王 濤 辛世杰 喬衛(wèi)花 劉 霞 奧巖松*

（1上海多利農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，上海 201311；2上海交通大學(xué)，上海 200240）

許多園藝植物、大田經(jīng)濟(jì)作物和中草藥都存在不同程度的連作障礙（Dobermann et al.，2000；Alvey et al.，2001；賀麗娜 等，2008；王磊 等，2009；張重義和林文雄，2009）。黃瓜（Cucumis sativusL.）是人們最為喜愛的蔬菜之一，也是調(diào)整我國城鄉(xiāng)種植業(yè)結(jié)構(gòu)中發(fā)展較快的經(jīng)濟(jì)作物。近年來，由于受到耕地面積、種植習(xí)慣、耕地政策以及設(shè)施栽培等因素的影響，黃瓜連作現(xiàn)象越來越嚴(yán)重，導(dǎo)致黃瓜植株發(fā)育遲緩、瓜秧細(xì)弱、蔓稍不展、果實(shí)小、品質(zhì)差，嚴(yán)重時(shí)植株死亡甚至絕收，枯萎病、立枯病等病害大面積發(fā)生，已成為制約黃瓜優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的主要障礙。因此，探索黃瓜連作障礙的克服途徑及其機(jī)理有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。微生物肥料是經(jīng)過特殊工藝制成的含有活菌并用于植物的生物制劑或活菌制劑，具有增加土壤肥力、增強(qiáng)植物對養(yǎng)分的吸收、提高作物的抗病能力等多種功能（楊玉新 等，2008）。以往人們對于連作障礙的研究主要集中在致病機(jī)理、病原菌鑒定及常規(guī)防治方面（吳鳳芝 等，2000；馬云華 等，2005；張璐 等，2007；吳煥濤 等，2008；王玉彥 等，2009），而關(guān)于微生物菌劑在克服連作障礙方面的研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)運(yùn)用盆栽法研究了幾種不同微生物菌劑對連作黃瓜生長及土壤理化性質(zhì)的影響，以期為微生態(tài)制劑的應(yīng)用及黃瓜連作障礙的克服提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)在上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院試驗(yàn)農(nóng)場溫室（RICHEL，法國）內(nèi)進(jìn)行，溫度28 ℃/20 ℃（晝/夜）、相對濕度（70±5）%，自然光照。

供試品種：春秋旱黃瓜，四川省綿陽市南峰蔬菜研究所生產(chǎn)。

供試土壤：試驗(yàn)所用土壤取自上海市奉賢區(qū)南橋鎮(zhèn)楊王村蔬菜生產(chǎn)基地。該基地種植用棚為長60 m、寬7 m、高2 m的竹架拱棚，棚內(nèi)土壤為已種植過5茬黃瓜的連作灰潮土。2009年4月15日分別在多個(gè)拱棚多點(diǎn)采取0～20 cm耕層土樣，用編織袋裝好帶回農(nóng)場溫室。土壤基本理化性質(zhì)：有機(jī)質(zhì)含量1.75%，堿解氮83.05 mg·kg-1，速效磷61.25 mg·kg-1，速效鉀242.43 mg·kg-1，pH 7.87，EC 1.86 mS·cm-1，容重 1.61 g·cm-3。

供試試劑：試驗(yàn)所用微生物制劑為上海創(chuàng)博生態(tài)工程有限公司提供的連茬王、護(hù)根寶，北京華夏康源科技有限公司提供的金寶貝及上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院提供的多功能木霉菌肥4種生物菌劑，均為定型產(chǎn)品。產(chǎn)品參數(shù)見表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用盆栽方式，完全隨機(jī)排列。試驗(yàn)前，為增加土壤肥力，以N∶P2O5∶K2O=0.2∶0.2∶0.2 g·kg-1土用量向土壤中施入復(fù)合肥及少量有機(jī)肥，并充分混勻。2009年5月10日將充分混勻的黃瓜連作土壤裝入盆（25 cm×18 cm）中，每盆裝土3.0 kg。試驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理，即連茬王7 g·株-1、多功能木霉菌肥6 g·株-1、金寶貝5 g·株-1、護(hù)根寶5 g·株-1（劑量參考產(chǎn)品說明），分別表示為L、M、J、H，以不添加菌肥為對照（CK）。每處理3盆，3次重復(fù)，即每處理9盆。5月12日，將事先備好的微生物菌劑按量施入定植穴中，并與周圍松土充分混勻，每盆定植事先育好的整齊一致、無病蟲害的黃瓜壯苗 1株。黃瓜生長期保持盆內(nèi)土壤含水量在 60%～80%，其他管理按黃瓜盆栽常規(guī)管理方法進(jìn)行，各處理間管理水平一致。

