陳鴛誼，李行諾，張翠萍，葛志偉，顏繼忠

（1.浙江工業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 杭州 310032；2.浙江大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 杭州 310058）

當(dāng)歸中的一個(gè)新苯酞類(lèi)化合物

陳鴛誼1，李行諾1，張翠萍1，葛志偉2，顏繼忠1

（1.浙江工業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 杭州 310032；2.浙江大學(xué) 藥學(xué)院，浙江 杭州 310058）

為研究當(dāng)歸根莖中的有效化學(xué)成分，采用D101大孔吸附樹(shù)脂、硅膠柱色譜和反相高效制備液相色譜等方法從當(dāng)歸乙醇提取物中分離純化得到7個(gè)化合物，通過(guò)化合物的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定為senkyunolide H（Ⅰ），senkyunolide I（Ⅱ），Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯（Ⅲ），Z-藁本內(nèi)酯（Ⅳ），E-6，7-反式－二羥基藁本內(nèi)酯（Ⅴ），阿魏酸（Ⅵ），falcarindiol（Ⅶ），其中化合物Ⅲ為一新的苯酞類(lèi)化合物.

當(dāng)歸；Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯；苯酞類(lèi)化合物

當(dāng)歸為傘形科植物Angelicasinensis的干燥根［1］，藥用歷史悠久，素有“十方九歸”之說(shuō)，具有補(bǔ)血活血、潤(rùn)腸、調(diào)經(jīng)之功效.現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，其對(duì)心血管系統(tǒng)疾病和腫瘤疾病亦有較好的療效［2］.當(dāng)歸成分非常復(fù)雜，主要含有苯酞類(lèi)、香豆素類(lèi)、黃酮類(lèi)以及有機(jī)酸類(lèi)化合物［3］.為進(jìn)一步研究當(dāng)歸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和建立當(dāng)歸快速提取分離的工藝流程，對(duì)當(dāng)歸的化學(xué)成分進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究，為建立當(dāng)歸工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).對(duì)當(dāng)歸中主要揮發(fā)性成分進(jìn)行了分離和鑒定.在HPLC的指導(dǎo)下，采用大孔吸附樹(shù)脂、硅膠柱色譜和制備型高效液相色譜等方法從當(dāng)歸90%乙醇提取物中分離得到了7個(gè)化合物.

1 儀器與試劑

美國(guó)Agilent 1100制備型高效液相色譜儀，HP chemstations處理軟件（安捷倫科技有限公司，美國(guó)）；分析型高效液相色譜（Knauer，杭州綠綿安特分析系統(tǒng)裝備有限公司），進(jìn)樣器 Auto sampter 3800，四元梯度泵、在線脫氣機(jī)、多波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；BRUKER AC-80型磁共振光譜儀（TMS為內(nèi)標(biāo)）測(cè)定.Mill-Q超純水器（Mllipore公司）；柱色譜硅膠（100～200目）和薄層色譜硅膠均為青島海洋化工廠產(chǎn)品.甲醇為色譜純，購(gòu)自美國(guó)Merck公司，其他溶劑均為分析純.當(dāng)歸（Angelicasinensis）藥材購(gòu)于杭州胡慶余堂，樣品保存于浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院.

2 提取與分離

當(dāng)歸干燥根3.0 kg，用90%乙醇回流提取2次，每次1.5 h，提取液用紗布濾去固體顆粒，減壓濃縮得浸膏1 504 g.浸膏用去離子水溶解，過(guò)濾，使用D101大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行層析分離，分別用水、20%乙醇、60%乙醇和90%乙醇洗脫，收集60%和90%乙醇洗脫部分，減壓濃縮.60%乙醇洗脫組分經(jīng)硅膠柱色譜分離得到6個(gè)流分（Fr.1—6），90%乙醇洗脫組分經(jīng)硅膠柱色譜分離得到7個(gè)流分（Fr.7—14）.各流分經(jīng)高效制備液相色譜純化，色譜柱為ZORBAX SB-C18（21.2×250 mm，7μm），流 速8 mL／min，甲醇－水梯度洗脫.Fr.3得到化合物Ⅵ（37 mg），Ⅴ（54 mg），Ⅱ（333 mg），Ⅰ（68 mg）；Fr.8得到化合物Ⅲ（22 mg），Ⅳ（56 mg）；Fr.12得到化合物Ⅶ（45 mg）.化合物Ⅰ－Ⅶ的化學(xué)結(jié)構(gòu)分別為

