馮文杰 陸 曉

(南京市玄武區(qū)中醫(yī)院，江蘇 南京 210018）

中藥復(fù)方柴花顆粒劑的制備工藝優(yōu)化

馮文杰 陸 曉

(南京市玄武區(qū)中醫(yī)院，江蘇 南京 210018）

目的優(yōu)化中藥復(fù)方柴花顆粒劑的制備工藝參數(shù)。方法考察中藥復(fù)方柴花顆粒劑工藝各步驟（提取、濃縮、干燥過程中）綠原酸含量變化，對(duì)主要工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化選擇，采用高效液相色譜法分析測(cè)定樣品含量。結(jié)果采用優(yōu)化后的提取制備工藝制得中藥柴花顆粒，測(cè)得其中綠原酸含量高于1.60 mg?g-1，比工藝優(yōu)化之前含量提高約50%。結(jié)論中藥復(fù)方柴花顆粒的制備工藝優(yōu)化有效提高了其指標(biāo)成分的含量，制劑質(zhì)量得到加強(qiáng)。

柴花顆粒劑；綠原酸；制備工藝優(yōu)化

中藥復(fù)方柴花顆粒劑是由臨床有效方研制的現(xiàn)代中藥復(fù)方醫(yī)院制劑，由柴胡金銀花連翹等八味中藥組成。該顆粒的主要功效是清熱解毒，用于外感發(fā)熱、咽紅腫痛、咳嗽等病癥。綠原酸是復(fù)方中藥材金銀花中的主要活性成分，是由咖啡酸與奎尼酸組成的縮酚酸，屬于苯丙素類化合物，其具有廣泛的生物活性[1,2]，如抗菌、抗病毒、消炎解熱、利膽保肝、抗脂質(zhì)過氧化，因此常作為生藥和一些中藥成方制劑質(zhì)量控制的指標(biāo)性成分。由于其分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，提取時(shí)不能高溫、強(qiáng)光及長(zhǎng)時(shí)間加熱[3]。本研究在充分結(jié)合綠原酸理化性質(zhì)的基礎(chǔ)上，經(jīng)試驗(yàn)考察中藥柴花顆粒的提取制備工藝，確定保證含量合理的關(guān)鍵步驟，通過制備工藝的優(yōu)化以提高指標(biāo)成分的含量，保證該顆粒的質(zhì)量。

1 材 料

Agilent 1200高效液相色譜儀，包括在線脫氣機(jī)、四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、DAD檢測(cè)器（Agilent公司）；AL204分析天平（METTLER TOLEDO公司）；KQ-250DE數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（BUCHI公司）；TGL-16G離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；綠原酸對(duì)照品（批號(hào)0753-9910，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；乙腈，磷酸為色譜純；水為純化水；其余試劑均為分析純；處方組成中八味中藥（南京市藥材公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備工藝考察

2.1.1 色譜條件[4-6]

色譜柱：Alltima C18（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.4%磷酸水溶液（12∶88）；檢測(cè)波長(zhǎng)：327 nm；流速：1.0mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10μL。理論塔板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算不低于5000。

2.1.2 對(duì)照品溶液配制

精密稱取綠原酸對(duì)照品適量，置棕色量瓶中，用50%甲醇超聲溶解并定容，配成質(zhì)量濃度為0.0482mg/mL的溶液，即得。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別精密吸取綠原酸對(duì)照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL于10mL棕色量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，搖勻，分別進(jìn)樣10μL，記錄峰面積。以峰面積和進(jìn)樣濃度求得回歸方程：A=24.364X+3.2786，r=0.999 8。在4.82～28.92 μg?mL-1的范圍內(nèi)，其濃度與色譜峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.1.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液10μL，按上述色譜條件進(jìn)樣，平行測(cè)定6次，記錄峰面積。其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.40%，說(shuō)明儀器精密度良好。

2.1.5 供試品溶液制備

按照中藥復(fù)方柴花顆粒劑的制法工藝制備成顆粒成品，分別于水煎提取后（煎煮液）、濃縮后（浸膏）、干燥后（顆粒成品）取樣[分別為5mL，5g，5g]，用50%甲醇溶解定容，制得供試品溶液。

2.1.6 供試液含量測(cè)定

精密吸取上述對(duì)照品及供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。計(jì)算結(jié)果見表1，損失比例指后一步測(cè)得量相比前一步驟綠原酸的下降比例。

表1 各工序中綠原酸的含量

2.1.7 工藝考察結(jié)果

上述試驗(yàn)表明，工藝過程中濃縮、烘干步驟均導(dǎo)致綠原酸含量的損失和下降。其中，濃縮步驟對(duì)綠原酸含量的影響最大，損失比例在50%以上，干燥步驟含量下降的幅度稍輕。此外，筆者在相同色譜條件下測(cè)定了金銀花藥材中綠原酸含量，經(jīng)與煎煮提取液中綠原酸含量比較表明，提取率在45%～60%之間，反映原工藝提取率偏低也是導(dǎo)致成品中綠原酸含量低的重要原因之一。

