文│伋兆法（安徽省和縣畜牧獸醫(yī)局）

安徽和縣肉鴨生產(chǎn)規(guī)模較大，據(jù)監(jiān)測(cè)顯示：肉鴨禽流感（AI）血清抗體水平普遍低，多數(shù)循環(huán)抗體水平在保護(hù)線以下，保護(hù)力很低，免疫接種達(dá)不到預(yù)期的免疫效果。為此，我們對(duì)和縣櫻桃谷肉鴨禽流感母源抗體水平的消長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行了研究，為制定合理的免疫程序提供參考依據(jù)。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)材料。

（1）疫苗。重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型，Re-1株）（250毫升/瓶，肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司）。

（2）試驗(yàn)動(dòng)物。1日齡健康狀況良好的櫻桃谷雛鴨400只，自由飲水和采食，飼喂同一種飼料，試驗(yàn)期間不注射疫苗、不使用藥物。

（3）檢測(cè)試劑。禽流感H5亞型標(biāo)準(zhǔn)抗原、陽性血清、陰性血清（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)），由省動(dòng)物疫病預(yù)防與監(jiān)測(cè)中心免費(fèi)提供。PBS緩沖液自配。

（4）紅細(xì)胞懸液。為減少非特異性凝集反應(yīng)，采集了健康、未免疫禽流感鴨的血液，制備成鴨1%紅細(xì)胞懸液，用于抽樣鴨血清樣品的檢測(cè)。

（5）試驗(yàn)器材。96孔V型微量反應(yīng)板，微量加樣器等。

表1 不同日齡雛鴨母源平均抗體效價(jià)

2.試驗(yàn)方法。

（1）采血。采用隨機(jī)抽樣方式，從1日齡開始每3天采一次血，每次采血32只，不重復(fù)采樣。

（2）血清學(xué)檢測(cè)。應(yīng)用血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)進(jìn)行抗體效價(jià)檢測(cè)，具體操作方法參考《高致病性禽流感診斷技術(shù)規(guī)范》（GB／T18936-2003）進(jìn)行，抗體效價(jià)以log2表示。

（3）判斷標(biāo)準(zhǔn)。以完全抑制凝集的血清最大稀釋孔倍數(shù)為該血清的滴度，即血清效價(jià)HI效價(jià)≥4log2，判定為合格；HI效價(jià)＜4log2，判定為不合格。

二、結(jié)果與分析

1.不同日齡雛鴨的母源抗體效價(jià)。不同日齡雛鴨母源抗體效價(jià)檢測(cè)結(jié)果見表1。從表1可見，雛鴨母源抗體水平最高值在1日齡，平均達(dá)到9log2，4、7、10、13日齡的母源抗體平均效價(jià)分別為8.4log2、5.9log2、3.6log2、2.4log2，說明在7～10日齡之前，母源抗體尚能達(dá)到保護(hù)值。但10日齡以后抗體效價(jià)已起不到保護(hù)作用。

2.不同日齡雛鴨個(gè)體間保護(hù)性母源抗體的比例。由表1可見，1、4、7、10日齡雛鴨個(gè)體間的HI抗體效價(jià)在（5.9～9）log2之間，說明所有個(gè)體的母源抗體都有效，其保護(hù)性抗體的比例達(dá)到100%；到10日齡時(shí)，50%的個(gè)體達(dá)到保護(hù)要求，從22日齡開始，雛鴨母源抗體的合格率為0%。31日齡雛雞母源抗體基本為0。

3.雛鴨的母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律。雛鴨的母源抗體消長(zhǎng)變化見表1。隨著雛鴨日齡的不斷增大，母源抗體效價(jià)呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)。

三、結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雛鴨在31日齡前均能檢測(cè)到母源抗體，且在7～10日齡的HI效價(jià)在臨界點(diǎn)（4log2）之上，此時(shí)母源抗體能起到保護(hù)作用。但隨著日齡的增長(zhǎng)，母源抗體有逐漸下降的趨勢(shì)，31日齡之后，雛鴨的母源抗體效價(jià)基本為0。因此，該縣櫻桃谷肉鴨雛鴨的母源抗體有效保護(hù)期應(yīng)為7～10日齡。