張大為，趙明明，宋超，張崗，郭順星

HIV-1 整合酶是病毒復(fù)制所必需的酶[1]。在臨床上，使用 HIV-1 整合酶（integrase，IN）抑制劑來治療 HIV 感染被證明是非常有益的。目前，F(xiàn)DA 批準(zhǔn)上市的第一個(gè) HIV-1整合酶抑制劑 raltegravir 已作為一線藥物用于臨床[2-3]。與raltegravir 作用機(jī)制相同的另外一個(gè)藥物 elvitegravir 目前正處于 III 期臨床試驗(yàn)階段[4]。Raltegravir 和 elvitegravir作為第一代整合酶抑制劑，其作用機(jī)制是抑制 HIV-1 整合酶鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)[5-6]，因此，它們被稱為鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)抑制劑（strand transfer inhibitors，STIs）。隨著 raltegravir 的廣泛使用，病毒耐藥也隨之出現(xiàn)[7]。為了規(guī)避病毒耐藥和開發(fā)出能與 STIs 協(xié)同作用的整合酶抑制劑，我們需要篩選出靶向整合過程中的不同步驟或不同位點(diǎn)的化合物。這類化合物的作用機(jī)制與 STIs 不同，所以稱作第二代整合酶抑制劑。通過查閱文獻(xiàn)，本文綜述了第二代整合酶抑制劑的篩選靶點(diǎn)，主要包括 IN 的酶催化功能和非酶催化功能。

1 整合酶的結(jié)構(gòu)與功能

1.1 整合酶的結(jié)構(gòu)

整合酶由 HIV-1 pol 基因 3' 末端編碼，具有 288 個(gè)氨基酸殘基（32 kD），有 3 個(gè)結(jié)構(gòu)域，即一個(gè) N 端結(jié)構(gòu)域（NTD），一個(gè)催化核心區(qū)（CCD）和一個(gè) C 端結(jié)構(gòu)域（CTD）[8]。NTD 由 1 ～ 51 位氨基酸構(gòu)成，包含一個(gè)高度保守的 HHCC（His-His-Cys-Cys）模序，可與 Zn2+形成HTH（helix-turn-helix）結(jié)構(gòu)，體外實(shí)驗(yàn)表明 Zn2+對于整合酶的正確折疊、多聚化以及催化功能的行使具有關(guān)鍵作用；CCD 由 212 ～ 288 位氨基酸組成，包含一個(gè)保守且直接參與催化的 DDE（D64、D116、和 E152）模序；CTD 由212 ～ 288 位氨基酸殘基組成，該結(jié)構(gòu)域具有非特異性結(jié)合DNA 的能力[9]。由于 IN 可溶性差，科學(xué)家們至今尚未得到 HIV 整合酶完整的三維結(jié)構(gòu)。2010 年，Hare 等[10]的一項(xiàng)研究得到了原型泡沫病毒（prototype foamy virus，PFV）的整合酶三維結(jié)構(gòu)。作為逆轉(zhuǎn)錄病的 PFV，其整合酶與HIV 病毒整合酶結(jié)構(gòu)十分類似，因此 PFV 整合酶與 DNA以及抑制劑的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)的獲得為 HIV-1 整合酶三維結(jié)構(gòu)的獲得和 HIV-1 整合酶抑制劑的研究帶來了可靠的參照。

1.2 整合酶的功能

整合酶的功能包含兩個(gè)方面（圖 1），即學(xué)界廣泛接受的催化功能和正在不斷被闡明的非催化功能。

圖 1 HIV-1 IN 的催化功能和非催化功能[8]

