沈少飛，葉盛權(quán)，，*，吳 暉，鐘 超，郭祀遠(yuǎn)，章超樺，黃 和

(1.廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東湛江524005; 2.華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東廣州510640)

羥丙基殼聚糖亞鐵配合物的合成

沈少飛1，葉盛權(quán)1，2，*，吳 暉2，鐘 超2，郭祀遠(yuǎn)2，章超樺1，黃 和1

(1.廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東湛江524005; 2.華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東廣州510640)

采用殼聚糖先與Fe2+配合，再用環(huán)氧丙烷改性，研究了羥丙基殼聚糖-Fe2+的合成工藝，并用紫外和紅外光譜對(duì)衍生物結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。結(jié)果表明，在殼聚糖用量為0.1g、Fe2+起始濃度為16mg/mL、溶液pH為2的條件下，制得殼聚糖亞鐵配合物。接著在殼聚糖-Fe2+∶環(huán)氧丙烷∶25%四甲基氫氧化銨為1mg∶10mL∶0.8mL條件下，制得羥丙基殼聚糖-Fe2+(HPCS-Fe2+)。位于1160～1030cm-1處有特征吸收峰，說明衍生化后得到的HPCS和HPCS-Fe2+上兩個(gè)羥基上都發(fā)生了反應(yīng)。

殼聚糖，衍生物，改性，結(jié)構(gòu)表征

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

殼聚糖 脫乙酰度≥90.0%，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限責(zé)任公司;冰乙酸、鹽酸羥胺、硫酸亞鐵銨、環(huán)氧丙烷、異丙醇、四甲基氫氧化銨、丙酮、乙醇等 均為分析純。

原子吸收分光光度計(jì) Thermo M6，美國賽默飛世爾科技有限公司;紫外分光光度計(jì)Uv2550 島津儀器(蘇州)有限公司;傅里葉紅外分析儀 PK-6000及Origin 6.0數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 美國 Mattson公司;離心機(jī)CR22GⅡ 日本日立ATTACHI;pH計(jì)雷磁PHS-25型酸度計(jì)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 殼聚糖脫乙酰度測定 采用線性電位滴定法［6］。樣品平行測定3次，取平均值得到原料殼聚糖脫乙酰度為91.3%。

1.2.2 殼聚糖亞鐵離子配合物制備條件的優(yōu)化 于50mL反應(yīng)體系中，以5%乙酸、1%鹽酸羥胺混合溶液為溶劑(以氨水調(diào)pH)［7］，做殼聚糖用量、Fe2+起始濃度、溶液pH三因素三水平正交實(shí)驗(yàn)(因素水平見表1)，在不同的反應(yīng)開始后12h取樣，過濾后產(chǎn)物在60℃烘干，用原子分光光度法檢測殼聚糖配合的Fe2+量。

表1 殼聚糖亞鐵離子配合反應(yīng)正交實(shí)驗(yàn)的因素水平表

1.2.3 殼聚糖亞鐵離子配合物的表征 于50mL反應(yīng)體系中，以5%乙酸、1%鹽酸羥胺混合溶液為溶劑(以氨水調(diào)pH為2)，加入0.1g殼聚糖和4.212g硫酸亞鐵銨，攪拌均勻使之反應(yīng)。12h后用丙酮乙醇溶液(1∶1，V∶V)將產(chǎn)物沉淀出來，用含水乙醇洗滌沉淀至洗滌液中檢不出硫酸根，將沉淀烘干至恒重。將一定量的殼聚糖亞鐵離子配合物以及殼聚糖，分別溶于0.1mol/L的HCl溶液中，進(jìn)行紫外吸收光譜掃描。