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅰ 棕黃色油狀物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.94（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.49（2 H，sext，H-10），1.85（1 H，m，H-5a），2.04（1 H，m，H-5b），2.33（2 H，q，H-9），2.40（1 H，m，H-4a），2.64（1 H，m，H-4b），3.94（1H，dt，J＝3.2，9.6 Hz，H-6），4.57（1H，d，J＝3.5 Hz，H-7），5.30（1H，t，J＝7.9 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.4（C-1），153.2（C-3），148.2（C-3a），125.4（C-7a），114.4（C-8），67.3（C-6），63.5（C-7），28.1（C-9），25.7（C-5），22.3（C-10），18.4（C-4），13.8（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道基本一致，鑒定化合物為senkyunolide H.

化合物Ⅱ 棕黃色油狀物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.95（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.49（2 H，sext，H-10），1.89（1H，m，H-5a），2.10（1 H，m，H-5b），2.35（2 H，q，H-9），2.49（1H，m，H-4a），2.56（1H，m，H-4b），3.94（1 H，ddd，J＝9.6，6.4，3.2 Hz，H-6），4.49（1H，d，J＝5.3 Hz，H-7），5.28（1H，t，J＝7.9 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.2（C-1），153.1（C-3），148.0（C-3a），125.8（C-7a），114.3（C-8），71.6（C-6），67.5（C-7），28.1（C-9），26.5（C-5），22.3（C-10），19.0（C-4），13.8（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］報(bào)道基本一致，鑒定化合物為senkyunolide I.

化合物Ⅲ 棕黃色油狀物.［α］2D0＝－1.50（c＝0.28，CHCl3），通 過(guò) HR-EI-MS 可 知 分 子 式 為C13H18O4（m／z238.1216，Cal.238.1205），IR（KBr，cm－1）3 450，2 960，1 760，1 677，1 637，1 466.1HNMR（CDCl3，500 MHz）譜中，高場(chǎng)區(qū)給出一個(gè)甲基質(zhì)子信號(hào)δ：0.95（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11）；四個(gè)亞甲基質(zhì)子信號(hào)δ：1.50（2 H，sext，H-10），1.99（2H，m，H-5），2.36（2 H，q，H-9），2.45，2.55（2 H，m，H-4）；兩個(gè)連有氧原子的次甲基質(zhì)子信號(hào)δ：3.98（1H，J＝3.6 Hz，H-7），4.17（1H，m，H-6）；一個(gè)烯氫質(zhì)子信號(hào)δ：5.29（1H，t，J＝7.5 Hz，H-8）.13C-NMR（CDCl3，125 MHz）給出了13個(gè)碳信號(hào)，包括一個(gè)酯羰基碳信號(hào)δ：169.4（C-1）；四個(gè)烯碳信號(hào)δ：154.1（C-3），148.5（C-3a），124.2（C-7a），113.6（C-8）；兩個(gè)連有氧原子的次甲基碳信號(hào)δ：73.8（C-7），67.8（C-6）；一 個(gè) 甲 氧 基 碳 信 號(hào) δ：58.7（－OCH3）；四個(gè)亞甲基碳信號(hào)δ：28.0（C-9），24.4（C-5），22.3（C-10），17.2（C-4）；一個(gè)甲基碳信號(hào)：δ：13.8（C-11）.通過(guò) HSQC譜對(duì)該化合物的碳?xì)鋽?shù)據(jù)進(jìn)行了準(zhǔn)確的歸屬（表1）.發(fā)現(xiàn)除多出一個(gè)甲氧基信號(hào)，以及6位和7位的碳?xì)湫盘?hào)出現(xiàn)差異外，該化合物的NMR數(shù)據(jù)與senkyunolide I（2）的數(shù)據(jù)十分相近.通過(guò)HMBC譜，最終確定甲氧基位于C－7位，并且通過(guò)NOESY譜確定C-6位羥基與C-7位甲氧基處于反式（見(jiàn)圖1）.經(jīng)查閱文獻(xiàn)，該化合物為一個(gè)新的苯酞類(lèi)化合物，命名為Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯.