1.2.1 整合酶催化功能[11]整合酶催化的反應(yīng)為整合反應(yīng)。在整合過程中，整合酶完成兩個(gè)相關(guān)且依次發(fā)生的酶促反應(yīng)。首先是 3' 加工，整合酶與胞質(zhì)中的病毒雙鏈 DNA結(jié)合后，切除其 3' 末端的兩個(gè)堿基，露出高度保守的 CA末端，用于結(jié)合細(xì)胞 DNA；第二步為鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)，3' 加工形成的核酸蛋白復(fù)合物入核，隨后整合酶在宿主 DNA 上切出間隔 5 個(gè)堿基的交錯(cuò)切口，接著病毒 DNA 的 3' 端與宿主 DNA 的 5' 端共價(jià)連接起來。整合過程隨著宿主細(xì)胞蛋白將整合過程中產(chǎn)生的缺口修復(fù)而結(jié)束。

1.2.2 整合酶非催化功能 遺傳學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，整合酶除參與整合外，還可能參與到 HIV-1 生活周期中的其他非酶促過程，包括病毒脫殼[12]、逆轉(zhuǎn)錄[13]、病毒 DNA 的核進(jìn)入[14]以及病毒粒子裝配和成熟過程中蛋白質(zhì)的加工[15]。不難發(fā)現(xiàn)，整合酶的非催化功能是通過與宿主蛋白或者病毒蛋白的相互作用而實(shí)現(xiàn)的。

2 第二代整合酶抑制劑篩選靶點(diǎn)

整合酶抑制劑靶點(diǎn)的選擇是基于整合酶的功能。目前，第一代整合酶抑制劑 STIs 是以整合酶催化功能第二步鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)為靶點(diǎn)的鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)抑制劑，第二代整合酶抑制劑篩選的靶點(diǎn)主要有整合酶 3' 加工和整合酶非催化功能，現(xiàn)將其綜述如下。

2.1 整合酶 3' 加工反應(yīng)

在病毒 RNA 完成逆轉(zhuǎn)錄后，整合酶二聚體分別與產(chǎn)物DNA 的兩個(gè)末端結(jié)合，完成整合過程的第一步—— 3' 加工。3' 加工會(huì)觸發(fā)整合酶與 DNA 作用形式的重構(gòu)：整合酶四聚體與 3' 加工后的 DNA 結(jié)合形成整合體（intasome），接著該整合體復(fù)合物進(jìn)入宿主胞核催化鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)[10,16-17]。研究發(fā)現(xiàn)，整合酶鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)抑制劑 raltegravir 和 elvitegravir特異性作用于鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)而不作用于 3' 加工反應(yīng)[18]。最近，Hare 等[10]研究發(fā)現(xiàn)，raltegravir 或 elvitegravir 會(huì)與整合體中的 DNA 和 Mg2+形成復(fù)合體，抑制劑選擇性結(jié)合整合體中的 DNA 會(huì)導(dǎo)致整合體下一步催化活性的喪失。因此，3' 加工的抑制劑作為一類新的整合酶抑制劑，能夠與現(xiàn)有的鏈轉(zhuǎn)移抑制協(xié)同作用，用于 HIV-1 的治療。

迄今為止，盡管已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了能夠抑制 3' 加工過程的抑制劑，但是尚未找到能夠特異性抑制該過程的抑制劑。苯乙烯基喹啉類化合物（styrylquinoline，SQLs）在體外能夠競爭性抑制病毒 DNA 同 IN 的結(jié)合，從而抑制 3' 加工過程。同時(shí) SQLs 對鏈轉(zhuǎn)移過程也有一定程度的抑制活性[19]。1-(5-氯吲哚-3-基)-3-羥基-3-(2-氫四唑-5-基)丙烯酮（5ClTEP）類衍生物能夠同時(shí)抑制整合酶的 3' 加工和鏈轉(zhuǎn)移活性，這類二酮酸抑制劑通過結(jié)合病毒 DNA 而抑制整合酶的 3' 加工活性[20]。

