張大華 王波 姜世金* （山東省濰坊市寒亭區(qū)畜牧局 261100 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 泰安）

?

仔豬豬瘟免疫程序的探討

張大華①王波②姜世金②*（①山東省濰坊市寒亭區(qū)畜牧局 261100 ②山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 泰安）

本文采用IDEXX公司阻斷ELISA實(shí)驗(yàn)方法，在同一豬場相同的飼養(yǎng)條件下，對3種常用豬瘟免疫程序免疫后不同時間的豬瘟免疫抗體阻斷率進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：對仔豬進(jìn)行超前免疫(0、60)的免疫效果比其他免疫程序的免疫效果好。不同疫苗免疫的仔豬豬瘟抗體檢測結(jié)果表明，仔豬平均抗體阻斷率差異極顯著(P＜0.01)，因而制定適宜的免疫程序，應(yīng)該根據(jù)豬瘟疫苗免疫效果而定。

豬瘟 免疫程序 阻斷ELISA 超前免疫

豬瘟(；也稱Hog cholera HC)是由豬瘟病毒(CSFV)引起的一種豬的急性、烈性傳染病[1,2]，被國際獸疫局(OIE)列為必須上報(bào)的傳染病。一直以來我國采用豬瘟疫苗免疫對豬瘟進(jìn)行預(yù)防和控制，在降低豬瘟的感染率和發(fā)病率方面取得了很好的效果，但是近年來在實(shí)際生產(chǎn)中豬瘟仍時有發(fā)生，特別是仔豬的非典型豬瘟更為常見。除了豬瘟病毒本身的在免疫壓力下發(fā)生變異外[3], 豬瘟疫苗的實(shí)際免疫效果是很重要的一個因素[4]。因此對現(xiàn)有豬瘟免疫程序的研究與改進(jìn)，是提高仔豬成活率的重要條件。目前，用于豬瘟疫苗免疫效果評估的方法很多，選擇科學(xué)合理的檢測方法是科學(xué)評估的首要問題。據(jù)臺灣有關(guān)報(bào)道，豬瘟抗體檢測在ELISA與中和抗體檢測間具有高度相關(guān)性。因而本研究采用阻斷ELISA試驗(yàn)方法檢測不同豬瘟免疫程序?qū)ψ胸i的免疫效果，以確定最佳的免疫程序。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)用豬 選擇年齡、胎次、飼養(yǎng)狀況、環(huán)境條件相近的種母豬（母豬于配種前2個星期注射豬瘟活疫苗4頭份），所產(chǎn)仔豬用于免疫程序試驗(yàn)，仔豬20日齡斷乳，在正常條件下飼養(yǎng)管理。

1.1.2 試驗(yàn)疫苗 選用國內(nèi)某生物制品該生產(chǎn)的豬瘟活疫苗，每瓶50頭份。

1.1.3 試驗(yàn)試劑 豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(阻斷ELISA）由美國IDEXX公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 三種免疫程序 選擇鄰近分娩的健康母豬9頭，隨機(jī)分成A、B、C 3個組，每組3頭母豬。免疫程序：A組3頭母豬所生仔豬乳前首免1頭份、35日齡二免2頭份和60日齡三免4頭份的免疫豬瘟疫苗；B組3頭母豬所生仔豬乳前首免1頭份、60日齡二免4頭份；C組3頭母豬所生仔豬35日齡首免2頭份、60日齡二免4頭份的免疫程序。試驗(yàn)期間，弱仔豬、死豬及時淘汰。

1.2.2 采血及血清制備 9頭母豬于分娩當(dāng)天耳靜脈采血2~4ml。A、B 2組仔豬于免疫后每隔7d、C組每隔14d前腔靜脈采血2~3ml，直至仔豬77日齡。出欄前140d左右最后`次采血。將采集的血液注入已編號干燥無菌試管內(nèi)，靜置自然凝集析出血清，取血清注入離心管內(nèi)，-20℃冷凍待檢。

1.2.3 抗體檢測 按照IDEXX公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體檢測試劑盒說明操作，對采集的血清進(jìn)行抗體檢測。