2.2 制備工藝優(yōu)化

[7]并結(jié)合上述工藝考察結(jié)果，在充分尊重實(shí)際生產(chǎn)條件、不改變基本工藝過程的前提下，我們對(duì)提取用溶劑量（用水量）、提取時(shí)間、濃縮溫度三個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)化研究，篩選出合理且具有可操作性的最佳工藝參數(shù)。

2.2.1 用水量的考察

取相當(dāng)于中藥復(fù)方柴花顆粒劑1/20處方量的八味藥材，每味藥材稱取三份，按處方比例均勻混合，編號(hào)1、2、3。分別按10+8倍量（第一次10倍，第二次8倍），8+6倍量，7+5倍量加水煎煮兩次，每次1.5 h；提取液濃縮至相同水平時(shí)（接近7+5倍量所得水提液），分別取樣，測(cè)定其中綠原酸含量，比較加水量對(duì)綠原酸提取率的影響，結(jié)果見表2。[加溫濃縮過程是綠原酸損失的原因之一]

表2 水量對(duì)綠原酸提取率的影響

2.2.2 煎煮提取時(shí)間的考察

取相當(dāng)于中藥復(fù)方柴花顆粒劑1/20處方量的八味藥材，每味藥材稱取三份，按處方比例均勻混合，編號(hào)1、2、3。均分別加入7+5倍量加水煎煮兩次；1號(hào)每次各煎煮0.5 h，2號(hào)每次1.0 h，3號(hào)每次1.5 h。合并提取液并稱重，分別取樣測(cè)定其綠原酸含量，結(jié)果見表3。

表3 煎煮時(shí)間對(duì)綠原酸提取率的影響

2.2.3 濃縮溫度的考察

將“2.2.2項(xiàng)”下所得三份提取液合并后，平均分成3份，每份580.0 g，分別采用100 ℃常壓敞口濃縮、80 ℃和60 ℃減壓濃縮至相同水平（65+5g），比較濃縮前后綠原酸含量的變化以確定最佳濃縮溫度，結(jié)果見表4。

表4 濃縮溫度對(duì)綠原酸含量的影響

2.2.4 工藝參數(shù)確定

由試驗(yàn)結(jié)果得中藥柴花顆粒劑最佳制備工藝參數(shù)為：①用水量：相當(dāng)于藥材總量7+5倍，綠原酸得率最佳；②煎煮時(shí)間及次數(shù)：煎煮兩次，每次0.5h；③最佳濃縮溫度為80 ℃，該溫度下綠原酸損失最小。

2.2.5 樣品制備及含量測(cè)定

按優(yōu)化后的工藝方法制備中藥復(fù)方柴花顆粒，取本品顆粒，研細(xì)，取約0.25g，每批樣品各2份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理30min；放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，濾液用0.45μm微孔濾膜濾過。分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，記錄峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算樣品中綠原酸的含量，結(jié)果見表5。

表5 不同批次樣品的綠原酸含量

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)工藝考察結(jié)果表明，濃縮工藝使綠原酸含量下降明顯，由于兩批次在用水量（前者用水量較高）和濃縮溫度上有一定差異（后者濃縮溫度稍低），故提取總量和含量下降的比例也有一定程度的浮動(dòng)。工藝優(yōu)化步驟中相關(guān)參數(shù)的設(shè)置盡可能地貼近實(shí)際生產(chǎn)需要，如用水量的設(shè)置為（10+8）、（8+6）、（7+5），主要是從避免濃縮時(shí)間延長(zhǎng)致含量降低和節(jié)約能源的角度考慮的。

由含量測(cè)定結(jié)果可知，采用優(yōu)化后的工藝所制得的中藥復(fù)方柴花顆粒，其指標(biāo)成分綠原酸含量顯著提高（≥1.60mg/g），比工藝優(yōu)化之前含量提高約50%。表明通過制備工藝的優(yōu)化，提高生藥材中綠原酸的提取率，減少綠原酸在受熱過程中的損失率，確保了成品中有效成分含量，進(jìn)而保證了該顆粒的制劑質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

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Optimization of the Preparation Technology for Chaihua Granules

FENG Wen-jie, LU Xiao
(Nanjing Traditional Chinese Medicine Hospital, Nanjing 210018, China)

ObjectiveTo establish an appropriate preparation technology for Jinchai granules.MethodsTo investigate the content of chlorogenic acid in the process steps (extraction, concentration and drying process) of Jinchai granules and optimize the main process parameters.The chlorogenic acid content of the samples were determined by high performance liquid chromatography.ResultsThe chlorogenic acid content of Jinchai granules in optimized preparation technology was higher than 1.60 mg?g-1 and increased by about 50% than the original process.ConclusionThe optimized preparation technology effectively improved the content of chlorogenic acid and the quality of preparation had been strengthened.

Jinchai granules; Chlorogenic acid;Optimum Preparation

R282.710.2

B

1671-8194（2011）28-0219-02