2.2 整合酶多聚化

在體內(nèi)，蛋白質(zhì)往往與一些能夠改變其構(gòu)象和功能的平衡相關(guān)，能夠改變這種平衡的分子具有開發(fā)成為藥物的潛力。整合酶單體、二聚體和四聚體之間存在一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡[21-23]。在胞漿中催化 3' 加工反應(yīng)時(shí)，整合酶二聚體分別與病毒 DNA 的兩端結(jié)合[24]，此后結(jié)合有病毒 LTR-DNA的整合酶二聚體相互靠近形成四聚體，行使鏈轉(zhuǎn)移功能[25]。Hayouka 等[26]發(fā)現(xiàn)，他們設(shè)計(jì)的一個(gè) LEDGF 衍生肽能夠通過阻斷 IN 而抑制 HIV-1 的復(fù)制。該肽通過調(diào)節(jié)整合酶多聚化的平衡過程，使得整合酶二聚體轉(zhuǎn)變?yōu)樗木垠w，而整合酶四聚體不能行使 3' 加工功能，導(dǎo)致鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)沒有底物，最終整合酶因?yàn)?3' 加工的功能受到抑制而無法完成其功能（圖 2）。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，整合酶四聚體也不能直接與完成 3' 加工的 DNA 結(jié)合[21]，這樣的話，即使存在 3'加工產(chǎn)物，整合酶四聚體也不行使鏈轉(zhuǎn)移功能。因此，Hayouka 等認(rèn)為這樣的抑制劑具有目前臨床使用的整合酶抑制劑所沒有的優(yōu)點(diǎn)，即能夠同時(shí)抑制整合酶的兩步催化反應(yīng)。

迄今為止，人們只發(fā)現(xiàn)了一個(gè)能夠抑制整合酶多聚化的小分子 chiba-3003[27]，其他已知具有該活性的抑制劑都是源于 IN 自身的衍生肽或者是源于 LEDGF 的衍生肽[26,28-29]，而肽類藥物與小分子藥物相比，其吸收性較差，因此，開發(fā)整合酶多聚化小分子抑制劑勢在必行。值得注意的是，雖然前期工作已取得了進(jìn)展[30-32]，但蛋白質(zhì)相互作用小分子抑制劑的尋找依然充滿挑戰(zhàn)，因此我們的路還很長。

圖 2 整合酶多聚化抑制劑作用模型[26]

2.3 整合酶與宿主輔因子相互作用

研究發(fā)現(xiàn)，整合酶和宿主輔因子的相互作用與 HIV-1復(fù)制的多個(gè)過程有關(guān)，比如逆轉(zhuǎn)錄、前整合復(fù)合體的形成、核定位、整合以及病毒裝配[33]。這些相互作用一旦被證明對 HIV 感染宿主是必需的，就能作為藥物開發(fā)的靶點(diǎn)。已報(bào)道的與 IN 具有蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interation，PPI）的宿主蛋白有：INI1[34]、Rad18[35-36]、LEDGF[37]、EED[38]、importin 7[39]、Gemin2[40]、UNG2[41-42]、N-recognins[43]、APOBEC3F/G[44]、von Hippel Lindau binding protein 1（VBP1）[45]、p300 Transportin[46]、SR2（TNPO3）[47-48]、SAP18-HDAC1[49]和 JNK/PIN1[50]。

目前，這些 PPI 中被研究的最為清楚的是 IN 與LEDGF/p75 之間的相互作用。LEDGF/p75對于 HIV-1 的整合和復(fù)制非常關(guān)鍵[51-55]，它將整合復(fù)合體錨定到宿主染色體上，引導(dǎo)整合體到整合反應(yīng)發(fā)生的位點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，特異性干擾 IN 與 LEDGF/p75 之間相互作用的分子 CX06387能夠抑制 HIV-1 在體外動(dòng)物水平的復(fù)制，該分子未表現(xiàn)出細(xì)胞毒性，也沒有和鏈轉(zhuǎn)移酶抑制劑產(chǎn)生交叉耐藥[56]。這表明尋找和設(shè)計(jì)針對整合酶與宿主輔因子相互作用的小分子抑制劑是可行的。但是，最近的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，那些 CCD結(jié)構(gòu)域發(fā)生突變而不能與 LEDGF/p75 結(jié)合的整合酶突變體，仍然可以和宿主染色體結(jié)合催化鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)，帶有上述整合酶突變體的病毒突變株仍然能夠維持一個(gè)低水平的復(fù)制狀態(tài)，表明 IN 還具有一個(gè)非 LEDGF/p75 依賴的染色體結(jié)合機(jī)制[57]，這限制了 IN 與 LEDGF/p75 之間相互作用抑制劑的有效性。

