呂 申

(大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 實(shí)驗(yàn)中心，遼寧 大連 116027)

基因組完整與穩(wěn)定是維持細(xì)胞正常生存行使功能的基礎(chǔ)。在生命過程中，人類細(xì)胞基因組總是不可避免地會(huì)受到來(lái)自體內(nèi)外環(huán)境的物理、化學(xué)、生物等因子的損傷，如：紫外線、放射線、煙霧、細(xì)胞代謝產(chǎn)生的氧自由基、病毒等。同時(shí)在細(xì)胞增殖的DNA復(fù)制過程基因組也會(huì)發(fā)生一些錯(cuò)誤。為了維持基因組的穩(wěn)定，生物體在進(jìn)化過程中形成了一整套完整的DNA損傷修復(fù)系統(tǒng)。這一系統(tǒng)中的DNA損傷修復(fù)方式主要有3種：核苷酸切除修復(fù)(nucleotide excision repair, NER)、堿基切除修復(fù)(base excision repair, BER)和DNA錯(cuò)配修復(fù)(mismatch repair, MMR)。這些修復(fù)方式所涉及參與DNA修復(fù)的基因有130多個(gè)，如切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(excision repair cross-complementing gene l, ERCC1 )、X線修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(X- ray cross-complementing gene l, XRCC1)、多個(gè)錯(cuò)配修復(fù)基因、O6-甲基鳥嘌呤- DNA甲基轉(zhuǎn)移酶基因(MGMT)等。這些基因中的某一個(gè)或某幾個(gè)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)或功能異常時(shí)，細(xì)胞的DNA修復(fù)功能就會(huì)發(fā)生缺欠，進(jìn)而細(xì)胞基因組中未能得以修復(fù)的“錯(cuò)誤”將不斷積累，細(xì)胞基因組的完整性和穩(wěn)定性也就難以得到保證。這些“錯(cuò)誤”將可能使一些抑癌基因失活，也可能使一些原癌基因被激活，最終導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。近年來(lái)人們發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的DNA修復(fù)功能狀態(tài)不僅與腫瘤發(fā)生相關(guān)，也與腫瘤化療耐藥性的產(chǎn)生有關(guān)。

1 ERCC1基因

1.1 ERCC1基因結(jié)構(gòu)、功能及多態(tài)性

ERCC1基因定位于染色體的19q13.32，全長(zhǎng)15 kb，含有10個(gè)外顯子。該基因編碼的蛋白分子量為32.5 kDa，由297個(gè)氨基酸組成，是一種高度保守的單鏈DNA核酸內(nèi)切酶，是核苷酸切除修復(fù)系統(tǒng)中的主要蛋白。ERCC1蛋白通過與其他的修復(fù)蛋白形成蛋白復(fù)合體，發(fā)揮識(shí)別損傷DNA 的5’端及5’- 3’核酸內(nèi)切酶活性，參與修復(fù)由紫外線引起的嘧啶二聚體、大分子化學(xué)加合物及一些其他光產(chǎn)物引起的DNA損傷。

ERCC1基因比較常見的單核苷酸多態(tài)有兩種，分別為第4外顯子的T19007C和3’非編碼區(qū)的C8092A。目前，報(bào)道較多的是第4外顯子的T19007C，它會(huì)導(dǎo)致118號(hào)密碼子的編碼序列發(fā)生改變。雖然118號(hào)密碼子的編碼序列發(fā)生了改變后的編碼氨基酸仍然是天冬酰胺，但值得注意的是，這一轉(zhuǎn)變使ERCC1基因的轉(zhuǎn)錄水平降低，細(xì)胞的ERCC1蛋白表達(dá)也隨之降低，最終引起細(xì)胞核苷酸切除修復(fù)能力的降低。ERCC1基因3’非編碼區(qū)的C8092A轉(zhuǎn)變可能通過使ERCC1 mRNA轉(zhuǎn)錄受到抑制或者使mRNA穩(wěn)定性降低而導(dǎo)致細(xì)胞的DNA核苷酸切除修復(fù)能力降低。

