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百里香組織培養(yǎng)技術(shù)的研究

2012-04-10 04:59:40徐榮馬玉魏進(jìn)莉
城市建設(shè)理論研究 2012年6期
關(guān)鍵詞:百里香腋芽瓊脂

徐榮 馬玉 魏進(jìn)莉

摘要:本研究以帶腋芽的莖段為外植體,比較了不同濃度的6-BA 和IAA組合對不定芽的誘導(dǎo)和增殖的效果,以及不同濃度的lBA對生根的影響。提出了百里香叢芽誘導(dǎo)和快速增殖適宜培養(yǎng)基及百里香生根培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基及移栽基質(zhì)。針對野生蒙古百里香在城鎮(zhèn)園林中開發(fā)利用亟待解決的快速繁殖問題開展研究,對豐富城鎮(zhèn)園林綠化植物種類具有重要的理論和實(shí)踐指導(dǎo)意義。

關(guān)鍵詞:百里香;組織培養(yǎng);

隨著全球?qū)Νh(huán)境的重視和花卉產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,不斷有新的種類得到開發(fā)和利用,百里香(Thymus mongolicus Ronn.)就是眾多的在開發(fā)或待開發(fā)的多功能新花卉之一[1]。全世界百里香屬植物約有300—400種,分布在非洲北部、歐洲及亞洲溫帶。中國有11種,2變種[2]。自然分布于西北 華北和東北地區(qū),如內(nèi)蒙、甘肅、陜西,青海、寧夏、新疆、山西、河北、北京,東北等地都有天然分布[3-4]。目前中國的百里香屬植物多處在野生狀態(tài),只在個別地方有引種栽培。百里香屬植物的開發(fā)利用研究才剛剛起步[5-8]。與國外進(jìn)行的百里香開發(fā)研究相比,差距還很大。在英國,已收集了250多個百里香屬植物的野生種和栽培品種,進(jìn)行了苗木生產(chǎn)、園林應(yīng)用等研究。百里香是多年生矮小半灌木,百里香的株型奇特低矮,花型小,花色艷麗,且全株芳香。花期長、植株成簇狀匍匐生長,耐干旱、耐瘠薄、耐寒,是不可多得的優(yōu)良地被植物,可作為優(yōu)良的節(jié)水型園林綠化材料在城市園林綠地中應(yīng)用。目前百里香的開發(fā)利用亟待解決快速繁殖問題。因此,研究建立百里香快速繁殖技術(shù)體系,對豐富城鎮(zhèn)園林綠化植物種類具有重要的理論和實(shí)踐指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料:陜西吳起野生百里香

1.2方法

1.2.1無菌材料的獲得:選取生長健壯、無病蟲害的野生蒙古百里香植株,剪取帶腋芽的莖段,對帶腋芽的莖段沖洗表面,然后用洗滌靈溶液浸泡10min,流水沖洗30min后,在超凈工作臺上,用75%酒精浸泡30s消毒,無菌水沖洗3遍,再用0.1%升汞浸泡8 min,用無菌水沖洗5次,切掉與藥液接觸部位,制成無菌莖段。

項(xiàng)目來源:

作者介紹:徐榮 女,1963年6月生,研究員,博士,從事園林植物繁育技術(shù)研究。

1.2.2 不定芽的分化:將上述處理好的外植體材料,在超凈工作臺上剪切成2~3cm長帶

有2~3個腋芽的莖段,每瓶接種1個莖段,每個處理個30瓶,接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,培養(yǎng)溫度24±2℃,光照度3000 Lux,光質(zhì)為熒光燈,光照12h.d-1。

叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為:

(1)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 0.5mg/L +IAA0.1mg/L,pH5.8-6.0;

(2)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 0.5mg/L +IAA0.5mg/L,pH5.8-6.0

(3)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 0.5mg/L,pH5.8-6.0

(4)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 1mg/L,pH5.8-6.0

1.2.3 叢生芽快速增殖:當(dāng)分化出的叢生芽長到1-1.5cm以上,將叢生芽剪切為每叢2至3個芽,轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng),培養(yǎng)溫度24±2℃,光照度3000 Lux,光質(zhì)為熒光燈,光照12h.d-1。

增殖培養(yǎng)基的配方為:

(1)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 1mg/L +IAA0.1mg/L,pH5.8-6.0

(2)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 1mg/L +IAA0.5mg/L,pH5.8-6.0

(3)MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L 6-BA0.5 mg/L +IAA0.2 mg/L,pH5.8-6.0

1.2.4 生根培養(yǎng):將叢生芽小苗接種到膜封口的瓶裝生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根;每個濃度培養(yǎng)基接9瓶,每瓶5株。培養(yǎng)30天統(tǒng)計(jì)植株長出的主根數(shù)。培養(yǎng)溫度24±2℃,光照度3000 Lux,光質(zhì)為熒光燈,光照12h.d-1。

生根培養(yǎng)基的配方為:

