臧忠良，覃仁安，王德勤，李楚源，趙專友

(1廣州白云山和記黃埔中藥有限公司，廣州510515; 2天津藥物研究院新藥評價中心)

高脂血癥及血液高凝狀態(tài)是心血管疾病的危險因素，所致心血管疾病的病死率占全世界死亡病因的50%以上，而且隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)不合理，高脂肪、高熱量飲食的過多攝入，其發(fā)病率逐年增加。既往實驗和臨床研究證實:腦心清片能減輕前腦缺血再灌流引起的大鼠腦海馬CAI區(qū)神經(jīng)細(xì)胞損傷，提高其活錐體細(xì)胞密度，改善缺血損傷動物整體狀況，對大鼠急性前腦缺血再灌注損傷有保護(hù)作用［1，2］。為進(jìn)一步探索腦心清片對心腦血管血液的影響，2010年5月～2011年3月，本文采用實驗動物模型評價腦心清片對麻醉開胸犬血流動力學(xué)的影響，以期為臨床運用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 受試藥:腦心清片，廣州白云山和記黃埔中藥有限公司提供，批號A9A001。為棕褐色顆粒，每克顆粒含0.125 g干膏，相當(dāng)于生藥31.25 g。臨用時以 0.5%的羧甲基纖維素鈉(CMC)配制成不同濃度的藥液供動物灌胃給藥用。復(fù)方丹參滴丸(CSDP):天津天士力藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號20080607，每丸重27 mg。臨用時將滴丸研碎，按動物體質(zhì)量稱取藥物，以0.5%CMC-Na配制成21 mg/mL的藥液供犬十二指腸給藥。

1.2 動物 成年Beagle犬:安徽省阜陽市維光實驗動物中心提供，許可證號SCXK(皖)06-001號，飼養(yǎng)在由中央空調(diào)系統(tǒng)調(diào)控的2.5 m×1.5 m的單間飼養(yǎng)室內(nèi)，室溫(26±2)℃，觀察2周以上備用。

1.3 儀器 RM-6300型八導(dǎo)生理記錄儀，日本光電公司產(chǎn)品。MFV-3200型電磁血液流量計，日本光電公司產(chǎn)品。SC-5型人工電動呼吸機(jī)，上海醫(yī)療器械股份有限公司產(chǎn)品。

1.4 實驗方法 成年健康Beagle犬，體質(zhì)量8～11 (9.4±0.9)kg，雌雄兼用。靜脈注射3%戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉。氣管插管接SC-5型電動呼吸機(jī)行人工正壓呼吸。左側(cè)第Ⅳ肋間開胸，暴露心臟，分離主動脈根部，卡上直徑12或14 mm(FC-120/ 140T)的血液流量計探頭，經(jīng)MFV-3200型電磁血液流量計測定主動脈血流量，以此代表心輸出量(CO);分離冠狀動脈左旋支，卡上直徑2或2.5 mm (FC-020/025T)的血液流量計探頭，經(jīng)MFV-3200型電磁血液流量計測定冠狀動脈血流量;心尖部插入充滿肝素生理鹽水的聚乙烯導(dǎo)管至左心室，經(jīng)TP-400T型壓力換能器接AP-641G血壓放大器測量左室內(nèi)壓(LVSP);分離股動脈，插入充滿肝素生理鹽水的聚乙烯導(dǎo)管至腹主動脈，經(jīng)TP-400T型壓力換能器接AP-641G血壓放大器測定收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP);四肢皮下插入針狀電極，經(jīng)AC-601G心電放大器測量標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖。另行股靜脈插管，靜脈輸注0.9%NaCl;剖腹，十二指腸插管，供給藥用。上述模擬信號同步輸入RM-6300型八導(dǎo)生理記錄儀，經(jīng)MP-100系統(tǒng)采集、轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號存儲于電腦中，以AcqKnowledge v.3.5.7軟件測量左室舒張末期壓(EDP)和LVSP最大上升和下降速率(±LVdp/dtmax)，并對全部數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。

