范英華

乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的世界性傳染病[1]。據(jù)報(bào)道，在全世界60億人口中，約20億人曾感染過乙型肝炎病毒(HBV)，其中3．6億人為慢性HBV感染，每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化及其原發(fā)性肝細(xì)胞癌，我國是乙型肝炎高發(fā)區(qū)，HBV的攜帶者約1．2億，占1／3，其中3000萬發(fā)病，是我國常見的傳染病，乙肝的傳染性和病死率均居高不下，已經(jīng)成為現(xiàn)在最為嚴(yán)重的社會公共衛(wèi)生問題，嚴(yán)重影響著人們的身體健康。臨床上慢性乙型肝炎病毒的診斷、抗病毒藥物的使用以及療效的預(yù)測均是依靠乙肝血清學(xué)指標(biāo)及其HBV-DNA的檢測結(jié)果來決定的，它不僅可以及時(shí)準(zhǔn)確地檢測慢性乙型肝炎及肝硬化患者血液中HBV的復(fù)制情況[2]。近年來，伴隨著HBeAg定量測定的不斷開展，為了更好地表達(dá)定量HBV-DNA和定量HBeAg之間的關(guān)系，筆者采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)、化學(xué)發(fā)光法及全自動酶免儀分別檢測患者血清HBV-DNA、HBeAg及HBV PreS1-Ag，并進(jìn)行了比較分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 我院自2008年1月～2010年1月收治的60例慢性乙型肝炎及肝硬化患者共60例，HBsAg均為陽性。其中，男性34例，女性26例，年齡18～64歲，平均年齡43歲。上述所有患者入院前均未接受過抗病毒治療，無合并其他肝炎病毒感染，全部病例均符合2000年中華醫(yī)學(xué)會傳染病和寄生蟲病學(xué)會分會，肝病學(xué)分會制定的病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，均于清晨空腹用無菌負(fù)壓管抽取靜脈血3ml，2h內(nèi)分離血清備用。上述患者在性別、年齡等方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 慢性乙型肝炎患者的臨床診斷主要包括：HBsAg陽性超過6個(gè)月以上者；谷草轉(zhuǎn)氨酶或谷丙轉(zhuǎn)氨酶呈持續(xù)或間歇升高水平；血清HBV-DNA大于10～5copies/ml；肝臟檢查結(jié)果顯示為慢性肝炎。對于非活動性HBsAg陽性攜帶狀態(tài)的患者是：HBsAg呈陽性大于6個(gè)月；HBeAg雖然為陰性，但抗HBe陽性；谷草轉(zhuǎn)氨酶或谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平持續(xù)正常；血清HBV-DNA小于10～5copies/ml；肝臟檢查結(jié)果顯示沒有明顯的炎癥。

1．3 檢測方法 采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)、化學(xué)發(fā)光法及全自動酶免儀分別檢測患者血清HBV-DNA、HBeAg及HBV PreS1-Ag。HBV-DNA定量檢測采用美國ABI公司ABI Prism 7000熒光定量PCR儀，試劑由廣州中山達(dá)安有限公司提供，儀器采用中山達(dá)安DA7600型，具體操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行，檢測值小于10 copies／ml者判定為未檢測出HBV-DNA。HBeAg定量檢測采用ARChitecti2000SR化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，試劑盒由美國雅培生物技術(shù)有限公司提供。HBV PreS1-Ag定量檢測采用全自動酶免儀，試劑由上?？迫A有限公司提供。操作嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS11.0軟件，卡方檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

60例HBsAg陽性慢性乙型肝炎及肝硬化患者中，HBV PreS1-Ag的檢出率為58.33%，HBV-DNA的檢出率為61.67%，HBeAg的檢出率為33.3%。HBV PreS1-Ag、HBV-DNA的檢出率明顯高于HBeAg的檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)；HBV PreS1-Ag與HBV-DNA的檢出率相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。