1.2 ERCC1基因異常與腫瘤發(fā)生

目前，關(guān)于ERCC1基因多態(tài)性與人類腫瘤發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的研究有很多，但研究結(jié)果尚不統(tǒng)一。種族或腫瘤類型常使研究結(jié)果出現(xiàn)分歧。Zienolddiny S等[1]發(fā)現(xiàn)，ERCC1基因T19007C多態(tài)性與挪威人非小細(xì)胞肺癌發(fā)病有關(guān)，而Zhou W、Matullo G及Vogel U等[2-4]則認(rèn)為該多態(tài)與丹麥人、美國(guó)人及不吸煙歐洲人的非小細(xì)胞肺癌發(fā)病無(wú)關(guān)。Jo H及Han SS等[5-6]研究發(fā)現(xiàn)，ERCC1基因T19007C多態(tài)性與韓國(guó)人群卵巢癌及子宮內(nèi)膜癌發(fā)病均無(wú)關(guān)，而且在后來(lái)的研究中該實(shí)驗(yàn)組也并未發(fā)現(xiàn)該多態(tài)性與韓國(guó)人群宮頸癌發(fā)病有關(guān)。另外，Sturgis EM及Yang ZH等[7-8]研究提出，ERCC1基因的C8092A多態(tài)性與美國(guó)人群的頭頸鱗狀細(xì)胞癌及中國(guó)人群的鼻咽癌發(fā)病密切相關(guān)，但Zienolddiny S及Weiss JM等[1,9]研究者則發(fā)現(xiàn)，該多態(tài)性與挪威人群非小細(xì)胞肺癌及美國(guó)人群子宮內(nèi)膜癌發(fā)病無(wú)關(guān)。

1.3 ERCC1基因與化療

鉑類是常見的抗腫瘤藥物之一，其作用的靶點(diǎn)為細(xì)胞內(nèi)的DNA，通過形成鉑-DNA加合物，破壞DNA的結(jié)構(gòu)，抑制DNA的復(fù)制及轉(zhuǎn)錄，達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的目的。如前所述，ERCC1蛋白參與修復(fù)一些大分子加合物引起的DNA損傷，理論上該蛋白可以使細(xì)胞內(nèi)的鉑-DNA加合物得以有效清除，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)鉑類耐藥。這一理論已被一些研究結(jié)果證實(shí)。 Kawashima A等[10]檢測(cè)了4例體外培養(yǎng)膀胱癌細(xì)胞株(其中2例為順鉑耐藥株)的ERCC1蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)順鉑耐藥細(xì)胞的ERCC1蛋白表達(dá)水平高于非耐藥株；一些學(xué)者對(duì)卵巢癌細(xì)胞株的研究也證實(shí)，順鉑耐藥的細(xì)胞株ERCC1 mRNA及蛋白表達(dá)水平均高于未接受化療的細(xì)胞株[11]；Olaussen等[12]進(jìn)行的臨床試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，與ERCC1蛋白表達(dá)陽(yáng)性非小細(xì)胞肺癌的患者相比，該蛋白表達(dá)陰性的患者更容易從以順鉑為主的化療中受益；Bellmunt等[13]也報(bào)道，以順鉑進(jìn)行治療的ERCC1 mRNA 低水平的進(jìn)展期膀胱癌患者預(yù)后明顯優(yōu)于ERCC1 mRNA 高水平的患者。由此提示，ERCC1 mRNA或蛋白表達(dá)水平的高低對(duì)篩選鉑類治療腫瘤患者的敏感人群具有一定的指導(dǎo)作用。

2 XRCC1基因

2.1 XRCC1基因結(jié)構(gòu)、功能與多態(tài)性

XRCC1基因是第一個(gè)被克隆出來(lái)的參與單鏈斷裂修復(fù)的人類基因，它定位于染色體的19q13.2，全長(zhǎng)33 kb，含有17個(gè)外顯子。其編碼蛋白由633個(gè)氨基酸組成，分子量為70 kDa，在大腸組織表達(dá)水平較高，而在其它組織的表達(dá)水平較低。XRCC1蛋白表達(dá)較低的細(xì)胞對(duì)電離輻射、過氧化氫、烷化劑等損傷的敏感性較高。XRCC1蛋白是堿基切除修復(fù)系統(tǒng)的主要蛋白，雖然本身沒有催化酶的活性，但是它具有的三個(gè)功能區(qū)可以與DNA連接酶III、DNA聚合酶β、聚腺苷二磷酸核糖基聚合酶(PARP)結(jié)合形成復(fù)合物，修復(fù)由氧化劑、電離輻射及烷化劑引起的堿基損傷及DNA單鏈斷裂。

