秦文艷， 李春偉， 董 波， 陳 賀， 孟 莉， 趙金明*

(1.遼寧省中醫(yī)藥研究院，遼寧沈陽110031;2.遼寧電力中心醫(yī)院，遼寧沈陽110015)

慢性心力衰竭 (chronic heart failure，CHF)，簡稱心衰，是指各種心臟病及其他臟器疾病發(fā)展到嚴(yán)重階段所致心功能不全的一種綜合征，病機(jī)為各種原因?qū)е滦募∈湛s力下降使心排血量不能滿足機(jī)體代謝的需要，器官組織灌注不足，臨床表現(xiàn)為肺循環(huán)和 (或)體循環(huán)瘀血癥狀，如呼吸困難、水腫等。心力衰竭時(shí)通常伴有肺循環(huán)和 (或)體循環(huán)的被動(dòng)性充血故又稱之為充血性心力衰竭［1］。強(qiáng)心顆粒由紅參，制附子，黃芪，葶藶子等中藥組成，具有益氣溫陽、強(qiáng)心、活血利水的功效，本實(shí)驗(yàn)主要考察了強(qiáng)心顆粒改善心肌供氧、利尿及抗氧化作用。

1 材料

1.1 試驗(yàn)藥物 強(qiáng)心顆粒由遼寧省中醫(yī)藥研究院藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供，棕褐色顆粒，1 g顆粒含3.67 g生藥，批號:20081015;心寶丸，廣東省藥物研究所制藥廠，批號:20080922;注射用鹽酸多柔比星 (阿霉素)，山西普德藥業(yè)有限公司，批號:20080103;鹽酸普萘洛爾片，東北制藥總廠，批號:20080103;氫氯噻嗪片，天津力生制藥股份有限公司，批號:0806010;馬來酸依那普利片，揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)，批號:08100902;SOD酶聯(lián)免疫試劑盒，美國ADL公司，批號:SM200908;MDA酶聯(lián)免疫試劑盒，美國ADL公司，批號:SM200908。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ICR小鼠及Wistar大鼠由中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號:SCXK(遼)2007-0009。

1.3 儀器 LD5—2A離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。

2 方法和結(jié)果

2.1 強(qiáng)心顆粒對小鼠常壓耐缺氧的影響［2］體質(zhì)量18～22 g健康ICR小鼠60只，雌雄各半，按性別體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，每組10只。分別為空白對照組，強(qiáng)心顆粒低劑量組21.5 g/kg、中劑量組43 g/kg、高劑量組86 g/kg，中藥陽性對照藥心寶丸組0.28 g/kg和西藥陽性對照藥鹽酸普萘洛爾片組0.052 g/kg。每天灌胃 (ig)給藥1次，連續(xù)7 d，空白對照組給予同體積蒸餾水。試驗(yàn)前各組小鼠禁食16 h，末次給藥后45 min，將小鼠放入裝有15 g鈉石灰的250 mL廣口磨口瓶中，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣，立即計(jì)時(shí)。以小鼠呼吸停止時(shí)間為指標(biāo)，記錄小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間 (存活時(shí)間)，t檢驗(yàn)比較各給藥組與空白對照組之間差異顯著性，結(jié)果見表1。

表1 強(qiáng)心顆粒對小鼠常壓耐缺氧的影響 (±s)

表1 強(qiáng)心顆粒對小鼠常壓耐缺氧的影響 (±s)

注:與空白對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0.001。

/min空白對照組 —組別 劑量/(g·kg-1)動(dòng)物數(shù)/只 存活時(shí)間10 29.4±2.0強(qiáng)心顆粒低劑量組 21.5 10 30.1±5.5強(qiáng)心顆粒中劑量組 43 10 32.3±3.6*強(qiáng)心顆粒高劑量組 86 10 35.1±4.4＊＊心寶丸組 0.28 10 36.4 ±6.3＊＊鹽酸普萘洛爾組 0.052 10 39.3±4.4＊＊＊