1.2.4 羥丙基殼聚糖配合物的制備 在平底燒瓶中將2g制備的殼聚糖亞鐵離子配合物溶于33%NaOH溶液中，攪拌均勻，在室溫下充分溶脹后放入冰箱中冷凍24h以上，制成堿化殼聚糖。堿化殼聚糖解凍后，擠壓除去過剩堿液，加入25mL異丙醇，室溫下攪拌30min。再加入25%四甲基氫氧化銨溶液1.6mL，室溫下邊攪拌邊加入20mL的環(huán)氧丙烷，室溫下再攪拌1h。然后把反應(yīng)容器置于60℃水浴鍋中恒溫回流加熱反應(yīng)6h，冷卻，過濾，濾餅用異丙醇洗滌數(shù)次后烘干。在60℃下干燥即得黑褐色粉末狀羥丙基殼聚糖亞鐵配合物。

1.2.5 產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)表征 采用KBr壓片法，在4000～400cm-1范圍內(nèi)進(jìn)行紅外光譜掃描。

2 結(jié)果與討論

2.1 殼聚糖-Fe2+配合物的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

CTS對(duì)Fe(Ⅱ)的配合量受反應(yīng)體系的pH、CTS用量和Fe(Ⅱ)起始濃度的影響最大。由表2可知，各因素對(duì)殼聚糖配合量效果影響的大小順序?yàn)?pH＞殼聚糖用量＞Fe2+起始濃度。CTS對(duì)Fe(Ⅱ)的配合最佳組合為CTS用量為0.1g、Fe(Ⅱ)起始濃度為16mg/mL、溶液pH為2。CTS對(duì)Fe(Ⅱ)的最佳配合量為404.9mg/g。

2.2 殼聚糖-Fe2+配合物的紫外吸收光譜分析

對(duì)CTS和殼聚糖-Fe2+配合物進(jìn)行紫外吸收光譜分析，結(jié)果如圖1所示。與CTS相比，CTS-Fe (Ⅱ)的光譜較CTS出現(xiàn)了兩個(gè)明顯的吸收峰。除在220.0nm處有1個(gè)寬而強(qiáng)的吸收峰外，還在324.0nm處產(chǎn)生新的吸收峰。這是因?yàn)榕浜衔镏械?、氧的孤?duì)電子發(fā)生n→σ*躍遷，從而導(dǎo)致電子光譜發(fā)生變化。由此可確證Fe(Ⅱ)與CTS發(fā)生了配位，且由于-NH2與Fe(Ⅱ)的結(jié)合，使C-N鍵在一定程度上有所削弱，從而可推斷-NH2是CTS分子中的主要吸附部位。

表2 殼聚糖-Fe2+配合物優(yōu)化條件實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖1 CTS和CTS-Fe2+的紫外吸收?qǐng)D譜

2.3 羥丙基殼聚糖-Fe2+的紅外吸收光譜分析

由圖2可見，殼聚糖經(jīng)羥丙基化后，位于1160～1030cm-1范圍內(nèi)的羥基吸收峰都有不同程度的減弱，說明衍生化后得到的HPCS和HPCS-Fe2+上兩個(gè)羥基上都發(fā)生了反應(yīng)。

圖2 CTS(a)、HPCS-Fe2+(b)和HPCS(c)的紅外光譜

殼聚糖上-CONH-基團(tuán)的N-H彎曲振動(dòng)峰1654.8(Ⅰ)、1598.9(Ⅱ)、1325.0(Ⅲ)cm-1在改性之后發(fā)生了變化，C-N的1380.9cm-1吸收峰亦發(fā)生了變化，說明在殼聚糖-NH2活性基團(tuán)上發(fā)生了反應(yīng)。通過上面的分析，結(jié)合殼聚糖-Fe2+配合物紫外吸收光譜分析，可以知道Fe2+首先與殼聚糖上的-NH2活性基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，羥丙基化主要發(fā)生在殼聚糖的C6-OH和C3-OH上。

