張冬冬

硒是人和動(dòng)物生命中必需的微量元素，缺硒或過量均會(huì)導(dǎo)致人畜得病。菌多糖在國(guó)際上被稱為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑”，目前已成為醫(yī)藥、保健品開發(fā)的“熱點(diǎn)”。黑木耳多糖由于其優(yōu)良的人體保健功能，在醫(yī)學(xué)界、營(yíng)養(yǎng)學(xué)界等都進(jìn)行了比較多的研究，并證明了多種臨床保健功能。黑木耳多糖的提取九十年代已引起人們的關(guān)注，但黑木耳硒多糖的提取工藝未見報(bào)導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料 伊春市鐵力林業(yè)局2009年栽培富硒黑木耳和黑木耳實(shí)體。

1.2 儀器與試劑 熒光分光光度計(jì)，Hitachi650-105型日本東京日光股份有限公司:電子自動(dòng)分析天平、恒溫電熱板，恒溫干燥箱。試劑:DAN、高氯酸、濃鹽酸、濃硝酸、環(huán)已烷、鹽酸羥胺、甲酚紅、氨水，EDTA-鈉鹽、亞硒酸鈉。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)硒溶液的配制 準(zhǔn)確稱取亞硒酸鈉0.2190 g經(jīng)處理后0.1 mol/L鹽酸稀釋至濃度為0.1 mol/L。

1.3.2 0.1%DAN試劑的配制 此試劑在暗室內(nèi)配制。置冰箱內(nèi)保存，使用前再用環(huán)已烷純化一次。

1.3.3 EDTA混合液的配制 將100 ml 0.2 ml/L EDTA二鈉鹽溶液，10 ml 10%鹽酸羥胺溶液，5 ml 0.02%甲酚紅指示劑混合，加水稀釋至1000 ml。

1.3.4 樣品處理 將自然風(fēng)干的樣品先用自來水洗凈，再用蒸餾水漂洗，自然風(fēng)干，再放60℃真空干燥箱烘干，粉碎過40目篩，裝瓶放入干燥器內(nèi)儲(chǔ)存待用。

1.3.5 樣品消化 準(zhǔn)確稱取樣品0.1000 g，加混合酸液5 ml，加熱，將消化液轉(zhuǎn)移到50 ml容量瓶中，準(zhǔn)確稀釋至50.00 ml。取稀釋液0.5 ml，加10%鹽酸1.0 ml水浴100℃煮沸10 min，使六價(jià)硒完全還原為四價(jià)硒，冷卻，加入5 ml EDTA混合液，混勻后溶液呈淺粉色。用1:1氨水(V/V)及1∶1鹽水(V/V)調(diào)至溶液呈淺黃色，于暗室內(nèi)加3 ml 0.1%DAN溶液混勻，沸水浴中加熱5 min，冷卻后加入5 ml環(huán)已烷振蕩5 min，將溶液移入分液漏斗中，分層后放掉水層，將環(huán)已烷傾入帶蓋付管中。

2 測(cè)定

將上述帶蓋付管中分離出的環(huán)已烷層傾入比色杯中，于熒光分光光度計(jì)上用激發(fā)波長(zhǎng)376 nm，發(fā)射波長(zhǎng)520 nm，測(cè)定苯并苤硒腦的熒光強(qiáng)度。