對(duì)XRCC1基因DNA序列分析發(fā)現(xiàn)，該基因有300多個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)，其中約有35個(gè)多態(tài)位點(diǎn)位于外顯子或啟動(dòng)子區(qū)域。研究最多的3個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分別是第6外顯子的C26304T、第9外顯子的G27466A和第10外顯子的G28152A。它們可以導(dǎo)致氨基酸殘基發(fā)生相應(yīng)的改變(Arg194Trp、Arg280His 、Arg399Gln)。這些編碼區(qū)氨基酸序列的改變通過影響XRCC1蛋白與BER系統(tǒng)中其它蛋白的相互作用使細(xì)胞的DNA修復(fù)功能發(fā)生變化。

2.2 XRCC1基因與腫瘤發(fā)生

大量研究結(jié)果表明一些基因的多態(tài)性可能影響人群的腫瘤發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。目前，雖然XRCC1基因單核苷酸多態(tài)與腫瘤易感性的相關(guān)研究較多，但研究結(jié)果尚未得到共識(shí)。該基因的同一種單核苷酸多態(tài)可以增加一些腫瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，但卻能降低另一些腫瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。例如，Arg194Trp單核苷酸多態(tài)可以增加食管癌及膽管癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，但可以降低胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；Arg280His單核苷酸多態(tài)被認(rèn)為與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)，而與膽管癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低有關(guān)；Arg399Gln單核苷酸多態(tài)被認(rèn)為與日本人女性子宮頸癌易感性增高有關(guān)。

Hung RJ 等[14]對(duì)來(lái)自三項(xiàng)研究的2 188例肺癌病例及2198例對(duì)照進(jìn)行薈萃分析，發(fā)現(xiàn)Arg194Trp、Arg280His 和Arg399Gln三種單核苷酸多態(tài)均與肺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)不大，但根據(jù)吸煙量進(jìn)行分組研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，在重度吸煙組(每年吸煙量>38.26包)，Arg194Trp和Arg280His的單核苷酸多態(tài)與肺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低有關(guān)。Susana N等[15]報(bào)告，Arg194Trp與Arg399Gln單核苷酸多態(tài)與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)不大，一些研究者也發(fā)表了相似的研究結(jié)果，但一項(xiàng)印度的研究卻報(bào)道這兩個(gè)位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增高相關(guān)[16-18]。這些研究結(jié)果的差異可能與不同地區(qū)、不同人種XRCC1基因多態(tài)性發(fā)生頻率高低有關(guān)。Susana N等進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，絕經(jīng)年齡在45～55歲之間患者的Arg194Trp單核苷酸多態(tài)及絕經(jīng)年齡55歲以上患者的Arg399Gln單核苷酸多態(tài)會(huì)顯著增加乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。該發(fā)現(xiàn)提示女性絕經(jīng)狀態(tài)可能是影響XRCC1蛋白修復(fù)功能的一個(gè)重要因素。

2.3 XRCC1基因與化療

鑒于XRCC1基因多態(tài)性會(huì)影響細(xì)胞的DNA修復(fù)能力，該基因常見的單核苷酸多態(tài)與腫瘤化療反應(yīng)的關(guān)系已引起了研究者們的關(guān)注。多項(xiàng)研究結(jié)果提示XRCC1基因多態(tài)性的確與多種腫瘤的化療反應(yīng)有關(guān)，但研究結(jié)果仍然存在一些分歧。Wang等[19]對(duì)接受鉑類藥物化療的105例非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行臨床研究發(fā)現(xiàn)，攜帶194Trp/Trp或194Arg/Trp基因型患者的化療效果明顯優(yōu)于攜帶194Arg/Arg基因型患者，而攜帶399Arg/Arg基因型患者的化療效果明顯優(yōu)于攜帶399 Arg/Gln或399Gln/Gln基因型患者；Shi MQ等[20]研究發(fā)現(xiàn)，攜帶194Arg/Arg基因型的進(jìn)展期肺癌患者對(duì)鉑類藥物化療的耐藥風(fēng)險(xiǎn)是攜帶194Trp/Trp基因型患者的5倍，但沒有發(fā)現(xiàn)399密碼子多態(tài)與患者化療反應(yīng)有關(guān)；Moreno V等[21]報(bào)道，攜帶399Gln/Gln基因型的大腸癌患者的化療反應(yīng)優(yōu)于攜帶399Arg/Arg或399 Arg/Gln患者。盡管造成上述結(jié)果的差異尚未完全清楚，但檢測(cè)XRCC1基因多態(tài)及其蛋白表達(dá)將可能會(huì)對(duì)篩選某些細(xì)胞毒性藥物的受益人群有所幫助。