到目前為止，對于上述 PPI 的研究尚處初級(jí)階段。這些 PPI 對于病毒的復(fù)制是否必需，以及將執(zhí)行多種功能的細(xì)胞蛋白作為靶點(diǎn)是否會(huì)帶來細(xì)胞毒性，對這兩個(gè)問題的回答依然沒有定論，甚至許多研究結(jié)果是相反的。盡管如此，我們應(yīng)該注意到，將宿主蛋白作為抗病毒靶點(diǎn)，具有對耐藥病毒株相對不敏感的優(yōu)點(diǎn)，因此，整合酶與宿主輔因子之間相互作用的抑制劑具有誘人的應(yīng)用前景。

2.4 整合酶翻譯后修飾

整合酶的翻譯后修飾包括：泛素化、乙?；土姿峄?。這些修飾各自的作用是：調(diào)控 IN 胞內(nèi)穩(wěn)定[43,45,58]、整合效率[46,59-60]以及調(diào)節(jié)休眠 CD4 陽性 T 細(xì)胞對于病毒感染的敏感性[50]。例如，調(diào)節(jié)宿主染色體構(gòu)象的乙?；D(zhuǎn)移酶p300 和 GCN5 能夠乙?；?IN，進(jìn)而增加 IN 對于 DNA的親和力，提高 IN 鏈轉(zhuǎn)移活性[46]。遺憾的是參與 IN 翻譯后修飾的蛋白也參與宿主體內(nèi)諸如蛋白質(zhì)穩(wěn)定、染色質(zhì)重構(gòu)以及胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等主要通路，抑制這些蛋白的功能，對宿主細(xì)胞具有潛在的危害。因此，找到針對 IN 與 IN 翻譯后修飾蛋白相互作用的特異性抑制劑還是值得期待的。

3 結(jié)語

整合酶抑制劑的作用機(jī)制要么是阻斷其催化功能，要么是阻斷其非催化功能。以催化功能作為靶點(diǎn)的抑制劑特異性作用于病毒蛋白，不會(huì)影響宿主蛋白功能，因此具有很小的宿主細(xì)胞毒性，但是，該類抑制劑的缺點(diǎn)十分明顯：對于整合酶的突變非常敏感，易產(chǎn)生耐藥性，致使其應(yīng)用的有效性受到限制。而以非催化功能作為靶點(diǎn)的抑制劑阻斷的是 IN同宿主蛋白之間的 PPI。與前一類抑制劑相比，該類抑制劑對 IN 的突變不敏感，不容易產(chǎn)生耐藥性，但其缺點(diǎn)是因?yàn)闀?huì)影響到宿主蛋白的功能而具有宿主細(xì)胞毒性。相比較而言，以 IN 非催化功能作為抗病毒靶點(diǎn)的抑制劑在未來更具開發(fā)潛力。在未來，一定會(huì)有更多的靶向不同步驟或不同位點(diǎn)的新結(jié)構(gòu)整合酶抑制劑問世，通過協(xié)同作用增強(qiáng)活性、降低毒性、減緩病毒抗藥性的產(chǎn)生，從而達(dá)到更好地控制艾滋病的效果。

[1] Engelman A, Mizuuchi K, Craigie R. HIV-1 DNA integration:mechanism of viral DNA cleavage and DNA strand transfer. Cell,1991, 67(6):1211-1221.

[2] Zolopa AR. The evolution of HIV treatment guidelines: current state-of-the-art of ART. Antiviral Res, 2010, 85(1):241-244.

[3] Thompson MA, Aberg JA, Cahn P, et al. Antiretroviral treatment of adult HIV infection: 2010 recommendations of the International AIDS Society-USA panel. JAMA, 2010, 304(3):321-333.

