陳世佳
糖尿病(DM)是一種復(fù)雜的代謝性疾病,由胰島素分泌不足和(或)胰島素作用低下而導(dǎo)致糖、脂肪和蛋白質(zhì)等代謝紊亂[1]。臨床以高血糖為主要標(biāo)志,久病可引起多系統(tǒng)損害。病情嚴(yán)重或應(yīng)激時(shí)可發(fā)生多種急性代謝性紊亂[2]。糖尿病的檢驗(yàn)指標(biāo)有:血糖、尿糖、糖化蛋白、血糖調(diào)節(jié)激素和胰島組織抗體等[1]糖尿病的診斷主要依賴(lài)血糖濃度[1],主要包括空腹血糖或隨機(jī)血糖、口服糖耐量試驗(yàn)的餐后2 h血糖濃度等[2],臨床上首先推薦空腹血糖測(cè)定,因?yàn)槎鄶?shù)糖尿病患者會(huì)出現(xiàn)空腹血糖水平增加。若空腹血糖<5.6 mmol/L或隨機(jī)血糖<7.8 mmol/L足可排除糖尿病的診斷。雖然OGTT比空腹血糖測(cè)定更靈敏,但是有很多因素可影響OGTT的準(zhǔn)確性,除非第一次OGTT結(jié)果異常,一般建議在做每一次OGTT檢測(cè)后,間隔一定時(shí)間再做OGTT檢測(cè),判斷OGTT是否異常[3]。由于口服糖耐量試驗(yàn)的檢測(cè)過(guò)程較復(fù)雜,幾小時(shí)內(nèi)多次采血也可能會(huì)給患者導(dǎo)成心理負(fù)擔(dān)。我院開(kāi)展糖尿病檢驗(yàn)項(xiàng)目中的空腹血糖和糖化血清蛋白測(cè)定能夠快速、準(zhǔn)確的獲得檢測(cè)結(jié)果,我們用日立7020型全自動(dòng)生化分析儀同時(shí)檢測(cè)45例糖尿病患者和31例健康體檢者的空腹血糖和糖化血清蛋白水平,比較糖尿病患者和健康體檢者之間空腹血糖和糖化血清蛋白的水平是否有差異,旨在探討聯(lián)合測(cè)定空腹血糖和糖化血清蛋白在糖尿病診斷中的臨床意義。
1.1 檢測(cè)對(duì)象 糖尿病患者為確診的我院2010年1月至2010年12月門(mén)診和住院患者,45例,其中,男33例,女12例,年齡20~86歲,診斷標(biāo)準(zhǔn)采用1999年WHO的標(biāo)準(zhǔn)[4];正常對(duì)照組為來(lái)我院的健康體檢者,31例,其中,男13例,女18例,年齡16~74歲。
1.2 儀器、試劑 日立7020型全自動(dòng)生化分析儀,空腹血糖測(cè)定試劑為日本世諾臨床診斷制品,批號(hào):J918,H915和J916,
45例糖尿病患者與31例健康體檢者的空腹血糖、糖化血清蛋白的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果顯示:糖尿病患者組的空腹血糖測(cè)定結(jié)果大于健康體檢者(正常對(duì)照組),其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);糖尿病患者組的糖化血清蛋白測(cè)定結(jié)果大于健康體檢者(正常對(duì)照組),其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。糖尿病患者的空腹血糖與糖化血清蛋白呈正相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)為r=0.8263。J918;糖化血清蛋白測(cè)定試劑為德國(guó)羅氏試劑,批號(hào):609410-01,616130-01 和622522-01。
1.3 方法
1.3.1 標(biāo)本采集 抽取早上空腹靜脈血,標(biāo)本置37℃水浴25 min左右分離血清,3 h內(nèi)測(cè)定。
1.3.2 測(cè)定方法 用日立7020型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,主要參數(shù)按照試劑說(shuō)明書(shū)設(shè)置。葡萄糖測(cè)定用已糖激酶法,糖化血清蛋白的測(cè)定用NBT Method終點(diǎn)法。
表1 糖尿病患者與健康體檢者(正常對(duì)照組)血糖與糖化血清蛋白測(cè)定結(jié)果
葡萄糖在已糖激酶(hexokinase)和Mg2+存在下與ATP反應(yīng)生成6-磷酸葡萄糖和ADP。生成的6-磷酸葡萄糖在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下使NADPH+還原成為NADPH和H+,6-磷酸葡萄糖氧化成為6-磷酸葡萄糖酸,NADPH在340nm波長(zhǎng)處最大吸收峰,根據(jù)NADPH的生成量與標(biāo)本中葡萄糖含量成正比而定量血糖[2]。血糖的測(cè)定可作為糖尿病的診斷,監(jiān)測(cè)糖尿病和治療效果的最常用指標(biāo)。用于篩查糖尿病和糖尿病前的血糖異常[1],但血糖特別是單項(xiàng)測(cè)定受到的影響因素較多,如患者自身身體狀況、飲食、用藥,抽血時(shí)間等因素及血糖穩(wěn)定性差的影響,造成測(cè)定結(jié)果波動(dòng)[5],在急性感染、外傷等應(yīng)激情況時(shí),高血糖可能是短暫的,不能作為診斷糖尿病的依據(jù)[1]。