手術(shù)完畢待各項指標(biāo)穩(wěn)定后記錄藥前值，然后十二指腸給藥。實驗分6組，每組6只犬。假手術(shù)組和模型對照組十二指腸給予0.5%CMC-Na;受試藥A、B、C組分別十二指腸給予腦心清，劑量分別為2、4、8 g(生藥)/kg，按體表面積計算，分別相當(dāng)于臨床用量的0.49、0.98、1.96倍，陽性對照組灌胃給予CSDP，劑量為21 mg/kg，相當(dāng)于臨床用量的0.98倍，給藥體積為1 mL/kg。記錄給藥后15、30、45、60、90、120 min上述諸項指標(biāo)。實驗結(jié)束后放血處死動物，剪下心臟并稱重，以1/3心臟重量作為左旋支引流區(qū)，計算每百克心肌的血流量(CF)，并按公式計算冠脈阻力(CR)、心臟指數(shù)(CI)、左室做功(LVW)、總外周阻力(TPR)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，實驗數(shù)據(jù)計量資料以±s表示，用t檢驗比較給藥組與對照組均數(shù)差異的顯著性;計數(shù)資料行χ2檢驗，以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對血壓、心率的影響 見表1。

表1 十二指腸給予腦心清片對麻醉開胸犬血壓、心率的影響(mmHg，±s，n=6)

表1 十二指腸給予腦心清片對麻醉開胸犬血壓、心率的影響(mmHg，±s，n=6)

組別 給藥前給藥后15 min 30 min 45 min 60 min 90 min 120 min模型對照組SAP 74±17 75±17 74±16 76±17 79±20 75±17 79±20 DAP 40±8 39±8 39±7 40±8 41±8 39±8 40±10 MAP 51±11 51±11 50±10 52±11 53±13 51±11 53±14 HR(次/min) 130±20 130±19 130±20 131±20 133±20 128±16 128±16受試藥A組SAP 87±17 83±17 86±18 86±20 86±17 87±15 85±15 DAP 52±11 48±8 50±9 50±10 49±9 50±8 48±8 MAP 65±13 62±12 64±13 65±14 63±12 64±11 62±11 HR(次/min) 152±30 152±30 150±29 152±29 151±31 150±30 151±32受試藥B組SAP 77±13 78±13 77±14 75±13 77±14 78±13 77±13 DAP 47±12 47±9 46±11 45±10 45±12 46±11 46±11 MAP 59±13 60±11 59±13 57±13 58±13 59±12 59±12 HR(次/min) 157±21 157±23 152±23 153±23 152±25 151±27 148±22受試藥C組SAP 72±3 74±4 71±4 71±5 73±4 72±5 73±5

續(xù)表

2.2 對左心室功能的影響 見表2。

表2 十二指腸給予腦心清片對麻醉開胸犬左心室功能的影響(±s，n=6)

表2 十二指腸給予腦心清片對麻醉開胸犬左心室功能的影響(±s，n=6)