表1 化合物Ⅲ 的1 H NMR和13 C NMR數(shù)據(jù)Table 1 1 H NMR and 13 C NMR data of compoundⅢ（CDCl3，J in Hz）

圖1 化合物Ⅲ的HMBC和NOESY相關(guān)Fig.1 The Key correlations in HMBC and NOESY spectra of compoundⅢ

化合物Ⅳ 淺黃色油狀物.EI-MS（m／z）：190［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.96（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.50（2 H，sext，H-10），2.38（2H，q，H-9），2.47（2 H，m，H-5），2.61（2H，m，H-4），5.24（1H，t，J＝8.0 Hz，H-8），6.01（1H，m，H-6），6.28（1H，dt，J＝2.0，9.7 Hz，H-7）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：167.6（C-1），148.5（C-3a），147.1（C-3），129.9（C-6），123.9（C-7a），117.0（C-7），112.9（C-8），28.1（C-9），22.4（C-10），18.5（C-4），13.7（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道基本一致，鑒定化合物為Z-藁本內(nèi)酯.

化合物Ⅴ 淺黃色油狀物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.96（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.51（2H，sext，H-10），1.91，2.10（2H，m，H-5），2.32（2 H，q，H-9），2.73（2H，m，H-4），3.97（1H，m，H-6），4.48（1H，J＝5.3Hz，H-7），5.77（1 H，t，J＝8.6 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.0（C-1），151.5（C-3），147.6（C-3a），128.2（C-7a），118.2（C-8），71.0（C-6），67.6（C-7），27.9（C-9），26.7（C-5），23.0 （C-10），22.5（C-4），13.6（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報(bào)道基本一致，鑒定化合物為E-6，7-反式－二羥基藁本內(nèi)酯.

化合物Ⅵ 灰白色粉末.EI-MS（m／z）：194［M］＋；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：3.82（3 H，s，－OCH3），6.38（1 H，d，J＝15.9 Hz，H-8），6.80（1H，d，J＝8 Hz，H-6），7.08（1H，dd，J＝8.5 Hz，H-5），7.28（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2），7.49（1H，d，J＝16 Hz，H-7），10.35（1H，brs，Ar-OH）；13CNMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：168.2（C-9），149.1（C-4），148.0（C-3），144.4（C-7），125.9（C-1），122.8（C-6），115.9（C-8），115.6（C-5），111.2（C-2），55.7（OCH3）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道基本一致，鑒定化合物為阿魏酸.

化合物Ⅶ 棕黃色油狀物.EI-MS（m／z）：260［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.90（3H，t，J＝7.0 Hz，H-17），1.29（8 H，m，H-13～H-16），1.38（2H，m，H-12），2.10（2H，m，H-11），4.94（1H，brd，J＝5.3 Hz，H-3），5.20（1 H，d，J＝8.3 Hz，H-8），5.25（1H，m，H-1a），5.49（1H，m，H-1b），5.52（1 H，m，H-10），5.60（1H，m，H-9），5.94（1H，d，J＝1.6 Hz，H-2）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：135.8（C-2），134.4（C-10），127.6（C-9），117.2（C-1），79.8（C-4），78.3（C-7），70.1（C-5），68.6（C-6），63.3（C-3），58.4（C-8），31.7（C-11），29.2（C-12），29.1（C-13），29.0（C-14），27.6（C-15），22.6（C-16），14.0（C-17）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報(bào)道基本一致，鑒定化合物為falcarindiol.