糖化血清蛋白測(cè)定是血清葡萄糖能與白蛋白及其他血清蛋白分子N末端的氨基發(fā)生非酶促糖化反應(yīng)開(kāi)成高分子酮胺結(jié)構(gòu),此酮胺結(jié)構(gòu)能在堿性環(huán)境中與硝基四氮唑藍(lán)(NBT)發(fā)生還原反應(yīng)生成甲臜[3],其生成量與糖化血清蛋白濃度成正比。用比色法在540 nm(530~550 nm),以糖化血清蛋白做校準(zhǔn)物測(cè)出反應(yīng)中甲臜生成量從而得出糖化血清蛋白的濃度。GSP是葡萄糖通過(guò)非酶促糖基化反應(yīng)與血漿中蛋白結(jié)合的產(chǎn)物,由于清蛋白是血漿蛋白中最豐富的成分,故認(rèn)為測(cè)定GSP主要是測(cè)定糖化血清蛋白。因?yàn)榍宓鞍装胨テ趦H約20 d,所以GSP的濃度可反映近2~3周的平均血糖濃度,可監(jiān)測(cè)血糖水平的短期變化,尤其適合GDM或治療方法改變后的患者監(jiān)測(cè)。在有效治療1周左右就能檢測(cè)到GSP降低[1],不受臨時(shí)血糖濃度波動(dòng)的影響[3]。但當(dāng)清蛋白濃度和半衰期發(fā)生明顯變化時(shí),會(huì)對(duì)GSP產(chǎn)生很大影響。
糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)是:①癥狀+隨機(jī)血糖≥11.1 mmol/L(200 mg/dl),隨機(jī)是指1 d內(nèi)任何時(shí)間,不管上次用餐時(shí)間。②空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L(126 mg/dl)。③ OGTT中2 h 血糖(2 hPG)≥ 11.1 mmol/L(200 mg/dl);以上1、2、3、三種方法都可以單獨(dú)診斷糖尿病,任何一種出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果必須再用其他1種復(fù)查才能確診[1]。有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo):國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)成員組成的專(zhuān)家級(jí)建議將HbA1c作為診斷糖尿病的方法之一,將HbA1c≥6.5%作為篩查與診斷糖尿病的標(biāo)準(zhǔn),其與血糖聯(lián)合使用可以提高糖尿病診斷敏感性[6]。
本研究用日立7020型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血糖和糖化血清蛋白,可以快速、準(zhǔn)確的得到檢驗(yàn)結(jié)果,我們所檢測(cè)的45例糖尿病患者和31例健康體檢者所得結(jié)果分析,糖尿病患者的血糖和糖化血清蛋白測(cè)定結(jié)果大于健康體檢者,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);糖尿病患者空腹血糖與糖化血清蛋白呈正相關(guān)關(guān)系,其相關(guān)系數(shù)為0.8263;糖尿病患者組中有的病例空腹血糖測(cè)定結(jié)果偏高,糖化血清蛋白測(cè)定結(jié)果不高,其原因可能是空腹血糖只能提供在某個(gè)時(shí)間糖尿病控制的一個(gè)特定點(diǎn)的情況,只代表即時(shí)血糖水平[7],糖化血清蛋白反映的是糖尿病患者過(guò)去2~3周內(nèi)平均血糖控制水平[7]。
本研究的局限性是:只對(duì)糖尿病患者和健康體檢者進(jìn)行了空腹血糖和糖化血清蛋白的測(cè)定,沒(méi)有同時(shí)檢測(cè)糖化血紅蛋白水平。但文獻(xiàn)中已有報(bào)導(dǎo):空腹血糖、糖化血清蛋白、糖化血紅蛋白對(duì)糖尿病的監(jiān)測(cè)意義:聯(lián)合檢測(cè)空腹血糖、糖化血清蛋白、糖化血紅蛋白三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)糖尿病的診斷和預(yù)防有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值[7]。
我們已購(gòu)進(jìn)了波音特生物科技(南京)有限公司的糖化血紅蛋白(HbA1c)檢測(cè)試劑盒(膠乳凝集反應(yīng)法),將用日立7020型全自動(dòng)生化分析儀同時(shí)測(cè)定糖尿病患者的空腹血糖、糖化血清蛋白和糖化血紅蛋白的水平,為臨床提供更有價(jià)值的檢驗(yàn)依據(jù)。
綜上所述:空腹血糖與糖化血清蛋白反映的是不同時(shí)期的血糖水平,聯(lián)合測(cè)定空腹血糖、糖化血清蛋白克服了單個(gè)指標(biāo)的局限性,對(duì)糖尿病的診斷有著較好的臨床價(jià)值。
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