結(jié)果表明，強(qiáng)心顆粒中、高劑量組，中藥對照藥心寶丸組和西藥對照藥鹽酸普萘洛爾組均顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時(shí)間，與空白對照組比較差異顯著 (P＜0.05，P＜0.01和P＜0.001)。提示強(qiáng)心顆粒具有增強(qiáng)小鼠耐常壓缺氧能力的功效。

2.2 強(qiáng)心顆粒對代謝籠法小鼠利尿作用的影響［3］體質(zhì)量18～22 g健康ICR小鼠60只，雌雄各半，按性別體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，每組10只。分別為空白對照組，強(qiáng)心顆粒低劑量組21.5 g/kg、中劑量組43 g/kg、高劑量組86 g/kg，中藥陽性對照藥心寶丸組0.28 g/kg和西藥陽性對照藥氫氯噻嗪片組0.026 g/kg。每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7 d，空白對照組給予同體積的蒸餾水。試驗(yàn)前將各小鼠放入代謝籠中適應(yīng)兩天，試驗(yàn)前小鼠禁食16 h，末次給藥后各小鼠同時(shí)灌胃給予蒸餾水1 mL/只進(jìn)行水負(fù)荷，然后觀察并記錄水負(fù)荷后1 h、2 h、3 h、4 h、5 h時(shí)各小鼠的尿量，t檢驗(yàn)比較各給藥組與空白對照組之間各時(shí)間點(diǎn)尿量差異顯著性，結(jié)果見表2。

表2 強(qiáng)心顆粒對小鼠利尿作用的影響 (±s)

表2 強(qiáng)心顆粒對小鼠利尿作用的影響 (±s)

注:與空白對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0.001。

組別 劑量/(g·kg-1) 動(dòng)物數(shù)/只 尿量/mL 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h空白對照組 — 10 0.15±0.14 0.19±0.13 0.16±0.11 0.08±0.06 0.18±0.16強(qiáng)心顆粒低劑量組 21.5 10 0.18±0.10 0.34±0.30 0.46±0.48 0.83±0.68＊＊ 0.46±0.50強(qiáng)心顆粒中劑量組 43 10 0.16±0.08 0.23±0.16 0.21±0.13 0.35±0.18＊＊ 0.23±0.17強(qiáng)心顆粒高劑量組 86 10 0.09±0.02 0.27±0.18 0.22±0.15 0.22±0.12＊＊ 0.22±0.14心寶丸組 0.28 10 0.14±0.08 0.15±0.11 0.20±0.08 0.08±0.04 0.09±0.06氫氯噻嗪組 0.026 10 0.28±0.17 0.43±0.12＊＊＊ 0.34±0.17* 0.29±0.24*0.27±0.29

結(jié)果表明，強(qiáng)心顆粒低、中、高劑量組，氫氯噻嗪片組給藥后均能增加小鼠水負(fù)荷后4 h的尿量，與空白對照組比較，有顯著性差異 (P＜0.01)。提示強(qiáng)心顆粒給藥后4 h具有利尿作用。

2.3 強(qiáng)心顆粒對心衰大鼠血清SOD和MDA的影響［4-5］體質(zhì)量200～250 g健康Wistar大鼠120只，雌雄各半。飼養(yǎng)1周后，除10只大鼠作為空白對照組外，其它大鼠腹腔注射3 mg/kg注射用鹽酸多柔比星，每周1次，連續(xù)腹腔注射4周，空白組腹腔注射同體積生理鹽水。末次注射1周后，造模大鼠較空白組大鼠進(jìn)食量減少，毛色欠華，體質(zhì)量減輕，活動(dòng)量減少，注射時(shí)掙扎力明顯減弱。心臟彩超顯示，左室射血分?jǐn)?shù) (LVEF＜50%)則心衰造模成功。挑選造模成功的大鼠60只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，即模型組，強(qiáng)心顆粒低劑量組15 g/kg、中劑量組30 g/kg、高劑量組60 g/kg，中藥陽性對照藥心寶丸組0.2 g/kg和西藥陽性對照藥馬來酸依那普利片組0.001 8 g/kg。每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥30 d，空白對照組和模型組給予同體積的蒸餾水。末次給藥后，10%水合氯醛 (3.5 mL/kg)腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血5 mL，分離血清 (3 000 r/min，離心15 min)，酶聯(lián)免疫試劑盒測定血清中SOD活性和MDA水平。t檢驗(yàn)比較各給藥組與模型組之間差異顯著性，結(jié)果見表3。