3 MMR基因

3.1 MMR基因結(jié)構(gòu)與功能

MMR主要參與修復(fù)DNA復(fù)制過程中形成的單堿基錯(cuò)配及插入/缺失環(huán)。 MMR系統(tǒng)中識(shí)別錯(cuò)配DNA的MutS同源物命名為hMSH(human MutS homologs)，主要包括hMSH2、hMSH3、hMSH4、hMSH5、hMSH6，構(gòu)成兩種異源二聚體：MutSα和MutSβ。MutSα由hMSH2和hMSH6構(gòu)成，主要功能是識(shí)別單堿基錯(cuò)配(G/T，A/C)、短的插入/缺失環(huán)，同時(shí)還能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，是MutS的主要功能行使者；MutSβ由hMSH2和hMSH3組成，主要功能是識(shí)別較大的插入/缺失環(huán)，這兩種復(fù)合物的功能具有一定程度的重疊。MMR系統(tǒng)中的MutL同源物命名為hMLH(human MutL homologs)，主要包括hMLH1、hPMS1、hPMS2，構(gòu)成三種異源二聚體：MutLα、MutLβ和MutLχ。MutLα由hMLH1和hPMS2構(gòu)成，是hMLH最主要的異源二聚體形式，主要參與糾正單堿基錯(cuò)配及插入/缺失環(huán)，也在細(xì)胞減數(shù)分裂過程中發(fā)揮重要作用；MutLβ由hMLH1和hPMS1構(gòu)成，該復(fù)合物在人類DNA錯(cuò)配修復(fù)過程中的具體作用尚不明確；MutLχ由hMLH1和hMLH3構(gòu)成，由于hMLH3的缺失并不會(huì)損傷MMR系統(tǒng)的功能，因此MutLχ并不是細(xì)胞DNA錯(cuò)配修復(fù)所必須的。值得注意的是，hMSH2及hMLH1是上述多種復(fù)合物的基本成員，二者中任何一個(gè)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)或功能的異常均可能導(dǎo)致細(xì)胞MMR功能的降低甚至喪失。而復(fù)合物中的其他成員丟失(如hMSH6)只會(huì)減弱MMR系統(tǒng)糾正單堿基錯(cuò)配及插入/缺失環(huán)的功能。

3.2 MMR基因與腫瘤發(fā)生

MMR系統(tǒng)功能缺失可以由突變、缺失或錯(cuò)配修復(fù)基因后天性沉默等多種因素引起。MMR功能缺失使細(xì)胞不能有效修復(fù)DNA復(fù)制時(shí)出現(xiàn)的錯(cuò)誤，這些錯(cuò)誤的累積造成基因突變發(fā)生頻率的增高，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞基因組的不穩(wěn)定，尤其見于DNA序列中的一些短串聯(lián)重復(fù)序列(微衛(wèi)星)，即，微衛(wèi)星不穩(wěn)定(microsatellite instability, MSI)。研究證實(shí)，MMR功能缺失普遍見于大腸癌、子宮內(nèi)膜癌等惡性腫瘤[22-25]。HNPCC的MMR功能缺失主要是由于錯(cuò)配修復(fù)基因hMLH1、hMSH2及hMSH6突變引起的，hMLH1、hMSH2突變約占所有突變的90%，hMSH6突變占所有突變的10%。散發(fā)性大腸癌MMR功能缺失則是由hMLH1啟動(dòng)子超甲基化引起的基因沉默所致。本課題組的研究發(fā)現(xiàn)，胃癌等消化道腫瘤以及肺癌腫瘤細(xì)胞常出現(xiàn)MMR蛋白表達(dá)的增高[26-29]。這與他人的一些研究結(jié)果好像存在一定的差異，在邏輯上似乎也存在一定的矛盾。人們一定會(huì)問： MMR蛋白表達(dá)增高細(xì)胞基因組中的突變?cè)趺催€會(huì)增多？如果從相反的方向考慮，將可能得到比較合理的解釋。腫瘤細(xì)胞多處于DNA復(fù)制的細(xì)胞增殖狀態(tài)，此時(shí)細(xì)胞基因組中的堿基錯(cuò)配增多，基因組穩(wěn)定性減弱，為維護(hù)細(xì)胞的基因組穩(wěn)定性及遺傳保真性，細(xì)胞需要通過加強(qiáng)MMR蛋白表達(dá)來(lái)增強(qiáng)對(duì)錯(cuò)配的修復(fù)，也就是說(shuō)腫瘤細(xì)胞中的MMR蛋白表達(dá)增多可能是堿基錯(cuò)配增多的結(jié)果，而不是原因。可見，MMR蛋白表達(dá)的增高和降低均可能成為腫瘤預(yù)警的標(biāo)志。