表1 4種微生物菌肥主要參數(shù)

1.3 測定指標(biāo)

1.3.1 生長指標(biāo)及生理指標(biāo) 于定植后40 d從各處理隨機(jī)選取黃瓜植株5株，測定其株高、葉片數(shù)、葉面積、葉干質(zhì)量、植株總干質(zhì)量等生長指標(biāo)及葉綠素、根系活力等生理指標(biāo)。株高采用直尺測量，葉片數(shù)采用計(jì)數(shù)法，葉面積采用葉面積儀測定法，葉干質(zhì)量和總干質(zhì)量采用烘干稱重法。葉綠素、類胡蘿卜素含量采用丙酮乙醇混合液提取法（張憲政，1992）測定，各處理葉片均為第8節(jié)位的成熟葉片；根系活力采用TTC比色法（李合生 等，2000）測定。

1.3.2 土壤理化性狀指標(biāo)（劉肅和李酉開，1995；魯如坤，2000） 土壤容重采用環(huán)刀法測定；孔隙度采用計(jì)算法，即孔隙度（%）=（1-容重/比重）×100；有機(jī)質(zhì)含量采用重鉻酸鉀容量-稀釋熱法測定；堿解氮含量采用堿解擴(kuò)散法測定；有效磷含量采用M3-鉬銻抗比色法測定；有效K、Ca、Na、Mg含量采用M3-原子吸收分光光度計(jì)法測定；pH、電導(dǎo)度（EC）采用土∶水=1M∶5M浸提，用pH計(jì)和電導(dǎo)儀測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，用SigmaPlot 9.0軟件作圖

2 結(jié)果與分析

2.1 微生物菌肥對連作黃瓜生長指標(biāo)的影響

由表 2可以看出，除根冠比外，4種微生物菌肥處理下連作黃瓜的株高、葉片數(shù)、葉干質(zhì)量、植株總干質(zhì)量及葉面積指數(shù)均較對照顯著增加，說明施用微生物菌肥能夠有效抑制連作對黃瓜生長的影響?？傮w來看，各菌肥對連作黃瓜生長指標(biāo)的影響效果依次為：護(hù)根寶＞多功能木霉菌肥＞連茬王＞金寶貝。護(hù)根寶處理的黃瓜株高、葉片數(shù)、葉干質(zhì)量、植株總干質(zhì)量及葉面積指數(shù)分別比對照增加54.8%、40.0%、96.0%、94.9%、73.2%。其中，就葉干質(zhì)量、植株總干質(zhì)量及葉面積指數(shù)而言，護(hù)根寶的處理效果顯著好于其他 3種菌肥。據(jù)報(bào)道，連作土壤由于同一類根系分泌物的持續(xù)釋放，形成了特定的土壤環(huán)境和根際條件，導(dǎo)致土壤微生物種類和數(shù)量發(fā)生變化，病原菌積累（唐詠 等，1999），微生物菌肥可有效緩解黃瓜連作障礙，可能是因?yàn)榫手械墓δ芫谧魑锔蹈浇焖俜敝?，形成?yōu)勢菌群，與病原微生物形成競爭性拮抗作用，從而阻擋了病原微生物對作物的侵害。

