祝晨蔯，鄧貴華，林朝展

廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院廣中尖峰天然產(chǎn)物共建實驗室，廣州510006

苦木化學(xué)成分研究

祝晨蔯，鄧貴華，林朝展*

廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院廣中尖峰天然產(chǎn)物共建實驗室，廣州510006

運用各種柱色譜和重結(jié)晶等方法對苦木Picrasma quassioides(D.Don)Benn.進(jìn)行分離純化，得到五個化合物。通過NMR等現(xiàn)代波譜學(xué)方法和技術(shù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)分別為：高麗槐素-3-O-β-D-葡萄糖苷(trifolirhizin，1)，高麗槐素(maackiain，2)，3'，7-二羥基-4'-甲氧基異黃酮(3'，7-dihydroxy-4'-methoxyisoflavone，3)，7-羥基香豆素(umbelliferone，4)和大黃素(emodin，5)。五個化合物均為首次從該屬植物中分離得到。

苦木;化學(xué)成分

苦木Picrasma quassioides(D.Don)Benn.為苦木科苦樹屬植物。其性寒，味苦，歸肺、大腸經(jīng)，有清熱燥濕、解毒、殺蟲之功效。臨床上多用于抗感染、降血壓等方面的治療。主要分布于我國黃河以南各省，以廣東廣西山區(qū)資源最為豐富［1，2］。苦木化學(xué)成分復(fù)雜，目前國內(nèi)外對其化學(xué)成分的報道有鐵屎米酮類生物堿、咔巴啉類生物堿、苦木苦味素、甘遂型三萜、酚苷、酚酸、苯丙素、二氫黃酮苷類化合物［3-7］。為了進(jìn)一步研究該藥的活性成分，作者從苦木乙醇提取物中分離鑒定了5個化合物，分別為高麗槐素-3-O-β-D-葡萄糖苷(1)，maackiain(2)，3'，7-二羥基-4'-甲氧基異黃酮(3)，7-羥基香豆素(4)和大黃素(5)。這五個化合物均為首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

熔點用X-6顯微熔點測定儀測定(北京泰克儀器有限公司，未校正);NMR用AVANCE AV 500超導(dǎo)核磁共振儀(瑞士Bruker)測定，TMS內(nèi)標(biāo);MS用Finnigan LCQ Deca XP MAX(液相色譜-質(zhì)譜連用儀)Thermo Finingan公司(美國)或Waters HPLCESI-MSn(美國)。柱層析硅膠和薄層層析硅膠(青島海洋化工廠);所有分離用有機(jī)溶劑均為國產(chǎn)分析純(廣州化學(xué)試劑廠);反相硅膠：RP-C18(40～63 μm)，Merck KGaA，Germany;Sephadex LH-20(25～100 μm)，GE Healthcare Bio-Sciences AB，Sweden。氘代試劑：吡啶(NORELL，USA)，氯仿(Cambridge I-sotope Laboratories，USA)，DMSO(NORELL，USA)。

實驗所用苦木樣品于2009年10月由廣州白云山藥廠提供，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院祝晨蔯研究院鑒定學(xué)名為苦木科(Simaroubaceae)苦樹屬(Picrasma Bl.)植物苦木(Picrasma quassioides)，憑證標(biāo)本現(xiàn)保存于廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院藥物分析研究室。