3 結(jié)論

在殼聚糖用量為 0.1g、Fe2+起始濃度為16mg/mL、溶液pH為2的條件下，殼聚糖與亞鐵離子配合。接著，在殼聚糖-Fe2+∶環(huán)氧丙烷∶25%四甲基氫氧化銨為1∶10∶0.8(m/V/V)條件下，制得羥丙基殼聚糖-Fe2+。通過紫外和紅外光譜鑒定，用這種方法制備羥丙基殼聚糖-Fe2+是可行的。通過預(yù)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)顯示出羥丙基殼聚糖-Fe2+較殼聚糖具有更好的吸附銅、鉛離子特性，顯示出這種產(chǎn)物有較好的應(yīng)用前景。

表3 CTS、HPCS和HPCS-Fe2+的IR譜

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Synthesis of complex of O-(hydroxyl isopropyl)chitosan-Fe(II)

SHEN Shao-fei1，YE Sheng-quan1，2，*，WU Hui2，ZHONG Chao2，GUO Si-yuan2，ZHANG Chao-hua1，HUANG He1
(1.College of Food Science and Technology，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524005，China; 2.College of Light Industry and Food Science，South China University of Technology，Guangzhou 510640，China)

O-(hydroxyl isopropyl)Chitosan-Fe(II)was synthesized via 1，2-epoxypropane derived reaction of Fe2+with chitosan.The structure of the product was identified by fourier infrared spectrum UV spectrum.The experiment revealed that the product was made with the most superior process condition of 0.1g chitosan amount，16mg/mL initial concentration of Fe2+，pH2.The chitosan-Fe2+∶epoxypropane∶25% tetramethylammonium hydroxide were 1mg∶10mL∶0.8mL.The characteristic absorption peak was 1160～1030cm-1，it showed that reaction had been taken place on the two hydroxyl groups of HPCS and HPCS-Fe2+.

chitosan;derivant;modify;structure identify

TS201.1

B

1002-0306(2011)03-0242-03

殼聚糖(Chitosan，CTS)為甲殼素脫乙?；a(chǎn)物，是自然界存在的唯一堿性多糖。殼聚糖具有生物相容性和對(duì)過渡金屬及稀土金屬具有良好的配位作用等特性，已在食品、化工、醫(yī)用材料等方面得到了廣泛應(yīng)用［1-2］。但其緊密的晶態(tài)結(jié)構(gòu)使得它不溶于水和大多數(shù)有機(jī)溶劑，這就限制了它的推廣應(yīng)用［3］。因此，對(duì)殼聚糖進(jìn)行改性，解決它在水中或有機(jī)溶劑中的溶解性，獲得性能很好甚至是獨(dú)特性能的產(chǎn)品成為當(dāng)前研究和開發(fā)殼聚糖的重要課題。殼聚糖的羥基可與羥基化試劑反應(yīng)生成醚，如甲基醚、乙基醚、芐基醚、羥乙基醚、羥丙基醚等。近年來對(duì)這類反應(yīng)比較重視，可以開發(fā)出一些新型材料［4］。由于殼聚糖分子中具有氨基和羥基活性基團(tuán)，如果殼聚糖的氨基不加以保護(hù)的話，在醚化反應(yīng)中首先發(fā)生的是N-烷基化［5］。因此為了保護(hù)氨基，本研究通過亞鐵離子先與殼聚糖發(fā)生配合，制得殼聚糖亞鐵配合物，再在配合物分子上引入了羥丙基基團(tuán)，從而改變分子的空間結(jié)構(gòu)，削弱殼聚糖分子間和分子內(nèi)的氫鍵作用，為進(jìn)一步深入開發(fā)和應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ)。

2009-12-29 *通訊聯(lián)系人

沈少飛(1985-)，男，碩士研究生，從事水產(chǎn)品深加工方面的研究。

粵港招標(biāo)項(xiàng)目(2007A0209002);廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項(xiàng)目(2007B090400068;2007B090400113)資助;廣東海洋大學(xué)科學(xué)基金項(xiàng)目(0612184)資助。