表2 微生物菌肥對連作黃瓜生長指標(biāo)的影響

2.2 微生物菌肥對連作黃瓜葉片色素含量及根系活力的影響

光合作用是植物生長的重要能量來源和物質(zhì)基礎(chǔ)，葉片中葉綠素含量是反映植物光合能力和豐產(chǎn)性能的生理指標(biāo)之一。根系活力是一種客觀地反映根系生命活動的生理指標(biāo)，其強(qiáng)度高低可在一定程度上反映植株的生長能力。由表3可以看出，除金寶貝外，其他3種微生物菌肥處理均能顯著提高連作黃瓜葉片葉綠素a、類胡蘿卜素及總?cè)~綠素含量。其中，連茬王的處理效果最好，其次為護(hù)根寶，再次為多功能木霉菌肥，3種菌肥處理的黃瓜葉片葉綠素a含量分別較對照提高22.1%、18.3%、17.8%，葉綠素b含量分別較對照提高62.8%、44.2%、24.4%，類胡蘿卜素含量分別較對照提高28.0%、25.3%、22.7%。連茬王、護(hù)根寶處理下黃瓜葉片葉綠素a/b值均顯著低于對照，說明其主要提高了黃瓜葉片中葉綠素b的含量。由表3還可以看出，護(hù)根寶、多功能木霉菌肥、連茬王、金寶貝處理下黃瓜的根系活力分別比對照提高47.6%、45.2%、28.5%、24.0%，差異均達(dá)顯著水平。

表3 微生物菌肥對連作黃瓜葉片色素含量及根系活力的影響

2.3 微生物菌肥對黃瓜連作土壤理化性狀的影響

土壤容重和土壤孔隙度是土壤物理性狀的重要組成部分，關(guān)系著土壤水、氣、熱的流通與貯存（Mari et al.，2008）。由圖1可以看出，4種微生物菌肥處理中，只有多功能木霉菌肥處理顯著降低了連作黃瓜土壤容重，降低幅度為9.9%；提高了土壤孔隙度，提高幅度為10.3%，說明多功能木霉菌肥對改善黃瓜連作土壤物理性狀具有重要作用，這可能與多功能木霉菌肥為顆粒狀及其能夠促進(jìn)黃瓜根系生長有關(guān)。

土壤有機(jī)質(zhì)是土壤肥力的重要指標(biāo)。由表4可知，各微生物菌肥處理均顯著提高了黃瓜連作土壤的有機(jī)質(zhì)含量和pH值，其中有機(jī)質(zhì)含量以連茬王處理增幅最高，為16.5%；pH值以多功能木霉菌肥處理增幅最高，為4.3%，這可能與微生物菌肥能夠促進(jìn)土壤中植物殘?bào)w等有機(jī)物的腐殖化過程有關(guān)，同時(shí)說明施用菌肥能夠有效防止設(shè)施黃瓜長期連作導(dǎo)致的土壤酸化。各菌肥處理對連作土壤電導(dǎo)度（EC）的影響無明顯規(guī)律。除金寶貝對黃瓜連作土壤中有效磷含量的影響不顯著外，其余各菌肥處理均顯著提高了黃瓜連作土壤中堿解氮、有效磷和有效鉀含量，其中多功能木霉菌肥處理效果最好，有效氮、磷、鉀含量分別比對照提高21.5%、14.1%、14.8%。各菌肥處理對黃瓜連作土壤中有效鈣、鎂、鈉含量的影響無明顯規(guī)律。從各微生物菌肥對黃瓜連作土壤化學(xué)性狀的總體改良效果來看，依次為多功能木霉菌肥＞護(hù)根寶＞連茬王＞金寶貝。

圖1 微生物菌肥對黃瓜連作土壤容重及孔隙度的影響

表4 微生物菌肥對黃瓜連作土壤化學(xué)性狀的影響

3 討論

許多作物普遍存在連作障礙現(xiàn)象，但是引起連作障礙的原因尚未完全清楚。原因之一可能是連作致使土壤微生物區(qū)系發(fā)生了變化，有益微生物減少，有害微生物增多，土壤病害蔓延（吳鳳芝 等，2002）。本試驗(yàn)通過微生物菌肥處理黃瓜連作土壤，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其能夠明顯改善連作黃瓜地上部的生長并改善連作土壤理化性狀，說明其對黃瓜連作障礙具有明顯的抑制作用。經(jīng)過微生物菌肥處理后，黃瓜植株的長勢明顯好于對照，葉綠素含量、根系活力、土壤pH值及土壤有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、有效鉀含量明顯高于對照，原因可能是微生物菌肥中含有大量功能菌，功能菌的迅速繁殖優(yōu)化了土壤微生物種群結(jié)構(gòu)，活化了土壤酶活性，從而加快土壤中有機(jī)物質(zhì)的分解，促進(jìn)土壤中固定養(yǎng)分向有效養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化，進(jìn)而促進(jìn)植株根系及地上部的生長。同時(shí)，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同微生物菌肥對黃瓜植株不同生長及生理指標(biāo)、不同土壤理化指標(biāo)的影響存在差異，這可能與不同微生物菌肥含有不同的功能菌有關(guān)，建議在實(shí)際應(yīng)用中將這 4種微生物菌肥組合施用，也許會收到更好的效果。

