張玲霞
[摘要] 目的 探討尿液中紅細(xì)胞不同檢測方法的對比分析。 方法 采用UF-1000i全自動尿沉渣分析儀和顯微鏡鏡檢對我院門診及住院患者的清晨尿液586例進(jìn)行紅細(xì)胞檢測。 結(jié)果 UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿液的紅細(xì)胞陽性率33.8%,高于顯微鏡檢測的紅細(xì)胞陽性率27.3%。假陽性率為10.3%,假陰性率為3.8%。兩種檢測方法的符合率為91.5%。 結(jié)論 由于干擾UF-1000i檢測尿RBC的因素較多,會出現(xiàn)一定假陽性、假陰性,所以UF-1000i不能完全替代人工鏡檢, 陽性標(biāo)本有必要進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢,從而提高尿液分析檢驗(yàn)質(zhì)量。
[關(guān)鍵詞] 紅細(xì)胞;UF-1000i尿沉渣分析儀;顯微鏡鏡檢
[中圖分類號] R446.12[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B[文章編號] 1673-9701(2012)32-0091-02
尿液紅細(xì)胞(RBC)分析是臨床實(shí)驗(yàn)室中常用的分析指標(biāo),新鮮尿液的紅細(xì)胞形態(tài)與泌尿系統(tǒng)的疾病有關(guān),對鑒別腎小球性與非腎小球性血尿有重要的價(jià)值[1]。日本Sysmex公司生產(chǎn)的UF-1000i全自動尿沉渣分析儀在我院廣泛應(yīng)用,已成為門診和住院患者尿液常規(guī)檢測手段,其采用紅色半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)、全新特異性DNA/RNA細(xì)胞熒光染色技術(shù),同時(shí)采用雙通道(沉渣通道、細(xì)菌通道)分別對尿中各有形成份進(jìn)行特異性的DNA/RNA染色,并通過多角度散色光、多級別熒光強(qiáng)度、新參數(shù)、更多信息三維立體地準(zhǔn)確定位尿中各有形成份,從而獲得尿中各有形成份高精度和高可信度的定量數(shù)據(jù),解決了以往尿沉渣分析手工分片的繁瑣和人為誤差及不能標(biāo)準(zhǔn)化的問題,但是會受尿中某些成分的影響,出現(xiàn)假陽性、假陰性。本文通過UF-1000i與顯微鏡檢查對比分析以及對干擾UF-1000i檢測尿RBC因素的探討,建議在日常工作中對UF-1000i檢測以后陽性標(biāo)本再鏡檢,不僅使結(jié)果的準(zhǔn)確度得到了提高,而且臨床實(shí)用價(jià)值很高。
1 資料與方法
1.1 標(biāo)本來源
隨機(jī)抽取我院門診及住院患者的清晨中段尿液586例,患者年齡18~65歲,男性標(biāo)本263例,女性標(biāo)本323例。
1.2 儀器和試劑
日本Sysmex公司生產(chǎn)的UF-1000i全自動尿沉渣分析儀;日本Olympus光學(xué)顯微鏡;低速離心機(jī)。高、低兩種質(zhì)控品和試劑均為希森美康醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)。
1.3 方法
用潔凈一次性尿杯收集清晨中段尿液,每份尿液標(biāo)本充分混勻后分為2管,每管1 mL,第一管用作UF-1000i檢測,高、低兩種質(zhì)控液檢測在控后檢測受檢標(biāo)本,嚴(yán)格按照UF-1000i操作說明書標(biāo)準(zhǔn)操作;另一管用作顯微鏡檢測,按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]規(guī)定方法,用離心機(jī)以1 500 r/min離心5 min,去掉上清液,留取0.2 mL沉渣,輕輕搖勻涂于載玻片,用蓋玻片覆蓋后鏡檢,在高倍鏡下連續(xù)計(jì)數(shù)至少10個(gè)視野中紅細(xì)胞,分別取其平均值,以上操作必須在收到標(biāo)本后2 h內(nèi)完成。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
所得的數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件行χ2檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)
UF-1000i RBC參考值為:男:(0~10)/μL、女:(0~20)/μL;人工鏡檢RBC參考值為:(0~3)/HP。檢測結(jié)果大于參考值上限時(shí)判為陽性。