[4] Shimura K, Kodama EN. Elvitegravir: a new HIV integrase inhibitor.Antivir Chem Chemother, 2009, 20(2):79-85.

[5] Summa V, Petrocchi A, Bonelli F, et al. Discovery of raltegravir, a potent, selective orally bioavailable HIV-integrase inhibitor for the treatment of HIV-AIDS infection. J Med Chem, 2008, 51(18):5843-5855.

[6] Sato M, Motomura T, Aramaki H, et al. Novel HIV-1 integrase inhibitors derived from quinolone antibiotics. J Med Chem, 2006,49(5):1506-1508.

[7] Métifiot M, Marchand C, Maddali K, et al. Resistance to integrase inhibitors. Viruses, 2010, 2(7):1347-1366.

[8] Masuda T. Non-enzymatic functions of retroviral integrase: the next target for novel anti-HIV drug development. Front Microbiol, 2011,2:210.

[9] Pommier Y, Johnson AA, Marchand C. Integrase inhibitors to treat HIV/AIDS. Nat Rev Drug Discov, 2005, 4(3):236-248.

[10] Hare S, Gupta SS, Valkov E, et al. Retroviral intasome assembly and inhibition of DNA strand transfer. Nature, 2010, 464(7286):232-236.

[11] Delelis O, Carayon K, Sa?b A, et al. Integrase and integration:biochemical activities of HIV-1 integrase. Retrovirology, 2008, 5:114.

[12] Briones MS, Dobard CW, Chow SA. Role of human immunodeficiency virus type 1 integrase in uncoating of the viral core. J Virol, 2010,84(10):5181-5190.

[13] Nishitsuji H, Hayashi T, Takahashi T, et al. Augmentation of reverse transcription by integrase through an interaction with host factor,SIP1/Gemin2 Is critical for HIV-1 infection. PLoS One, 2009, 4(11):e7825.

[14] Ikeda T, Nishitsuji H, Zhou X, et al. Evaluation of the functional involvement of human immunodeficiency virus type 1 integrase in nuclear import of viral cDNA during acute infection. J Virol, 2004,78(21):11563-11573.

[15] Mohammed KD, Topper MB, Muesing MA. Sequential deletion of the integrase (Gag-Pol) carboxyl terminus reveals distinct phenotypic classes of defective HIV-1. J Virol, 2011, 85(10):4654-4666.

[16] Craigie R. Structural biology: When four become one. Nature, 2010,464(7286):167-168.

[17] Cherepanov P. Integrase illuminated. EMBO Rep, 2010, 11(5):328.

[18] Espeseth AS, Felock P, Wolfe A, et al. HIV-1 integrase inhibitors that compete with the target DNA substrate define a unique strand transfer conformation for integrase. Proc Natl Acad Sci U S A 2000, 97(21):11244-11249.

[19] Deprez E, Barbe S, Kolaski M, et al. Mechanism of HIV-1 integrase inhibition by styrylquinoline derivatives in vitro. Mol Pharmacol,2004, 65(1):85-98.

[20] Marchand C, Zhang X, Pais GC, et al. Structural determinants for HIV-1 integrase inhibition by beta-diketo acids. J Biol Chem, 2002,277(15):12596-12603.

[21] Faure A, Calmels C, Desjobert C, et al. HIV-1 integrase crosslinked oligomers are active in vitro. Nucleic Acids Res, 2005, 33(3):977-986.

[22] Deprez E, Tauc P, Leh H, et al. DNA binding induces dissociation of the multimeric form of HIV-1 integrase: a time-resolved fluorescence anisotropy study. Proc Natl Acad Sci U S A, 2001, 98(18):10090-10095.

[23] Deprez E, Tauc P, Leh H, et al. Oligomeric states of the HIV-1 integrase as measured by time-resolved fluorescence anisotropy.Biochemistry, 2000, 39(31):9275-9284.

