摘 要: 實驗課是基礎學科教學中一個關鍵環(huán)節(jié),它不僅與課堂講授的基本理論、基本知識相結(jié)合,而且是學習后繼課程和進行科研工作的基礎,同時也是培養(yǎng)學生獨立思考和理論聯(lián)系實際能力的重要手段。
關鍵詞: 生物實驗 常用儀器 使用方法
如何在實驗過程中正確使用實驗儀器并順利地完成實驗尤為關鍵。下面我結(jié)合自身幾年來的教學實踐,談一些體會。
一、容量玻璃容器的使用方法
1.吸管
吸管是生物化學實驗最常用的卸量容器。移取溶液時,如果吸管不干燥,應預先用所吸取的溶液將吸管潤洗2-3次,以確保所吸取的操作溶液濃度不變。吸取溶液時,一般用右手的大拇指和中指拿住管頸刻度線上方,把管尖插入溶液中,左手拿洗耳球,先把球內(nèi)空氣壓出,然后把吸耳球的尖端接在吸管口,慢慢松開左手指,使溶液吸入管內(nèi)。當液面升高至刻度以上時,移開吸耳球,立即用右手的食指按住管口,大拇指和中指拿住吸管刻度線上方再使吸管離開液面,此時管的末端仍靠在盛溶液器皿的內(nèi)壁上。略微放松食指,使液面平穩(wěn)下降,直到溶液的彎月面與刻度標線相切時,立即用食指押緊管口,取出吸管插入接受器中,管尖仍靠在接收器內(nèi)壁,此時吸管應垂直,與接收器約呈15°夾角。松開食指讓管內(nèi)溶液自然地沿器壁流下。
2.滴定管
可以準確量取不同定量的溶液或用于容量分析。常用的常量滴定管有25毫升及50毫升兩種,其最小刻度單位是0.1毫升,滴定后讀數(shù)時可以估計到小數(shù)點后兩位數(shù)字,經(jīng)常使用2毫升及5毫升半微量滴定管。這種滴定管內(nèi)徑狹窄,尖端流出的液體也小,最小刻度單位是0.01毫升至0.02毫升,讀數(shù)可到小數(shù)點后三位數(shù)字。在讀數(shù)前要多等一段時間,以便讓溶液緩慢流下。
3.量筒
量筒不是吸管或滴定管的代用品,在準確度要求不高的情況下,用來量取相對大量的液體。不需加熱促進溶解的定性試劑可直接在具有玻璃塞的量筒中配制。
二、顯微鏡的使用方法
1.準備工作
首先將顯微鏡的工作臺擦干凈,然后將要觀察的標本和各種器具準備好。
2.顯微鏡的使用
?。?)取用:將顯微鏡從鏡箱取出,取出時一手握鏡臂,一手托底座將其輕放在離工作臺邊緣8-10厘米處偏左的位置。
?。?)低倍鏡的使用
?、賹猓簩馇?,先安上合適的目鏡(一般采用10×目鏡),將10×、40×、100×物鏡按照順時針安在物鏡轉(zhuǎn)換器上,逆時針轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器使10×物鏡對準載物臺中央的通光孔。從目鏡中觀察,同時調(diào)節(jié)反光鏡或接通電源,直至視場明亮、均勻為止。
使用雙目顯微鏡對雙目鏡寬度要進行調(diào)節(jié),用推或拉的方法調(diào)節(jié)兩目鏡之間的距離,直到在兩個目鏡上雙眼同時觀察時,兩個圖形的視場正好完全重合,此時鏡筒刻度盤上所示的數(shù)字,就是觀察者兩眼瞳孔之間的距離。
根據(jù)物鏡的放大倍數(shù)調(diào)節(jié)聚光鏡的高度,使用油鏡時由于放大倍數(shù)大,鏡像亮度小,需要較強的照明,需要將聚光鏡升至最高處。
調(diào)節(jié)可變光闌(光圈)使聚光鏡的鏡口率與物鏡的鏡口率一致,才能充分發(fā)揮物鏡的分辨率,方法為:將顯微鏡調(diào)整到工作狀態(tài)后,從目鏡筒中拔出目鏡,一邊觀察(向拔出目鏡的目鏡筒里看),一邊縮小光闌,這時可看到縮小的光闌被物鏡成的像,然后逐漸調(diào)大光闌,當光闌像的邊緣與物鏡通光孔黑圈的邊緣一致時停止,這時的聚光鏡鏡口率與物鏡鏡口率就一致了。如顯微鏡可變光闌圓框上刻有表示口徑的標尺,可調(diào)至物鏡鏡口率的80%,即物鏡鏡口率為0.65,則可變光闌的標尺調(diào)至0.65×80%=0.52即可。
?、谟^察:將標本放置在載物臺上,使標本對準通光孔正中,下降鏡筒或升高載物臺,并從側(cè)面觀察,使物鏡下端和標本逐漸接近,但不能碰到蓋玻片。從目鏡觀察,用粗準焦螺旋慢慢升起鏡筒和下降載物臺直到看到標本為止,再調(diào)節(jié)細準焦螺旋至物像清晰。
?。?)高倍鏡的觀察
在低倍鏡下,找到要進一步觀察的部位,移至視野中心,再上升聚光鏡、逆時針轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器換上高倍鏡。顯微鏡一般稍微調(diào)節(jié)一下細準焦螺旋即可看到清晰的物像。
3.觀察后的處理工作及使用顯微鏡時應注意的事項
清潔:顯微鏡上的污物(殘物或灰塵),用擦鏡紙擦干凈,若擦不干凈可蘸少許二甲苯進行擦拭。
顯微鏡各部分的放置:擦完后,把物鏡轉(zhuǎn)離光軸,把反光鏡轉(zhuǎn)到與載物臺垂直的方向,以減少灰塵粘落上面,而后罩上鏡套,小心地放回鏡箱內(nèi),保存?zhèn)溆谩?br/> 最后談一下使用顯微鏡時應注意的事項。
?。?)取放時動作一定要輕,切忌震動和暴力,否則會造成光軸偏斜而影響觀察,而且光學玻璃也容易損壞。
?。?)由于物鏡的螺絲口容易損傷,安裝物鏡時要特別小心,即先向左方倒轉(zhuǎn)一小段,凹凸雙方吻合后再向右方旋轉(zhuǎn),不要轉(zhuǎn)得太緊,輕輕捻到頭,再稍緊即可。
(3)鏡檢標本應嚴格按照操作程序進行,觀察時要從低倍鏡開始,看清標本后再轉(zhuǎn)用高倍鏡、油鏡。
?。?)使用油鏡時一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后,應立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈,否則干后不易擦去,以致?lián)p傷鏡頭和標本。但應注意二甲苯用量不可過多,否則,物鏡中的樹膠會溶解,導致透鏡歪斜甚至脫落,蓋玻片移動甚至連同標本一起融掉。
(5)使用時不可用手摸光學玻璃部分,如需擦拭應嚴格按照光學部件擦拭辦法。
?。?)使用的蓋玻片和載玻片不能過厚或過薄。標準的蓋玻片為0.17±0.02毫米,載玻片為1.1±0.04毫米。過厚或過薄將會影響顯微鏡成像及觀察。
參考文獻:
[1]基礎生物化學實驗.高等教育出版社.