(1)MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 0. 2mg/L,pH5.8-6.0

(2)MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 0. 5mg/L,pH5.8-6.0

(3)MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 0.7 mg/L,pH5.8-6.0

(4)MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 1 mg/L,pH5.8-6.0

1.2.5 煉苗與移栽:在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)26-27天,且長到3cm以上,除去封口膜敞瓶煉苗3-4天,取出組培苗,以每叢5-7株為單位,洗凈根上培養(yǎng)基,在0.5%高錳酸鉀溶液中浸蘸5-10s;進(jìn)行消毒后,移栽到盛有用0.5%高錳酸鉀溶液消毒的營養(yǎng)土的營養(yǎng)缽中栽培。栽培條件為:保持溫度25±2℃左右,空氣濕度80±2%左右,每天噴水3-4次,13至15天成活。營養(yǎng)土的配方為:草炭:珍珠巖:蛭石=2:1:1。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1叢芽的誘導(dǎo)

在叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種后4d時,腋芽明顯膨大,培養(yǎng)15d時,腋芽處長出小芽,培養(yǎng)21天統(tǒng)計(jì),結(jié)果見表1。6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培養(yǎng)基的誘導(dǎo)數(shù)26個,誘導(dǎo)率87.5%,均高于其它培養(yǎng)基。表明:激素濃度6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培養(yǎng)基對百里香叢芽誘導(dǎo)效果較好。

2.2叢生芽快速增殖

增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng),30d統(tǒng)計(jì)增值率。由表2可見,百里香在激素濃度6-BA1 mg/L +IAA0.5 mg/L培養(yǎng)基中的增值率明顯高于6-BA1 mg/L +IAA0.1 mg/L和6-BA0.5+IAA0.2培養(yǎng)基中的增值率。

2.3 生根與移栽

生根培養(yǎng)25天統(tǒng)計(jì)生根結(jié)果(見表3 ),激素濃度IBA 0.7 mg/L生根培養(yǎng)基第5天開始生根,25天平均生根數(shù)為6.9個,顯著高于其它培養(yǎng)基的平均根數(shù),平均根長3.91 cm。生根率為100%。移栽到盛有草炭:珍珠巖:蛭石(2:1:1)營養(yǎng)土的營養(yǎng)缽中栽培,移栽成活率極顯著的高于其它生根培養(yǎng)基(p<0.01)。

大寫字母表示差異到達(dá)極顯著水平(p<0.01),小寫字母表示差異到達(dá)顯著水平(p<0.05)

3 討論

3.1激素濃度6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培養(yǎng)基對百里香叢芽誘導(dǎo)效果較好。

3.2 激素濃度6-BA1 mg/L +IAA0.5 mg/L培養(yǎng)基中的增值率高于其它培養(yǎng)基,是百里香叢

生芽快速增殖適宜的培養(yǎng)基。

3.3激素濃度IBA 0.7 mg/L生根培養(yǎng)基對百里香生根培養(yǎng)的效果極顯著地高于其它激素濃度

的培養(yǎng)基,移栽到盛有草炭:珍珠巖:蛭石(2:1:1)營養(yǎng)土的營養(yǎng)缽中栽培,移栽成

活率極顯著的高于其它生根培養(yǎng)基(p<0.01)。

是百里香生根培養(yǎng)的適宜的培養(yǎng)基。

3.4 本研究成功建立了百里香(Thymus mongolicus Ronn.)快速繁殖的方法和條件,創(chuàng)立了百里香快速繁殖技術(shù)體系。

參考文獻(xiàn)

[1] 周秀梅,李保印. 抗寒耐旱的百里香屬植物資源及其開發(fā)利用[J].干旱區(qū)資源與環(huán)境,2008,vol.22(7).

[2] 中國科學(xué)院中國植物志編寫委員會.中國植物志[M].第 六 十 六 卷.北京:科學(xué)出版社,1977,58- 59.

[3] 內(nèi)蒙古植物志編輯委員會. 內(nèi)蒙古植物志 M . 第五卷.呼和浩特,內(nèi)蒙古人民出版社: 1980. 14- 16.

[4] 劉云斌.百里香天然資源及其園林應(yīng)用[J].林業(yè)實(shí)用技術(shù),2005,(2):43-44.

[5] 李曉東等.普通百里香的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,vol.48(6)1295-1297.

[6]王玲,蘇含英.黑龍江省4種百里香屬植物嫩枝的扦插繁殖[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,vol.36(1).12-13.

[7] 楊莉等.百里香不定芽的增殖研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,vol.49(8)1807-1809.

[8] 高潤宏等.地被植物百里香在干旱區(qū)綠化資源利用的評價[J].中國草地,2005,vol.,27 (3)57-60.

“十一五”國家科技支撐計(jì)劃課題《城鎮(zhèn)綠地生態(tài)建設(shè)綜合技術(shù)示范研究》

課題號2008BAJ10B06

注:文章內(nèi)所有公式及圖表請以PDF形式查看。

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