2 提取與分離

取干燥的苦木藥材15.0 kg，粉碎，用95%乙醇滲漉提取，將提取液減壓濃縮得到浸膏350 g。將浸膏混懸于3.0 L蒸餾水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行反復(fù)萃取，將萃取液分別進(jìn)行減壓濃縮，得到石油醚萃取物2.17 g，乙酸乙酯萃取物71 g，正丁醇萃取物280 g。將乙酸乙酯萃取物經(jīng)200～300目的硅膠柱色譜，以不同濃度的氯仿-甲醇(100∶0～1∶1)進(jìn)行梯度洗脫，洗脫液每500 mL接收一份，以TLC檢測、合并，得到13個流分。其中Fr.5再次進(jìn)行硅膠柱層析，以環(huán)己烷-丙酮(8∶1)進(jìn)行洗脫，得到6個流分，F(xiàn)r.5-4反復(fù)進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿-環(huán)己烷(90∶1)洗脫，得到化合物 2 (189.6 mg)。Fr.6再次經(jīng)硅膠柱色譜，分了12個次流分，其中Fr.6-7經(jīng)反相硅膠柱色譜，以60%甲醇水洗脫，得到化合物5(30.0 mg);Fr.6-9經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜，以甲醇水洗脫，得到化合物4(16.5 mg)。Fr.7再次進(jìn)行硅膠柱層析，共得到16個次流分，其中 Fr.7-13經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜，以甲醇水洗脫，得到化合物3(10.0 mg)。Fr.10有淡黃色無定型粉末析出，經(jīng)甲醇反復(fù)重結(jié)晶后得到化合物1(1.00 g)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色結(jié)晶性粉末(甲醇)，分子式C23H24O10，mp.146～147℃，ESI-MS m/z 447［M+ H］+。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ：7.36(1H，d，J =8.5 Hz，H-1)，6.70(1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-2)，6.56(1H，d，J=2.5 Hz，H-4)，3.65-3.67(2H，m，H-6)，4.27(1H，dd，J=10.5，4.5 Hz，H-6a)，6.98(1H，s，H-7)，6.53(1H，s，H-10)，5.57(1H，d，J =7.5 Hz，H-11a)，4.84(1H，d，J=7.5 Hz，H-1')，3.16-3.28(3H，m，H-2'，H-3'，H-4')，4.12(1H，dd，J=10.5，5.0 Hz，H-5')，5.93(2H，d，J=10.0 Hz，-O-CH2-O-)。13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ：132.1(d，C-1)，110.6(d，C-2)，158.7(s，C-3)，104.2(d，C-4)，156.4(s，C-4a)，66.0(t，C-6)，48.8 (d，C-6a)，118.4(s，C-6b)，105.5(d，C-7)，141.3 (s，C-8)，147.7(s，C-9)，93.4(d，C-10)，153.8(s，C-10a)，77.8(d，C-11a)，114.4(s，C-11b)，100.5 (d，C-1')，73.4(d，C-2')，76.7(d，C-3')，69.9(d，C-4')，77.2(d，C-5')，60.9(t，C-6')，101.2(t，-OCH2-O-)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］一致，故化合物1鑒定為高麗槐素-3-O-β-D-葡萄糖苷(trifolirhizin)。

化合物2 淡黃色針狀結(jié)晶(甲醇)，分子式C16H12O5，mp.165℃，ESI-MS m/z 285［M+H］+。1H NMR(pyridine-d5，500 MHz)δ：7.57(1H，s，H-1)，6.95(1H，d，J=8.5，2.5 Hz，H-2)，6.87(1H，br.s，H-4)，4.28(1H，d，J=11.0，5.0 Hz，H-6eq)，3.80 (1H，t，J=11.5，10.5 Hz，H-6ax)，3.51(1H，m，H-6a)，6.88(1H，s，H-7)，6.68(1H，s，H-10)，5.60 (1H，d，J=7.0 Hz，H-11a)，5.68(2H，d，J=15.5 Hz，-O-CH2-O-)。13C NMR(pyridine-d5，125 MHz)δ：132.7(d，C-1)，110.9(d，C-2)，160.6(s，C-3)，104.2(d，C-4)，157.4(s，C-4a)，66.8(t，C-6)，40.7 (d，C-6a)，118.9(s，C-6b)，105.5(d，C-7)，142.0 (s，C-8)，148.5(s，C-9)，93.9(d，C-10)，154.9(s，C-10a)，79.1(d，C-11a)，111.9(s，C-11b)，101.7 (t，-O-CH2-O-)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］一致，故化合物2鑒定為高麗槐素(maackiain)。

化合物3 白色無定型粉末(甲醇)，分子式C16H12O5，ESI-MS m/z 285［M+H］+。1H NMR(pyridine-d5，500 MHz)δ：8.22(1H，s，H-2)，8.49(1H，d，J=8.5 Hz，H-5)，7.37(1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6)，7.15(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，7.60(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2')，7.32(1H，d，J=8.0 Hz，H-2')，7.25 (1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6')，3.81(3H，s，OCH3)。13C NMR(pyridine-d5，125 MHz)δ：152.7(d，C-2)，124.1(s，C-3)，175.7(s，C-4)，128.2(d，C-5)，115.9(d，C-6)，164.1(s，C-7)，103.1(d，C-8)，158.5(s，C-9)，117.9(s，C-10)，125.0(s，C-1')，116.4(d，C-2')，148.4(s，C-3')，146.6(s，C-4')，114.0(d，C-5')，122.5(d，C-6')，55.9(q，OCH3-3')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］一致，故化合物3鑒定為3'，7-二羥基-4'-甲氧基異黃酮(3'，7-dihydroxy-4'-methoxyisoflavone)。