[24] Guiot E, Carayon K, Delelis O, et al. Relationship between the oligomeric status of HIV-1 integrase on DNA and enzymatic activity.J Biol Chem, 2006, 281(32):22707-22719.

[25] Chen A, Weber IT, Harrison RW, et al. Identification of amino acids in HIV-1 and avian sarcoma virus integrase subsites required for specific recognition of the long terminal repeat Ends. J Biol Chem, 2006,281(7):4173-4182.

[26] Hayouka Z, Rosenbluh J, Levin A, et al. Inhibiting HIV-1 integrase by shifting its oligomerization equilibrium. Proc Natl Acad Sci U S A,2007, 104(20):8316-8321.

[27] De Luca L, Barreca ML, Ferro S, et al. Pharmacophore-based discovery of small-molecule inhibitors of protein-protein interactions between HIV-1 integrase and cellular cofactor LEDGF/p75.ChemMedChem, 2009, 4(8):1311-1316.

[28] Hayouka Z, Levin A, Maes M, et al. Mechanism of action of the HIV-1 integrase inhibitory peptide LEDGF 361-370. Biochem Biophys Res Commun, 2010, 394(2):260-265.

[29] Maes M, Levin A, Hayouka Z, et al. Peptide inhibitors of HIV-1 integrase: from mechanistic studies to improved lead compounds.Bioorg Med Chem, 2009, 17(22):7635-7642.

[30] He MM, Smith AS, Oslob JD, et al. Small-molecule inhibition of TNF-alpha. Science, 2005, 310(5750):1022-1025.

[31] Zutshi R, Chmielewski J. Targeting the dimerization interface for irreversible inhibition of HIV-1 protease. Bioorg Med Chem Lett,2000, 10(17):1901-1903.

[32] McMillan K, Adler M, Auld DS, et al. Allosteric inhibitors of inducible nitric oxide synthase dimerization discovered via combinatorial chemistry. Proc Natl Acad Sci U S A, 2000, 97(4):1506-1511.

[33] Van Maele B, Busschots K, Vandekerckhove L, et al. Cellular co-factors of HIV-1 integration. Trends Biochem Sci, 2006, 31(2):98-105.

[34] Kalpana GV, Marmon S, Wang W, et al. Binding and stimulation of HIV-1 integrase by a human homolog of yeast transcription factor SNF5. Science, 1994, 266(5193):2002-2006.

[35] Mulder LC, Chakrabarti LA, Muesing MA. Interaction of HIV-1 integrase with DNA repair protein hRad18. J Biol Chem, 2002,277(30):27489-27493.

[36] Lloyd AG, Tateishi S, Bieniasz PD, et al. Effect of DNA repair protein Rad18 on viral infection. PLoS Pathog, 2006, 2(5):e40.

[37] Cherepanov P, Maertens G, Proost P, et al. HIV-1 integrase forms stable tetramers and associates with LEDGF/p75 protein in human cells. J Biol Chem, 2003, 278(1):372-381.

[38] Violot S, Hong SS, Rakotobe D, et al. The human polycomb group EED protein interacts with the integrase of human immunodeficiency virus type 1. J Virol, 2003, 77(23):12507-12522.

[39] Ao Z, Huang G, Yao H, et al. Interaction of human immunodeficiency virus type 1 integrase with cellular nuclear import receptor importin 7 and its impact on viral replication. J Biol Chem, 2007, 282(18):13456-13467.

[40] Hamamoto S, Nishitsuji H, Amagasa T, et al. Identification of a novel human immunodeficiency virus type 1 integrase interactor, Gemin2,that facilitates efficient viral cDNA synthesis in vivo. J Virol, 2006,80(12):5670-5671.

[41] Priet S, Navarro JM, Gros N, et al. Functional role of HIV-1 virion-associated uracil DNA glycosylase 2 in the correction of G:U mispairs to G:C pairs. J Biol Chem, 2003, 278(7):4566-4571.

[42] Priet S, Gros N, Navarro JM, et al. HIV-1-associated uracil DNA glycosylase activity controls dUTP misincorporation in viral DNA and is essential to the HIV-1 life cycle. Mol cell, 2005, 17(4):479-490.