2 結(jié)果

2.1 母豬豬瘟抗體阻斷率檢測結(jié)果

A、B和C 3組母豬豬瘟抗體阻斷率檢測結(jié)果見表1。

表1 A、B、C 3組母豬豬瘟抗體阻斷率檢測結(jié)果

2.2 仔豬豬瘟抗體平均阻斷率檢測結(jié)果

A組、B組、C組仔豬豬瘟抗體平均阻斷率檢測結(jié)果見表2。

表2 A組、B組、C組不同日齡仔豬豬瘟抗體平均阻斷率檢測結(jié)果

2.3 仔豬豬瘟抗體平均阻斷率比較結(jié)果

3組仔豬豬瘟抗體平均阻斷率比較結(jié)果見圖1。

圖1 A、B和C組仔豬豬瘟抗體平均阻斷率比較

3 分析與討論

由于豬瘟母源抗體的干擾，傳統(tǒng)的免疫程序(20、60日齡)已經(jīng)不適應(yīng)現(xiàn)在規(guī)?；i場的免疫，尤其豬瘟流行區(qū)[5-7]，因而，本試驗(yàn)設(shè)計(jì)3組免疫程序，分別是A組、B組和C組。A組仔豬超前免疫后，7日齡抗體平均阻斷率達(dá)到76%，35日齡時的抗體平均阻斷率為下降為56%；2次免疫后，56日齡時的抗體平均阻斷率持續(xù)下降；60日齡3次免疫后，140日齡的抗體平均阻斷率上升為54%。A組仔豬在35日齡實(shí)施2次免疫，免疫后抗體平均阻斷率都持續(xù)下降，沒有達(dá)到免疫效果，原因可能與35日齡仔豬抗體平均阻斷率較高而受到干擾所致。

B組仔豬超前免疫后，7日齡抗體平均阻斷率達(dá)到76%，56日齡時的抗體平均阻斷率下降為45%；60日齡2次免疫后，140日齡的抗體平均阻斷率上升為66%，效果明顯高于A組。B組仔豬超前免疫后至56日齡時的抗體平均阻斷率為45%，顯示仔豬超前免疫后，至多達(dá)到2個月的保護(hù)，這與何存利[6]等報(bào)道超前1次免疫后，應(yīng)在70日齡進(jìn)行第2次免疫，才能確保育肥豬出欄相似。B組僅通過兩次免疫，仔豬平均抗體阻斷率比免疫3次的A組仔豬高，該免疫程序優(yōu)于A組。

C組仔豬采取推遲首免的做法，35日齡實(shí)施首免，首免后抗體平均阻斷率持續(xù)下降；60日齡2次免疫后，70日齡抗體平均阻斷率仍持續(xù)下降，至140日齡的抗體平均阻斷率僅為40%。仔豬在整個生長期內(nèi)抗體平均阻斷率都較低，免疫效果差于A組和B組。因此，在3種免疫程序中，B組免疫次數(shù)少，抗體水平高，免疫效果最好。

[1] 殷震, 劉景華. 動物病毒學(xué)[M]. 第2版. 北京: 科學(xué)出版社, 1997, 652～664.

[2] 朱善德, 余曉華, 盧黎明等. 兩種不同豬瘟疫苗免疫抗體消長規(guī)律研究試驗(yàn)[J]. 上海畜牧獸醫(yī)通訊, 2008, (1): 50-51.

[3] 李紅衛(wèi), 涂大春, 金擴(kuò)世等. 豬瘟病毒石門株與兔化弱毒株gp55基因的克隆與序列分析[J]. 病毒學(xué)報(bào), 1998, 14(3): 257- 261.

[4] 蔡葵蒸, 張明林, 靳國琴等. 豬瘟流行區(qū)仔豬免疫程序的研究[J]. 中國獸醫(yī)科技, 2002, 32(4): 23-24.

[5] 何存利, 陳祝三, 謝琴等. 豬瘟乳前免疫及其抗體檢測[J]. 中國畜禽傳染病, 1998, 20(3): 143.

[6] 朱建國, 袁泉水. 集約化養(yǎng)豬場豬瘟免疫程序的研究[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào), 1999, 1(21): 40-43.

[7] 李明義, 白志娟, 趙雪麗等. 豬瘟抗體消長規(guī)律動態(tài)研究[J]. 中國動物檢疫, 2004, 21(8): 24-26.

（2011–04–17）

通訊作者

S851.33

A

1007-1733(2011)07-0018-02