表1 HBV PreS1-Ag、HBV-DNA、HBeAg之間的關(guān)系分析比較

3 討論

乙肝病毒檢測為陽性，病程超過半年有慢性肝炎表現(xiàn)者均可診斷為慢性乙型肝炎。其臨床主要表現(xiàn)為惡心、腹脹、乏力、畏食以及肝區(qū)疼痛等癥狀。病情嚴(yán)重的患者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌以及脾大，肝功能可時(shí)持續(xù)異常。乙型肝炎病毒慢性感染的自然病程可分為連續(xù)的3個(gè)階段，即免疫耐受期、免疫清除期和病毒殘留期。一般認(rèn)為，HBeAg陽性和含量與乙肝病毒的復(fù)制情況及傳染性強(qiáng)弱相關(guān)[3]，在免疫耐受期血清HBsAg和HBeAg為陽性，血清轉(zhuǎn)氨酶正?；蛘咻p度升高；血清HBV-DNA水平較高，在免疫清除期，血清HBV-DNA水平出現(xiàn)下降而血清轉(zhuǎn)氨酶水平升高，并且在這一時(shí)期的患者常會反復(fù)出現(xiàn)臨床癥狀及轉(zhuǎn)氨酶的波動；在病毒殘留期，血清HBV-DNA通?？稍诜浅５偷乃竭M(jìn)行復(fù)制，并且在HBV-DNA陽性患者中有一部分患者的HBeAg為陰性。由于本次研究對象采集的標(biāo)本均是來自初次就診的患者，大多數(shù)處于免疫耐受期，甚至是處于免疫清除期，因此，HBeAg是HBV核心基因的一部分，血清HBV-DNA和HBeAg量呈非正態(tài)分布，乙型HBV感染后免疫攻擊的靶部位主要是肝細(xì)胞膜表面的HBsAg、HBeAg，在HBV復(fù)制過程中由前C基因與C基因一起產(chǎn)生一個(gè)P25前體多肽鏈，經(jīng)轉(zhuǎn)膜作用或自身消化掐頭去尾，形成最終的HBeAg。乙肝患者血清中存在HBeAg，是病毒復(fù)制活躍的指標(biāo)，是臨床上表示病毒復(fù)制較為實(shí)用的血清標(biāo)志物；通常HBeAg陽性者病毒復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)。但HBeAg陰性乙肝病毒復(fù)制并不一定停止，僅可能是復(fù)制水平相對較低，這與以下因素有關(guān)：①基因的變異致使HBeAg水平降低，甚至可能發(fā)生HBeAg的轉(zhuǎn)換，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答過強(qiáng)，造成病情加重。②乙肝表面抗原的表達(dá)降低，甚至停止，但HBV-DNA復(fù)制仍延續(xù)。③HBeAg的合成與分泌發(fā)生障礙，但不影響病毒復(fù)制。乙型肝硬化以30歲以上患者多見，且乙型肝炎后肝硬化患者中男性患者明顯多于女性患者，這可能與乙型肝炎病毒感染的自然病程有關(guān)，肝硬化時(shí)由于肝臟正常結(jié)構(gòu)改變，肝細(xì)胞炎癥壞死，肝臟合成、轉(zhuǎn)運(yùn)等功能降低，患者前白蛋白及血漿白蛋白水平下降，膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶水平逐漸升高。HBeAg消失至抗HBe產(chǎn)生，因此，具有抗病毒治療指標(biāo)的慢性乙型肝炎患者，應(yīng)采用更為合理的治療方案，以免貽誤病情，給予抗病毒治療對改善預(yù)后、延緩病情發(fā)展至關(guān)重要。對慢性肝炎患者要及時(shí)發(fā)現(xiàn)肝纖維化，因?yàn)椋砸倚透窝最A(yù)后緩慢發(fā)展為肝纖維化，最終導(dǎo)致肝硬化，因此，應(yīng)及時(shí)采取治療措施。血清標(biāo)本HBV-DNA陰性，可能與以下方面有關(guān)：①病毒處于免疫清除期的晚期階段，由于免疫應(yīng)答系統(tǒng)的激活，HBV-DNA被逐漸清除，但是HBeAg還沒消失；②病毒處于殘余整合期的早期，雖然部分患者病毒有低水平的復(fù)制，但復(fù)制水平低于實(shí)驗(yàn)室所能夠檢測的極限，其e抗原結(jié)果顯示為弱陽性。③病毒DNA與宿主肝細(xì)胞基因組完全整合，血清中DNA呈現(xiàn)為低拷貝量，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室無法檢測，血清學(xué)中HBeAg結(jié)果顯示為陽性，因此，不能僅僅依據(jù)乙肝血清學(xué)標(biāo)志物或者血清HBVDNA來判斷乙型肝炎病毒感染復(fù)制的程度，而是要綜合HBVDNA或者HBeAg來判定。對于肝硬化患者來說，常會有腎功能衰竭、感染、消化道大出血以及肝性腦病等并發(fā)癥的出現(xiàn)，且并發(fā)癥越多，其程度也就越嚴(yán)重，預(yù)后相對也就越差[4]。因此，感染早期給予正確的診斷及其合理的抗菌治療，是改善乙型肝炎后肝硬化預(yù)后的關(guān)鍵所在。

綜上所述，60例HBsAg陽性慢性乙型肝炎及肝硬化患者中，HBV PreS1-Ag、HBV-DNA的檢出率明顯高于HBeAg的檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)；HBV PreS1-Ag與HBV-DNA的檢出率相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。因此，HBV PreS1-Ag與HBV-DNA在慢性乙肝及肝硬化患者血清中有相似的檢出率，在反映慢性乙型肝炎及肝硬化患者血液中HBV的復(fù)制情況時(shí)更加顯著。

[1] 李巖.淺談重視乙型肝炎患者的心理護(hù)理[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2009,15（6）：52.

[2] 竇亞玲，李永哲，劉志肖，等．乙型肝炎病毒前sl抗原檢測的臨床價(jià)值[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(81)：714-716.

[3] 梁偉.規(guī)范化病毒檢測,肝病治療成功的關(guān)鍵[J].中國處方藥,2010,12(12):15-17.

[4] 陳曼丹，邱小華，林漫燕，等．乙型肝炎患者血清PreS1-Ag檢測的臨床分析[J]．國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志，2007，34(6)：367-368.