2.1 富硒黑木耳和普通黑木耳中無機(jī)元素及營(yíng)養(yǎng)成份含量測(cè)定 以伊春市鐵力食用菌生產(chǎn)基地提供的黑木耳及富硒黑木耳為分析對(duì)象，采用熒光分光光度計(jì)測(cè)定了九種無機(jī)元素。結(jié)果表明富硒黑木耳中對(duì)人體有害的重金屬鉛和汞的含量明顯低于普通黑木耳，其他元素含量降低幅度較小，硒對(duì)鉛、汞有拮抗作用。目前由于工業(yè)生產(chǎn)中鉛和汞的大量使用，使環(huán)境中鉛、汞含量較高。鉛、汞隨食物鏈進(jìn)入人體后，可在人體蓄積，造成慢性鉛、汞中毒。富硒黑木耳的出現(xiàn)為人們提供了一種簡(jiǎn)便易行的抗鉛、汞的心途徑。對(duì)富硒黑木耳中硒元素采用2、3-二氨基萘熒光光度分析法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明富硒黑木耳中硒含量為6.52 mg/kg，普通黑木耳中含量為0.45 mg/kg，說明黑木耳具有很強(qiáng)的耐硒和富硒能力，比目前國(guó)際上報(bào)導(dǎo)的食用菌中硒含量最高的美味牛肝菌(芬蘭)的硒含量1.9 mg/kg高6.5倍。同時(shí)對(duì)普通黑木耳和富硒黑木耳中所含的蛋白質(zhì)，氨基酸、脂肪、多糖粗纖維等營(yíng)養(yǎng)成份進(jìn)行了全面測(cè)定，結(jié)果表明富硒黑木耳粗蛋白、碳水化合物含量明顯提高。脂肪含量變化不明顯，富硒黑木耳中氨基酸的總量高達(dá)90.03 mg/g，其中人體必需的氨基酸達(dá)44.62 mg/g，對(duì)兒童智力有益的賴氨酸達(dá)8.31 mg/g。由此可見，富硒栽培改善了香菇子實(shí)體的品質(zhì)。

通過對(duì)富硒黑木耳中硒含量的測(cè)定，表明在培養(yǎng)基中加入一定濃度的硒，可被菌絲體吸收利用并富集，提高子實(shí)體中的硒含量，使原來乏硒的黑木耳成為富硒的，這項(xiàng)研究對(duì)富硒保健食品的開發(fā)具有重要意義。

2.2 硒含量 黑木耳中硒含量為0.45 μg/g，富硒黑木耳中硒含量為 6.52 μg/g。

3 討論

眾所周知，硒是人和動(dòng)物必需的微量元素，具有增加免疫力和防癌抑癌的作用，而黑木耳多糖亦具有增加免疫力，提高機(jī)體抗腫瘤的作用。據(jù)中科院地理研究所的調(diào)查報(bào)告，我國(guó)存在一條從東北至山東、青藏、云貴、新疆等22個(gè)省的低硒帶，占國(guó)土總面積的70%，幾億人生活在缺硒和低硒地域，硒分無機(jī)硒和有機(jī)硒，無機(jī)硒如亞硒酸鈉，毒性大，不易吸收，生物利用率低，有機(jī)硒毒性極小，易吸收，生物利用率高，為了將無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒，我們將含硒化合物按設(shè)計(jì)比例重量加入黑木耳固體培養(yǎng)基中培育出富硒黑木耳，提取分離得硒多糖，同時(shí)我們從普通黑木耳中提取黑木耳多糖，將硒多糖，多糖分別分為高、低劑量組，結(jié)果表明硒多糖及多糖均具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，且硒多糖組效果優(yōu)于多糖組，硒多糖高劑量組效果優(yōu)于環(huán)磷酰胺組，低劑量組較環(huán)磷酰胺組為弱，同時(shí)硒多糖，多糖可延長(zhǎng)小鼠生存期，硒多糖組效果優(yōu)于多糖組及環(huán)磷酰胺組［1］。

目前臨床上常用的化療藥如環(huán)磷酰胺對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)雖有較好的抑制作用，但毒性作用亦較大，可使患者機(jī)體免疫功臺(tái)魯下降，影響治療，硒多糖及多糖均可抑制腫瘤生長(zhǎng)且可提高杌體免疫力，無明顯不良反應(yīng)，而以硒多糖效果更佳，值得進(jìn)一步研究和開發(fā)。

［1］姚占芳，等.香菇多糖提取工藝條件和測(cè)定方法的研究，河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1995，29(2):180-183.