陸廷勇

(江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 鎮(zhèn)江212001)

復(fù)方青黛膠囊收載于國家藥品標(biāo)準(zhǔn)，處方由青黛、馬齒莧、白芷、土茯苓、紫草、貫眾、蒲公英、丹參(粉萆解)、白皮、梅、五味子(酒制)、山楂(焦)、建曲組成.其功能主治為清熱解毒，化淤消斑，祛風(fēng)止癢.用于血熱挾瘀、熱毒熾盛證;進行期銀屑病、玫瑰糠疹、藥疹見上述證候者.筆者通過高效液相色譜法測定復(fù)方青黛膠囊中歐前胡素的含量，進一步提高了該藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).

1 儀器與試藥

1.1 儀器 SK250LH超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司);BP211D型電子天平(賽多利士);Agilent1100高效液相色譜儀，G1314A VWD檢測器(美國安捷倫公司).

1.2 試藥 歐前胡素對照品 (中國藥品生物制品檢定所110826－200712);甲醇為色譜純;水為純化水;復(fù)方青黛膠囊(陜西醫(yī)藥控股集團 ××制藥有限責(zé)任公司，批號:110202，101202，100409.)

2 方法學(xué)考察

2.1 色譜條件 色譜柱:Kromsil C18柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm);流動相［1］:甲醇 － 水 (60∶40);流速:1.0 mL·min－1;柱溫:30℃;進樣量:10 μL;檢測波長300 nm;理論塔板數(shù)14 434.

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取歐前胡素對照品10.23 mg置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成對照品貯備液(每1 mL含歐前胡素204.60 μg).再精密量取對照品貯備液1 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得歐前胡素對照品溶液(每1 mL含歐前胡素20.46 μg).

2.2.2 樣品溶液的制備 取本品10粒內(nèi)容物，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當(dāng)于2粒內(nèi)容物的重量)，置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流提取4 h，提取液回收乙醚至干，殘渣加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(0.5 μm)，取續(xù)濾液，即得.

2.3 專屬性考察 按標(biāo)準(zhǔn)處方量及制法制得不含青黛的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液.精密吸取上述對照品溶液、供試品溶液與陰性對照溶液各10 μL，進樣測定，結(jié)果陰性對照溶液在與對照品色譜峰相應(yīng)位置上無色譜峰出現(xiàn)，表明陰性對照品溶液對測定結(jié)果無干擾，方法專屬性良好，色譜圖見圖1.

2.4 線性關(guān)系 分別精密量取歐前胡素對照品貯備液(204.60 μg·mL－1)0.1 mL、0.5 mL、1 mL、2 mL、3 mL 于 10 mL容量瓶中，定容，搖勻，在上述色譜條件下進樣分析，以峰面積(A)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)濃度(C)為橫坐標(biāo)進行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為 A=20.448C+0.077 3(r=0.999 9) ，線性范圍 2.046 ～61.38 μg·mL－1，結(jié)果表明峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系.

圖1 高效液相色譜圖

2.5 精密度試驗 取同一對照品溶液，依法操作，連續(xù)進樣5次，每次10 μL.結(jié)果歐前胡素對照品峰面積的 RSD為0.5%(n=5)，表明精密度良好.

2.6 重復(fù)性試驗 取同一批樣品，照樣品測定法測定5份，按供試品溶液制備方法制備溶液，分別進樣依法測定峰面積:35.034、35.132、35.123、35.128、35.039，計算含量.結(jié)果歐前胡素含量的RSD為0.2%(n=5)，表明方法重現(xiàn)性良好.

2.7 穩(wěn)定性試驗 在上述試驗條件下，樣品溶液室溫放置24 h，每隔2 h時進樣10 μL，記錄峰面積.歐前胡素峰面積的RSD為0.9%.表明供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定.

2.8 加樣回收率試驗 取6份已知含量的樣品(批號為110202)，精密稱取(約相當(dāng)于1粒內(nèi)容物的重量)，置索氏提取器中，精密加入歐前胡素對照品儲備液 (204.6 μg·mL－1)各0.5，0.6，0.7 mL(每個濃度各 2 份)，依次加入 6 份樣品中，按供試品溶液制備方法制備溶液，進樣測定，計算回收率，結(jié)果見表1.

2.9 樣品測定 取樣品溶液和對照品溶液，各進樣10 μL，讀取峰面積值，按外標(biāo)法計算含量，結(jié)果見表2.

3 結(jié)論

3.1 在供試品溶液制備中，我們對比了超聲提取、回流提取、索氏提取等方法，結(jié)果表明索氏提取完全，雜質(zhì)較少.對提取時間分別考察了1 h、3 h、4 h、6 h，索氏提取時間比較表明4 h和6 h的提取效率一樣，而3h提取不完全，因此本試驗確定索氏提取時間為4 h.

3.2 試驗表明，本測定方法簡單，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，靈敏、重現(xiàn)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制指標(biāo)之一.

表1 歐前胡素加樣回收率

表2 樣品含量測定結(jié)果(n=3)

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:107.