郭群 劉睿芬 畢鳳荷 張建輝 （天津市海納德動(dòng)物藥業(yè)有限公司 天津300456）

柴黃顆粒對(duì)LPS誘導(dǎo)的雞發(fā)熱模型的影響

郭群 劉睿芬 畢鳳荷 張建輝 （天津市海納德動(dòng)物藥業(yè)有限公司 天津300456）

柴胡、黃芩、葛根等是古方小柴胡湯的加減方。實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察柴黃顆粒（CHKL）0.2 g/kg、0.6 g/kg、1.0 g/kg劑量對(duì)80 μg/kg LPS誘導(dǎo)雞發(fā)熱模型的影響，考察了它們的解熱作用和對(duì)LPS的耐受作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.6g/kg、1.0g/kg劑量的CHKL對(duì)相同劑量的LPS誘導(dǎo)雞發(fā)熱均有顯著解熱作用；但不同劑量的CHKL在起效時(shí)間和作用效果上有所區(qū)別。

獸醫(yī)學(xué) 柴胡 黃芩 葛根 顆粒 LPS 解熱

隨著集約化養(yǎng)殖程度的增高，養(yǎng)殖密度增加，空氣流通不夠，或氣候突然變化等影響，雞群很容易大面積發(fā)病，尤其是季節(jié)交替時(shí)發(fā)病率更高，給養(yǎng)殖戶(hù)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。

家禽外感風(fēng)寒引起的發(fā)熱、寒顫、扎堆等癥狀，如不及時(shí)治療損失嚴(yán)重，尤其是雛雞死亡率比較高。在春冬、秋冬兩季交替過(guò)程中整體雞群發(fā)病表現(xiàn)為發(fā)熱、采食量降低、飲水量降低、精神沉郁、扎堆、寒顫等癥狀，隨著就出現(xiàn)甩頭、啰音、咳嗽喘氣等氣管、支氣管、氣囊、肺等感染，造成免疫力下降，引發(fā)整體雞群病毒和細(xì)菌的混合感染。目前治療主要以抗菌化學(xué)藥品為主，但復(fù)發(fā)率高。由于家禽消化道短，對(duì)中藥散劑的利用率較低，導(dǎo)致中藥的療效不突出。采用中藥提取物制備的制劑產(chǎn)品用于家禽的很少，如雙黃連口服液（國(guó)標(biāo)）、清解合劑（地標(biāo)升國(guó)標(biāo)）等，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足養(yǎng)殖市場(chǎng)的需要。柴黃顆粒臨床用于禽外感風(fēng)寒所致的發(fā)熱重、惡寒輕、精神萎靡、寒顫和輕微腹瀉等，效果較好。經(jīng)市場(chǎng)調(diào)研具有較好的市場(chǎng)潛力和經(jīng)濟(jì)效益，在推動(dòng)健康養(yǎng)殖和維護(hù)食品安全方面也具有積極的意義。

1 材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

海蘭褐蛋公雛，16日齡，體重平均125±10 g。

1.2 試劑

柴黃顆粒，天津生機(jī)集團(tuán)股份有限公司研制；內(nèi)毒素（LPS標(biāo)準(zhǔn)品，編號(hào)：L2008-25mg；批號(hào)：028K2340），美國(guó) sigma 公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 動(dòng)物分組及造模

將 150只 16日齡試驗(yàn)雞隨機(jī)分成高（1.0 g/kg）、中（0.6 g/kg）、低（0.2 g/kg）3個(gè)劑量組、健康對(duì)照組和模型組，每組30只試驗(yàn)雞。對(duì)以上劑量組和模型組按80 μg/kg進(jìn)行內(nèi)毒素腹腔注射，健康對(duì)照組按注射量注射滅菌后的生理鹽水；造模后120 min，給藥組按劑量灌服CHKL，健康對(duì)照組同劑量灌服生理鹽水；給藥5天停藥后，給中劑量組按80 μg/kg進(jìn)行內(nèi)毒素腹腔注射。

2.2 檢測(cè)指標(biāo)

造模前2天，每天2次（上午9:00和下午14:00）測(cè)定各組實(shí)驗(yàn)雞的基礎(chǔ)體溫（肛溫），統(tǒng)計(jì)基礎(chǔ)溫度，并做成曲線(xiàn)；造模后，分別在 30 min、120 min、240 min、360 min、480 min 時(shí)間測(cè)定肛溫，計(jì)算體溫變化值。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

各組數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示，多組數(shù)據(jù)采用SPASS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析，組間比較采用百分?jǐn)?shù)資料差異顯著性檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