4 結(jié) 論

以當(dāng)歸為研究對(duì)象，采用加熱回流、溶劑萃取法得到90%乙醇提取物.提取液經(jīng)D101大孔吸附樹(shù)脂、硅膠柱層析粗分，將得到的各部分進(jìn)行高效制備液相色譜純化，得到化合物單體.共分離得到7個(gè)化合物單體，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定了其結(jié)構(gòu)，其中Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯（Ⅲ）為一新的苯酞類(lèi)化合物.

［1］LIN Long-ze，HE Xian-guo，LIAN Li-zhi，et al.Liquid chromatographic-electrospray mass spectrometric study of the phthalides ofAngelicasinensisand chemical changes of Z-ligustilide［J］.J Chromatogr A，1998，810：71-79.

［2］黃偉暉，宋純清.當(dāng)歸的化學(xué)和藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］.中國(guó)中藥雜志，2001，26（3）：83-85

［3］鐘小明，陳旭東，余鴻.當(dāng)歸藥理作用的研究進(jìn)展［J］.四川解剖學(xué)雜志，2007，15：45-51

［4］LU Xin-hua，ZHANG Jin-juan，LIANG Hong，et al.Chemical constituents ofAngelicasinensis［J］.J Chin Pharm Scien，2004，13（1）：1-3.

［5］TAKASHI N，YUKINOBU I，MINORU O，et al.Two phthalides fromLigusticumChuanxiong［J］.Phytochem，1996，41（1）：233-236.

［6］KAOUADJI M，PACHTERE F D，POUGET C，et al.Three additional phthaide derivatives，an epoxymonomer and two dimmers，fromLigusticumwallichiirhizomes［J］.J Nat Prod，1986，49（5）：872-877.

［7］路新華，梁鴻，趙玉英.當(dāng)歸中藁苯內(nèi)酯類(lèi)化合物的分離與結(jié)構(gòu)鑒定［J］.中國(guó)中藥雜志，2003，28（5）：423-425.

［8］ZHENG Guang-rong，LU Wei，CAI Jun-chao.Stereoselective total synthesis of（3R，8S）-falcarindiol，a commom polyacetylenic compound from umbellifers［J］.J Nat Prod，1999，62：626-628.

A new phthalide derivatives from Angelica sinensis

CHEN Yuan-yi1，LI Xing-nuo1，ZHANG Cui-ping1，GE Zhi-wei2，YAN Ji-zhong1
（College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University of Technology，Hangzhou 310032，China；2.College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University，Hangzhou 310058，China）

Chemical constituents from the roots and stem ofAngelicasinensiswere isolated and purified with D101 macroporous resin，column chromatography on silica gel and preparative HPLC.Seven compounds were identified as senkyunolide H （Ⅰ），senkyunolide I（Ⅱ），Z-6-hydroxyl-7-methoxyligustilide（Ⅲ），Z-ligustilide（Ⅳ），E-6，7-trans-dihydroxyligustilide（Ⅴ），ferulic acid（Ⅵ），F(xiàn)alcarindiol（Ⅶ）by physical and chemical properties and spectroscopic analysis spectra.Among them，compoundⅢ was a new phthalide derivative.

Angelicasinensis；Z-6-hydroxyl-7-methoxyligustilide；phthalides

R284.1

A

1006-4303（2011）05-0524-04

2010-04-08

國(guó)家重大科技專(zhuān)項(xiàng)基金資助項(xiàng)目（2009ZX09313-036）

陳鴛誼（1985—），女，浙江臺(tái)州人，碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴幪崛∨c分離，E-mail：chenyuanyi1985＠126.com.通信作者：顏繼忠教授，E-mail：yjz＠zjut.edu.cn.

（

劉 巖）