化合物4 針狀結(jié)晶(氯仿)，硅膠TLC上FeCl3-K3［Fe(CN)6］試劑噴霧顯藍(lán)色，UV 365 nm下顯天藍(lán)色熒光，提示可能為含有酚羥基的香豆素類化合物。分子式 C9H6O3，ESI-MS m/z 163［M+ H］+。1H NMR(pyridine-d5，500 MHz)δ：7.70(1H，d，J=9.5 Hz，H-1)，6.26(1H，d，J=9.5 Hz，H-2)，7.00(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，7.10(1H，t，J=9.0，2.0 Hz，H-8)，7.40(1H，d，J=9.5 Hz，H-9)。13C NMR(pyridine-d5，125 MHz)δ：144.1(d，C-1)，113.8 (d，C-2)，161.1(s，C-3)，156.5(d，C-5)，103.1(s，C-6)，162.8(d，C-7)，111.8(d，C-8)，129.7(s，C-9)，111.7(s，C-10)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］一致，故化合物4鑒定為7-羥基香豆素(umbelliferone)。

化合物5 橙色固體(甲醇)，分子式C15H10O5，ESI-MS m/z 271［M+H］+。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ：7.19(1H，d，J=2.5 Hz，H-2)，7.52(1H，d，J=1.5 Hz，H-4)：7.14(1H，d，J=2.5 Hz，H-5)，6.61(1H，d，J=2.5 Hz，H-7)，12.1(1H，s，1-OH)，12.03(1H，s，8-OH)，12.03(1H，s，8-OH)，10.04 (1H，s，6-OH)，2.42(3H，s，3-CH3);13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ：161.4(s，C-1)，124.1(d，C-2)，148.2(s，C-3)，120.4(d，C-4)，108.7(d，C-5)，165.5(s，C-6)，107.9(d，C-7)，164.4(s，C-8)，189.7(s，C-9)，181.4(s，C-10)，132.8(s，C-4a)，108.7(s，C-8a)，113.4(s，C-9a)，135.1(s，C-10a)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報道一致，故化合物5為大黃素(emodin)。

1 Delectis Florae Reipularis Sinicae Agendae Academiae(中國植物志編委).Flora Reipublicae Popularis Sinicae(中國植物志).Tomus 43.Beijing：Science Press，1997.

2 Wu ZY(吳征鎰)，Zhou TY(周太炎)，Xiao PG(肖培根).XinHua Herbal Scheme(新華本草綱要).Shanghai：Science Technology Press，1988.75.

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10 Feng WS(馮衛(wèi)生)，Wang YZ(王彥志)，Zheng XK(鄭曉珂).Structure elucidation of chemical constituents from Chinese medicine(中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)解析).Beijing：Science Press，2007.148/528.

Chemical Constituents of Picrasma quassioides(D.Don)Benn.

ZHU Chen-chen，DENG Gui-hua，LIN Chao-zhan*
College of Chinese Traditional Medicine，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhong Jianfeng Union Research Lab for Natural Products，Guangzhou 510006，China

Five compounds were isolated and purified from the 95%ethanol extract of Picrasma quassioides(D.Don) Benn.by using column chromatography and recrystallization.On the basis of spectroscopic methods，their structures were identified as trifolirhizin(1)，maackiain(2)，3'，7-dihydroxy-4'-methoxyisoflavone(3)，umbelliferone(4)，and dmodin (5).All the Compounds are reported from the genus Picrasma for the first time.

Picrasma quassioides(D.Don)Benn.;chemical constituents

1001-6880(2012)04-0476-03

2010-10-15 接受日期：2011-02-25

廣東省科學(xué)技術(shù)廳國際合作項目—基于澳大利亞TGA標(biāo)準(zhǔn)的南藥質(zhì)量評價體系示范研究(2008A050200005)

*通訊作者 Tel：86-20-39358047;E-mail：linchaozhan@sina.com

R284.1;Q946.91

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