圖1 雞只基礎(chǔ)體溫曲線(xiàn)圖

試驗(yàn)結(jié)果表明，各試驗(yàn)組雞只基礎(chǔ)體溫?zé)o顯著性差異（P＞0.05）。

3.1 基礎(chǔ)體溫具體結(jié)果見(jiàn)表1和圖1

表1 雞只基礎(chǔ)體溫（n=30）

3.2 CHKL對(duì)80 μg/kg劑量的LPS誘導(dǎo)雞只發(fā)熱的影響

CHKL對(duì)80 μg/kg劑量的LPS誘導(dǎo)雞只發(fā)熱的影響結(jié)果見(jiàn)表2、表3和圖2。

表2 CHKL對(duì)雞只腹腔注射80 μg/kg LPS后不同時(shí)間T的表2 影響（n=30）

表3 CHKL對(duì)雞只腹腔注射80μg/kg LPS后不同給藥天數(shù)表2 T的影響（n=30）

圖2 CHKL對(duì)雞只腹腔注射80 μg/kg LPS后不同給藥天圖2 數(shù)T的影響（℃）

試驗(yàn)結(jié)果表明：造模前，模型組、CHKL 3個(gè)劑量組、健康對(duì)照組體溫比較無(wú)顯著（P＞0.05）差異；造模后，模型組和CHKL 3個(gè)劑量組的體溫與健康對(duì)照組相比，有顯著性差異（P＜0.05）；給藥后30 min，CHKL 3個(gè)劑量組與模型組相比均有顯著差異（P＜0.05），CHKL中劑量組、低劑量組和高劑量組比較有顯著性差異（P＜0.05）；給藥后 120 min 至 120 h，CHKL低劑量組與中劑量組和高劑量組比較有顯著性差異（P＜0.05），CHKL中劑量組和高劑量組比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

3.3 第二次注射內(nèi)毒素對(duì)80 μg/kg劑量的LPS誘導(dǎo)雞只發(fā)3.3 熱的時(shí)間和強(qiáng)度的影響

給予服用5天CHKL中劑量組的雞只按80 μg/kg劑量第二次腹腔注射內(nèi)毒素，結(jié)果見(jiàn)表4和圖3。

表4 CHKL對(duì)雞只第二次腹腔注射80μg/kg LPS后不同時(shí)間T值的影響（n=30）

圖3 80 μg/kg LPS劑量第二次注射的溫度變化曲線(xiàn)圖

試驗(yàn)結(jié)果表明：腹腔注射LPS 120 min后，健康對(duì)照組和CHKL劑量組體溫均有所升高，但給予5天后的CHKL劑量組體溫達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)間延長(zhǎng)（4 h延至6 h），強(qiáng)度明顯較未灌服CHKL弱（42.54℃降至42.08℃）。表明服用CHKL雞只具有抑制內(nèi)毒素引起的體溫升高，延緩體溫上升時(shí)間的特性，說(shuō)明CHKL具有抑制內(nèi)毒素致熱作用。

4 討論

4.1 發(fā)熱模型的選擇

由于LPS（內(nèi)毒素）誘導(dǎo)的發(fā)熱表現(xiàn)為雙相熱和三相熱，并伴有寒顫、精神萎靡和輕微腹瀉等癥狀，與臨床感染性炎癥所致的發(fā)熱相似，是經(jīng)典的炎性發(fā)熱模型，常用于篩選解熱藥物。關(guān)于雞采用LPS致熱篩選家禽用解熱藥物的篩選目前國(guó)內(nèi)報(bào)道較少，本處方產(chǎn)品主要由柴胡、黃芩、甘草等多味藥材組成，臨床用于家禽外感風(fēng)寒所致的發(fā)熱、寒顫、精神沉郁、輕微腹瀉等癥，通過(guò)該法初篩后用于臨床放大實(shí)驗(yàn)具有指導(dǎo)意義。

4.2 給藥點(diǎn)的選擇

從以上結(jié)果可以看出注射內(nèi)毒素后，雞只體溫在1.5～4 h內(nèi)快速上升，4 h達(dá)最高點(diǎn)，然后緩慢下降，這時(shí)精神狀況未見(jiàn)明顯改善，12 h后體溫恢復(fù)正常。因此選擇給藥點(diǎn)非常關(guān)鍵，本實(shí)驗(yàn)選擇2 h處給藥，旨在觀察體溫快速上升過(guò)程中藥物的解熱作用，結(jié)果表明CHKL確有顯著的解熱作用。

4.3 中藥的抗內(nèi)毒素作用

由于中藥的組分較多，報(bào)道其對(duì)內(nèi)毒素有作用的藥材不少，柴胡、黃芩、甘草等藥材均在其中。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)CHKL中劑量組進(jìn)行第二次腹腔注射相同劑量和濃度的內(nèi)毒素，結(jié)果雞只對(duì)內(nèi)毒素具有耐受性，體溫達(dá)最高點(diǎn)的時(shí)間延緩，強(qiáng)度減弱，表明CHKL具有一定的抗內(nèi)毒素作用，具體用于預(yù)防的劑量等技術(shù)參數(shù)有待于進(jìn)一步研究。■

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2011-05-09