注:與同組給藥前比較，*P＜0.05

組別 給藥前給藥后15 min 30 min 45 min 60 min 90 min 120 min模型對照組LVSP(mmHg) 95±14 96±15 97±15 96±11 99±16 93±16 99±15 EDP(mmHg) 1.6±3.4 1.7±3.6 2.2±3.3 2.2±3.4 2.7±3.6* 2.2±4.6 2.1±3.9 LVW(kg·m/min) 0.71±0.29 0.69±0.26 0.69±0.27 0.73±0.26 0.78±0.32 0.75±0.37 0.79±0.38 +LVdp/dt(mmHg/s) 1 739±195 1 766±229 1 763±240 1 797±315 1 840±408 1 693±178 1 792±257－LVdp/dt(mmHg/s) －806±204 －824±202 －822±221 －860±200 －860±294 －841±354 －874±297受試藥A組LVSP(mmHg) 111±16 106±18 108±22 110±21 107±18 110±13 109±14 EDP(mmHg) 2.5±3.5 1.7±3.6 2.3±3.2 1.6±3.9 2.0±2.8 2.3±3.5 2.4±3.3 LVW(kg·m/min) 0.99±0.31 0.96±0.36 0.95±0.36 0.98±0.35 0.93±0.35 0.98±0.34 0.95±0.39 +LVdp/dt(mmHg/s) 2 031±426 1 920±374 1 921±428 1 944±454 1 902±400 1 949±435 1 894±424－LVdp/dt(mmHg/s) －1 219±275 －1 127±149 －1 108±180 －1 113±200 －1 118±232 －1 153±238 －1 141±260受試藥B組LVSP(mmHg) 104±22 102±24 100±23 100±22 100±24 103±24 100±22* EDP(mmHg) 2.0±2.0 1.1±2.0 1.4±2.4 1.5±2.0 1.0±1.5 0.7±2.9 0.9±2.9 LVW(kg·m/min) 0.96±0.35 0.97±0.33 0.92±0.36 0.94±0.37 0.95±0.39 0.97±0.39 0.97±0.38 +LVdp/dt(mmHg/s) 2 098±525 2 046±522 1 942±497 2 047±561 1 969±466 2 030±482 1 949±461－LVdp/dt(mmHg/s) －1 192±186 －1 252±179 －1 134±300 －1 192±243 －1 155±256 －1 177±163 －1 113±158受試藥C組LVSP(mmHg) 91±15 93±12 91±14 93±14 93±12 93±11 96±16 EDP(mmHg) 1.3±4.0 1.7±2.7 1.0±2.5 1.5±2.3 1.3±2.9 2.0±4.0 1.6±3.4 LVW(kg·m/min) 0.75±0.15 0.83±0.21 0.78±0.21 0.75±0.19 0.76±0.19 0.77±0.23 0.77±0.23 +LVdp/dt(mmHg/s) 1 578±159 1 621±213 1 565±177 1 587±206 1 599±228 1 587±237 1 581±216－LVdp/dt(mmHg/s) －967±78 －1 036±158 －1 002±138 －1 018±162 －1 008±210 －1 030±198 －1 049±180陽性對照組LVSP(mmHg) 98±12 95±11 99±13 94±13 94±15 96±10 99±14 EDP(mmHg) 0.0±3.6 1.0±3.4 0.3±3.2 0.5±2.0 0.7±3.4 －0.3±1.8 0.8±2.5 LVW(kg·m/min) 0.74±0.22 0.70±0.23 0.71±0.19 0.70±0.24 0.69±0.26 0.73±0.26 0.71±0.24 +LVdp/dt(mmHg/s) 2 088±330 1 986±230 2 070±359 1 988±316 1 947±301 2 012±300 1 964±374－LVdp/dt(mmHg/s) －1 040±349 －919±216 －991±313 －937±286 －890±208 －973±194 －976±214

2.3 對心臟泵血功能及TPR的影響 見表3。

表3 腦心清片對麻醉開胸犬心臟泵血功能及TPR的影響(±s，n=6)

表3 腦心清片對麻醉開胸犬心臟泵血功能及TPR的影響(±s，n=6)

組別 給藥前給藥后15 min 30 min 45 min 60 min 90 min 120 min模型對照組CO(L/min) 1.04±0.24 1.03±0.20 1.04±0.22 1.08±0.16 1.09±0.17 1.11±0.26 1.11±0.22 CI(L/min/m2) 2.16±0.47 2.14±0.41 2.15±0.41 2.25±0.29 2.26±0.27 2.29±0.46 2.30±0.39 TPR(dyn·s/cm5) 4 033±842 3 994±823 3 936±588 3 823±663 3 899±531 3 710±532 3 837±633受試藥A組CO(L/min) 1.14±0.17 1.15±0.20 1.11±0.21 1.14±0.19 1.11±0.25 1.14±0.21 1.13±0.27 CI(L/min/m2) 2.24±0.38 2.25±0.40 2.18±0.45 2.23±0.42 2.18±0.53 2.24±0.44 2.23±0.55 TPR(dyn·s/cm5) 4 594±933 4 332±549 4 746±1 263 4 601±997 4 658±1 121 4 561±784 4 498±833

續(xù)表

2.4 對CF及CR的影響 見表4。

表4 十二指腸給予腦心清片對麻醉開胸犬冠脈循環(huán)的影響(±s，n=6)

表4 十二指腸給予腦心清片對麻醉開胸犬冠脈循環(huán)的影響(±s，n=6)