3.3 MMR基因與化療

大量體外實(shí)驗(yàn)提示，MMR功能缺失與腫瘤的鉑類藥物耐藥發(fā)生有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，hMLH1功能缺失的大腸癌細(xì)胞株HCT116和hMSH2功能缺失的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC59對(duì)順鉑耐藥程度分別是hMLH1和 hMSH2功能正常細(xì)胞株的2.1倍和1.8倍[30]。這可能是由于MMR功能缺失除了能夠引起非編碼序列的突變外，也能引起控制藥物敏感性基因的突變，從而引起對(duì)化療藥物耐藥。也有學(xué)者提出了無(wú)效循環(huán)模型來(lái)解釋為什么與MMR功能正常的腫瘤細(xì)胞相比，MMR功能缺失的腫瘤細(xì)胞更易出現(xiàn)對(duì)化療藥物耐藥現(xiàn)象，這可能是由于MMR功能正常時(shí)能夠識(shí)別并切除鉑類藥物引起的DNA損傷，另一條鏈仍然被保存，并作為模板鏈進(jìn)行新DNA鏈的合成，但由于DNA損傷仍然被保留下來(lái)，故引起錯(cuò)配的無(wú)效循環(huán)，最終引起細(xì)胞死亡，而MMR功能缺失時(shí)，鉑類藥物引起的DNA損傷就不能被識(shí)別和切除，細(xì)胞繼續(xù)存活，繼而產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象。但也有研究發(fā)現(xiàn)，MMR功能缺失的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)替莫唑胺等化療藥物不耐藥[31]。綜上，MMR功能缺失的腫瘤細(xì)胞是否容易產(chǎn)生耐藥，可能因腫瘤細(xì)胞分子類型或藥物種類而異。這一問題，將可能成為腫瘤耐藥性研究的熱點(diǎn)。

4 MGMT基因

4.1 MGMT基因結(jié)構(gòu)與功能

O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)基因是一種DNA修復(fù)基因，定位于染色體 10q26，基因全長(zhǎng)約 170 kb，由 5個(gè)外顯子以及 4個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成。該基因編碼的蛋白由207個(gè)氨基酸組成，是一種特殊的DNA損傷修復(fù)蛋白，通過將DNA分子中的O6-甲基鳥嘌呤上的甲基轉(zhuǎn)移到自身的半胱氨酸殘基上而達(dá)到修復(fù)DNA的目的。因此，MGMT蛋白可保護(hù)染色體免受烷化劑的致突變、致癌和細(xì)胞毒作用的損傷，而且有足夠證據(jù)表明該蛋白表達(dá)缺失時(shí)會(huì)顯著增加G-A突變頻率，尤其是K-RAS基因。

4.2 MGMT基因與腫瘤發(fā)生

研究發(fā)現(xiàn)，MGMT蛋白表達(dá)缺失可能與惡性膠質(zhì)瘤、食管癌、大腸癌等惡性腫瘤的形成有關(guān)[32-34]?，F(xiàn)已證實(shí)，基因缺失、突變、重排并不是MGMT蛋白表達(dá)缺失的主要原因，而MGMT基因啟動(dòng)子CpG島超甲基化則是其編碼蛋白表達(dá)缺失的最主要機(jī)制。

Fritz G等[35]研究發(fā)現(xiàn)，烷化劑、吸煙、X射線等致DNA損傷的外源性因素能夠上調(diào)細(xì)胞內(nèi)MGMT蛋白表達(dá)。另有研究發(fā)現(xiàn)，MGMT蛋白在甲狀腺癌及大腸癌組織中的表達(dá)顯著高于癌旁黏膜[36-37]。本課題組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌組織、大腸癌組織MGMT蛋白表達(dá)顯著高于癌旁組織，國(guó)內(nèi)呂金芳等的研究也得出了相似的結(jié)果[29,38-39]。這些研究結(jié)果提示，MGMT蛋白高表達(dá)可能是診斷腫瘤的一個(gè)參考指標(biāo)。而這些結(jié)果與之前提到的MGMT蛋白表達(dá)缺失與腫瘤形成有關(guān)似乎有矛盾，當(dāng)然這一矛盾可能是由于研究人群種族差異所致，然而，從不同的角度(原因及代償性結(jié)果)進(jìn)行考慮也可以得到合理的解釋。同另幾種DNA修復(fù)蛋白一樣，MGMT蛋白表達(dá)的增高和降低亦都可以是腫瘤預(yù)警的標(biāo)志。