表3 強(qiáng)心顆粒對心衰大鼠SOD和MDA的影響(±s)

表3 強(qiáng)心顆粒對心衰大鼠SOD和MDA的影響(±s)

注:與模型組比較，*P＜0.05;與空白對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別 劑量/(g·kg-1) 動(dòng)物數(shù)/只 SOD/(U·L-1) MDA/(mmol·L-1)空白對照組-10 19.87±8.18 0.78±0.10模型組 - 10 12.26±6.50# 1.12±0.27##強(qiáng)心顆粒低劑量組 15 10 19.00±8.34 0.89±0.20*強(qiáng)心顆粒中劑量組 30 10 20.36±8.96* 0.88±0.13*強(qiáng)心顆粒高劑量組 60 10 23.07±11.02* 0.85±0.16*心寶丸組 0.20 10 20.14±7.92* 0.86±0.20*馬來酸依那普利片組 0.018 10 19.40±6.77* 0.86±0.14*

結(jié)果表明，模型組SOD和MDA與空白對照組比較差異顯著 (P＜0.05，P＜0.01)。強(qiáng)心顆粒低、中、高劑量組、心寶丸組和馬來酸依那普利片組均能提高心衰大鼠血清中SOD活力，并降低MDA水平，與模型組比較差異顯著 (P＜0.05)。表明強(qiáng)心顆?？赏ㄟ^抗氧化作用發(fā)揮其改善心功能的作用。

3 討論

心肌缺血缺氧會引起心肌細(xì)胞代謝過程紊亂，尤其是能量物質(zhì)的生成銳減，正常心功能難以維持，進(jìn)而發(fā)生心衰。又因血流中斷，有害的產(chǎn)物難以清除。因此，可以通過改善血供，降低氧耗，清除或?qū)褂泻ξ镔|(zhì)對心肌的不良影響以保護(hù)心?。?］。近年來發(fā)現(xiàn)氧自由基 (oxygen free radicals，OFR)及其脂質(zhì)過氧化物 (Lipidperoxide，LPO)可能參與了心衰形成、發(fā)展的病理過程。生理情況下，體內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生和清除保持動(dòng)態(tài)平衡，心衰時(shí)由于心肌缺血缺氧，使氧自由基產(chǎn)生增加，同時(shí)清除氧自由基的防御系統(tǒng)活性下降，從而使氧自由基進(jìn)一步增多，而氧自由基的增多又可損害心肌導(dǎo)致或加重心衰。膜的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)是氧自由基損傷的主要途徑，MDA是脂質(zhì)過氧化損傷的主要代謝終產(chǎn)物，而SOD則是機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)中的重要金屬酶，是體內(nèi)唯一直接淬滅自由基的酶，其活性直接影響體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的平衡。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，強(qiáng)心顆粒中、高劑量組均顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時(shí)間;提高心衰大鼠血清中SOD活性，并降低MDA水平。提示強(qiáng)心顆粒具有增強(qiáng)小鼠耐常壓缺氧能力的功效，同時(shí)可通過清除氧自由基和脂質(zhì)過氧化物發(fā)揮其改善心功能的作用。利尿劑是治療心力衰竭的關(guān)鍵藥物之一，它能較快的緩解心力衰竭的癥狀，比其他藥物作用迅速;也是唯一可以適當(dāng)控制心力衰竭患者體內(nèi)水鈉潴留的藥物。強(qiáng)心顆粒低、中、高劑量組均能增加小鼠水負(fù)荷后4 h的尿量，提示其可能通過利尿作用減輕心衰患者的水鈉潴留，降低前負(fù)荷，從而改善心衰。綜上可見，強(qiáng)心顆?？赡芡ㄟ^增加心肌供氧，抗氧化作用及利尿作用而發(fā)揮其抗心力衰竭的作用。

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