4 結(jié)論

4種微生物菌肥均能顯著促進(jìn)連作黃瓜植株生長，其中以護(hù)根寶處理效果最好。

除金寶貝外，其余3種微生物菌肥均能顯著增加連作黃瓜葉片總?cè)~綠素及類胡蘿卜素含量，其中以連茬王處理效果最好。

4種微生物菌肥均能顯著提高連作黃瓜根系活力、土壤有機(jī)質(zhì)含量及pH值，增加土壤堿解氮及有效鉀含量，其中以多功能木霉菌肥處理效果最佳。

綜合來看，4種微生物菌肥對黃瓜連作障礙的克服效果依次為：多功能木霉菌肥＞護(hù)根寶＞連茬王＞金寶貝。

賀麗娜，梁銀麗，高靜，熊亞梅，周茂娟，韋澤秀．2008．連作對設(shè)施黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)及土壤酶活性的影響．西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，36（5）：155-159．

李合生，孫群，趙世杰，章文華．2000．植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)．北京：高等教育出版社．

劉肅，李酉開．1995．Mehlich 3通用浸提劑的研究．土壤學(xué)報(bào)，32（2）：132-141．

魯如坤．2000．土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法．北京：中國農(nóng)業(yè)科技出版社．

馬云華，王秀峰，魏珉，亓延鳳，李天來．2005．黃瓜連作土壤酚酸類物質(zhì)積累對土壤微生物和酶活性的影響．應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，16（11）：2149-2153．

唐詠，梁成華，劉志恒．1999．日光溫室蔬菜栽培對土壤微生物和酶活性的影響．沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，30（1）：16-19．

王磊，王蘭英，朱朝華，李娟．2009．玉米連作對其發(fā)芽率和苗期生長的影響．東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，37（2）：53-55．

王玉彥，吳鳳芝，周新剛．2009．不同間作模式對設(shè)施黃瓜生長及土壤環(huán)境的影響．中國蔬菜，（16）：8-13．

吳鳳芝，趙鳳艷，谷思玉．2002．保護(hù)地黃瓜連作對土壤生物化學(xué)性質(zhì)的影響．農(nóng)業(yè)系統(tǒng)科學(xué)與綜合研究，18（1）：20-22．

吳鳳芝，趙鳳艷，劉元英．2000．設(shè)施蔬菜連作障礙原因綜合分析與防治措施．東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，31（3）：241-247．

吳煥濤，魏珉，楊鳳娟，王秀峰．2008．輪作和休茬對日光溫室黃瓜連作土壤的改良效果．山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，（5）：59-63．

楊玉新，王純立，謝志剛，王曉紅．2008．微生物肥對土壤微生物種群數(shù)量的影響．新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，45（s1）：169-171．

張重義，林文雄．2009．藥用植物的化感自毒作用與連作障礙．中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，17（1）：189-196．

張璐，杜秉海，魏珉，丁延芹，王秀峰．2007．黃瓜枯萎病拮抗菌的生防效果及其對植株生長代謝的影響．山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，（4）：89-92．

張憲政．1992．作物生理研究法．北京：農(nóng)業(yè)出版社：142．

Alvey S，Bagayoko M，Neumann G，Buerkert A．2001．Cereal/legume rotations affect chemical properties and biological activities in two West African soils．Plant and Soil，231：45-54．

Dobermann A，Dawe D，Roetter R P，Cassman kg．2000．Reversal of rice yield decline in a long-term continuous cropping experiment．Journal of Agronomy（Soil fertility），92：633-643．

Mari G R，Ji C Y，Zhou J．2008．Effects of soil compaction on soil physical properties and nitrogen，phosphorus，potassinm uptake in wheat plants．Transactions of the CSAE，24（1）：74-79．