4.3 MGMT基因與化療

烷化劑是治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤、惡性黑色素瘤、淋巴瘤等很多惡性腫瘤的主要化療藥物，但其作用效果受腫瘤細(xì)胞DNA修復(fù)機(jī)能的影響。大量的臨床前體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)提示，這類藥物主要是通過促使DNA分子上O6-甲基鳥嘌呤形成殺死腫瘤細(xì)胞，而MGMT蛋白則通過對(duì)損傷部位的修復(fù)使腫瘤細(xì)胞對(duì)這類化療藥物耐藥。研究表明，細(xì)胞對(duì)烷化劑的敏感性與其MGMT活性負(fù)相關(guān)，MGMT功能缺陷的細(xì)胞對(duì)烷化劑引起的細(xì)胞毒作用或者致突變作用比較敏感。更值得注意的是，MGMT敲除鼠對(duì)烷化劑所引起的細(xì)胞毒作用比較敏感，而MGMT過表達(dá)鼠則對(duì)烷化劑耐藥[40]。Lin JW等[41]研究發(fā)現(xiàn)，MGMT 蛋白表達(dá)缺失與膠質(zhì)瘤患者烷化劑藥物治療敏感有關(guān)。由于啟動(dòng)子甲基化常是MGMT表達(dá)降低的原因，所以MGMT啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)可能是預(yù)示腫瘤烷化劑化療成敗的一個(gè)因素，檢測(cè)其甲基化狀態(tài)有助于篩選能夠從烷化劑治療中受益的腫瘤患者。

5 展 望

DNA修復(fù)蛋白功能異常時(shí)細(xì)胞不能有效修復(fù)基因組的錯(cuò)誤，致使錯(cuò)誤不斷累積，最終發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，形成腫瘤。目前有關(guān)DNA修復(fù)功能異常與腫瘤發(fā)生關(guān)系的研究結(jié)果存在很大分歧。例如：在不同類型組織，ERCC1及XRCC1的基因多態(tài)性與腫瘤易感性并無(wú)明確相關(guān)性，MMR及MGMT蛋白表達(dá)異常與不同類型腫瘤發(fā)生的關(guān)系也無(wú)定論。值得注意的是MMR及MGMT蛋白表達(dá)缺失不僅與多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，腫瘤細(xì)胞也常出現(xiàn)它們的高表達(dá)，甚至在癌旁組織也常出現(xiàn)它們的高表達(dá)。這提示盡管MMR及MGMT蛋白表達(dá)對(duì)具體腫瘤的診斷作用尚未明確，但它們表達(dá)的增高或降低都可能成為惡性腫瘤診斷的標(biāo)志。這方面的相關(guān)研究將可能成為腫瘤臨床研究的熱點(diǎn)。

化療是大多數(shù)晚期腫瘤患者或者經(jīng)過手術(shù)切除但沒有得到完全根治患者的主要治療方法，該方法能夠在一定程度上延長(zhǎng)腫瘤患者的生存時(shí)間，但較強(qiáng)的毒副作用及耐藥性產(chǎn)生使化療的臨床應(yīng)用受到限制。如何為腫瘤患者篩選出最佳化療藥物已成為臨床亟待解決的問題。DNA修復(fù)功能異常不僅與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，也與腫瘤化療耐藥性產(chǎn)生密不可分。因此，檢測(cè)腫瘤細(xì)胞DNA修復(fù)蛋白表達(dá)對(duì)確定腫瘤患者的臨床用藥將有一定的指導(dǎo)作用，但如何指導(dǎo)某一特定腫瘤患者的個(gè)體化用藥尚需臨床醫(yī)生與基礎(chǔ)研究者的進(jìn)一步共同艱苦努力，從而為腫瘤患者提供有的放矢的個(gè)體化治療，有效地減少化療藥物的毒副作用及耐藥性產(chǎn)生。

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