2.2 方法學(xué)比較
586例受檢標(biāo)本中,顯微鏡檢測的紅細(xì)胞陽性160例,陽性率27.3%;UF-1000i檢測紅細(xì)胞陽性198例,陽性率33.8%,真陽性率為96.3%,假陽性率為10.3%,真陰性率為89.7%,假陰性率為3.8%;兩種檢測方法的符合率為91.5%。用配對資料χ2檢驗(yàn),對尿RBC的檢測兩種方法有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P < 0.05),見表1。兩種方法檢測尿中紅細(xì)胞陽性率UF-1000 i高于顯微鏡鏡檢,且干擾UF-1000i檢測紅細(xì)胞因素多,導(dǎo)致尿中紅細(xì)胞的假陽性率偏高,影響臨床診治。
3 討論
紅細(xì)胞的檢查是評定患者腎炎、腎結(jié)石等疾病的關(guān)鍵措施,可為疾病的活動性、嚴(yán)重性提供線索,為診斷及鑒別診斷腎臟疾病提供重要的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)。尿沉渣顯微鏡鏡檢一直以來是最重要的參考方法,尿液成分和性質(zhì)的確認(rèn)顯微鏡檢查一直是個(gè)金標(biāo)準(zhǔn)。但是顯微鏡檢測紅細(xì)胞也有很多缺點(diǎn),如離心過程使細(xì)胞丟失、破壞、變形,還有工作者的操作誤差,鏡檢不出已溶解破壞的紅細(xì)胞,可能造成診斷的假陰性[3],很難使檢測結(jié)果達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化。
近年來隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,尿液沉渣檢測由一直依賴于顯微鏡鏡檢到自動化儀器的飛躍,使操作簡單化、測試速度加快、檢測流程標(biāo)準(zhǔn)化,并且攜帶污染率降低。但是受尿中某些成分影響,UF-1000i檢測尿中RBC假陽性率偏高[7]。本組資料顯示RBC假陽性44例,假陽性率為10.3%。其影響因素主要有以下幾方面:由于草酸鈣等結(jié)晶、非晶形鹽類與RBC的形態(tài)大小、染色性非常相似,在散點(diǎn)圖上存在交叉分布,因此對RBC計(jì)數(shù)結(jié)果影響較大[4-5]。類酵母菌可能是由于其在散點(diǎn)圖上分布介于RBC和WBC之間,有和RBC發(fā)生重疊的情況,導(dǎo)致儀器分析信息錯(cuò)誤[5]。細(xì)菌雖然有核,但由于染料對細(xì)菌的膜滲透性低,染色后熒光強(qiáng)度和前向散射光強(qiáng)度也較低,當(dāng)尿中細(xì)菌濃度超過一定量而相互聚集成細(xì)菌團(tuán),其大小與RBC相近,導(dǎo)致儀器有可能將其誤認(rèn)為RBC[6]。脂肪滴、卵磷脂小體以及大量存在的WBC可能在形態(tài)、大小、性質(zhì)方面與RBC接近,導(dǎo)致儀器無法區(qū)分,造成RBC假性增高,說明尿中很多有形成分如較多的結(jié)晶、類酵母菌、細(xì)菌或脂肪滴、卵磷脂小體等存在時(shí)影響UF-1000i檢測RBC,它們陽性時(shí),需要將樣本離心進(jìn)行人工鏡檢,以排除其對檢測RBC的影響,保證尿RBC檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。本組資料中UF-1000i檢測尿中RBC假陰性6例,主要是小紅細(xì)胞和影細(xì)胞的干擾,一些藥物有時(shí)也會使RBC不易被染液著色[8-9]。我院對于臨床醫(yī)生要求鏡檢的標(biāo)本,如腎病內(nèi)科的尿標(biāo)本,不論儀器檢測陽性與否,一律要求工作人員顯微鏡復(fù)檢,以便識別紅細(xì)胞形態(tài),與臨床結(jié)合作出合理判斷。在臨床實(shí)驗(yàn)室工作中,顯微鏡檢測仍然是一種簡便、經(jīng)濟(jì)、結(jié)果可靠的檢測方法。
在實(shí)際日常工作中,UF-1000i更適用于大批量尿液有形成分篩選,而UF-1000i檢測尿中紅細(xì)胞陽性標(biāo)本有必要進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢,這樣更能綜合分析結(jié)果,減少假陽性、假陰性率的發(fā)生,更好地為臨床提供可靠、準(zhǔn)確的分析數(shù)據(jù)。
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(收稿日期:2012-09-28)