[43] Tasaki T, Mulder LC, Iwamatsu A, et al. A family of mammalian E3 ubiquitin ligases that contain the UBR box motif and recognize N-degrons. Mol Cell Biol, 2005, 25(16):7120-7136.

[44] Luo K, Wang T, Liu B, et al. Cytidine deaminases APOBEC3G and APOBEC3F interact with human immunodeficiency virus type 1 integrase and inhibit proviral DNA formation. J Virol, 2007, 81(13):7238-7248.

[45] Mousnier A, Kubat N, Massias-Simon A, et al. von Hippel Lindau binding protein 1-mediated degradation of integrase affects HIV-1 gene expression at a postintegration step. Proc Natl Acad Sci U S A,2007, 104(34):13615-13620.

[46] Cereseto A, Manganaro L, Gutierrez MI, et al. Acetylation of HIV-1 integrase by p300 regulates viral integration. EMBO J, 2005, 24(17):3070-3081.

[47] Luban J. HIV-1 infection: going nuclear with TNPO3/Transportin-SR2 and integrase. Curr Biol, 2008, 18(16):R710-R713.

[48] Rain JC, Cribier A, Gérard A, et al. Yeast two-hybrid detection of integrase-host factor interactions. Methods, 2009, 47(4):291-297.

[49] Sorin M, Cano J, Das S, et al. Recruitment of a SAP18-HDAC1 complex into HIV-1 virions and its requirement for viral replication.PLoS pathogens, 2009, 5(6):e1000463.

[50] Manganaro L, Lusic M, Gutierrez MI, et al. Concerted action of cellular JNK and Pin1 restricts HIV-1 genome integration to activated CD4+ T lymphocytes. Nat Med, 2010, 16(3):329-333.

[51] Emiliani S, Mousnier A, Busschots K, et al. Integrase mutants defective for interaction with LEDGF/p75 are impaired in chromosome tethering and HIV-1 replication. J Biol Chem, 2005,280(27):25517-25523.

[52] Maertens G, Cherepanov P, Pluymers W, et al. LEDGF/p75 is essential for nuclear and chromosomal targeting of HIV-1 integrase in human cells. J Biol Chem, 2003, 278(35):33528-33539.

[53] De Rijck J, Vandekerckhove L, Gijsbers R, et al. Overexpression of the lens epithelium-derived growth factor/p75 integrase binding domain inhibits human immunodeficiency virus replication. J Virol,2006, 80(23):11498-11509.

[54] Vandekerckhove L, Christ F, Van Maele B, et al. Transient and stable knockdown of the integrase cofactor LEDGF/p75 reveals its role in the replication cycle of human immunodeficiency virus. J Virol, 2006,80(4):1886-1896.

[55] Llano M, Saenz DT, Meehan A, et al. An essential role for LEDGF/p75 in HIV integration. Science, 2006, 314(5798):461-464.

[56] Christ F, Voet A, Marchand A, et al. Rational design of small-molecule inhibitors of the LEDGF/p75-integrase interaction and HIV replication. Nat Chem Biol, 2010, 6(6):442-448.

[57] Zheng Y, Ao Z, Jayappa KD, et al. Characterization of the HIV-1 integrase chromatin- and LEDGF/p75-binding abilities by mutagenic analysis within the catalytic core domain of integrase. Virol J, 2010,7:68.

[58] Mulder LC, Muesing MA. Degradation of HIV-1 integrase by the N-end rule pathway. J Biol Chem, 2000, 275(38):29749-29753.

[59] Terreni M, Valentini P, Liverani V, et al. GCN5-dependent acetylation of HIV-1 integrase enhances viral integration. Retrovirology, 2009,7:18.

[60] Topper M, Luo Y, Zhadina M, et al. Posttranslational acetylation of the human immunodeficiency virus type 1 integrase carboxyl-terminal domain is dispensable for viral replication. J Virol, 2007, 81(6):3012-3017.