注:與同組給藥前比較，*P＜0.05

組別 給藥前給藥后15 min 30 min 45 min 60 min 90 min 120 min模型對照組CF(mL/min/100 g) 42.6±13.1 43.9±14.3 42.9±14.1 47.2±17.1 45.8±13.1 44.7±13.2 42.9±13.7 CR(mmHg/mL/min/100 g) 1.30±0.42 1.25±0.42 1.29±0.47 1.22±0.47 1.23±0.34 1.22±0.41 1.33±0.43受試藥A組CF(mL/min/100 g) 46.6±12.6 48.4±13.6 46.0±11.3 46.2±12.7 43.7±11.7 46.5±10.9 44.2±11.8 CR(mmHg/mL/min/100 g) 1.42±0.15 1.33±0.29 1.41±0.12 1.42±0.15 1.47±0.18 1.40±0.12 1.46±0.26受試藥B組CF(mL/min/100 g) 50.4±15.1 50.7±15.8 49.0±15.7 50.0±16.5 49.3±18.9 49.9±16.7 48.4±15.5 CR(mmHg/mL/min/100 g) 1.23±0.33 1.24±0.32 1.27±0.36 1.23±0.38 1.30±0.51 1.29±0.47 1.33±0.48受試藥C組CF(mL/min/100 g) 38.4±4.7 37.2±5.5 37.9±5.5 38.5±8.8 39.1±10.1 37.9±9.3 37.0±6.4 CR(mmHg/mL/min/100 g) 1.46±0.22 1.52±0.32 1.41±0.20 1.44±0.35 1.45±0.37 1.50±0.41 1.49±0.25陽性對照組CF(mL/min/100 g) 52.1±14.6 53.8±12.8 55.1±16.9 52.1±9.9 50.2±12.4 53.4±7.8 50.4±11.8 CR(mmHg/mL/min/100 g) 1.15±0.30 1.02±0.22* 1.03±0.26 1.05±0.22 1.11±0.27 1.07±0.32 1.15±0.37

3 討論

腦心清片主含黃酮和酚酸類活性成分，如槲皮素、異槲皮甙、山萘酚等。這類成分有抗氧化、清除自由基、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞損傷、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡等作用，可以從抗缺氧缺血、抗氧化應(yīng)激和抗興奮性毒性、上調(diào)抗氧化基因bcl-2表達(dá)、改善神經(jīng)細(xì)胞氧化還原狀態(tài)、激活L型鈣通道和抑制淋巴細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞的黏附等方面來發(fā)揮其抗腦缺血損傷和神經(jīng)保護(hù)作用［2～5］。本文進(jìn)一步探討腦心清片對心肌缺血血流動力學(xué)的影響。

心肌缺血缺氧狀態(tài)主要是由于冠狀動脈供血不足或心肌耗氧量增加而引起，臨床缺血性心臟病發(fā)作時，常是上述兩種原因綜合作用的結(jié)果。因此增加冠脈血流量或降低心肌耗氧量均能改善心肌缺血缺氧狀態(tài)。心肌缺血往往伴隨心臟血流動力學(xué)改變，大部分治療缺血性心臟病的有效藥物均可通過明顯改善血流動力學(xué)而發(fā)揮作用。本實驗觀察腦心清片對正常麻醉開胸犬血流動力學(xué)及心肌耗氧量等作用的結(jié)果表明:與對照組相比，十二指腸給予較低濃度腦心清對麻醉開胸犬血流動力學(xué)各項指標(biāo):CR、TPR、CI等參數(shù)無明顯影響，而給予較高濃度(8 g生藥/kg)腦心清片有降低系統(tǒng)血壓的趨勢，并降低TPR。說明腦心清能明顯改善心肌缺血后心臟血液流變學(xué)，其抗心肌缺血作用可能主要與其降低TPR等有關(guān)。

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［2］Bei W，Peng W，Ma Y，et al.Flavonoids from the leaves of Diospyros kaki reduce hydrogen peroxide-induced injury of NG108-15 cells［J］.Life Sci，2005，76(17):1975-1988.

［3］貝偉劍，羅杰，吳愛鑾，等.HPLC法測定柿葉浸膏中槲皮素和山柰酚［J］.中草藥，2005，36(7):21-24.

［4］覃仁安，臧忠良，趙專友，等.腦心清對實驗性腦缺血的保護(hù)作用［J］.中藥藥理與臨床，2011，27(3):105-108.

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