薯渣進(jìn)行預(yù)處理,乙醇產(chǎn)率提高了9%;超聲波結(jié)合稀酸預(yù)處理,乙醇產(chǎn)率提高了10.6%;超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理,乙醇產(chǎn)率提高了19%。橫向比較,超聲波結(jié)合稀堿預(yù)處理的效果最好。
3 結(jié)論
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