李玲，田寧，付勝楠，宋瑋娟，游秀華，吳傳斌，胡海燕（中山大學(xué)藥學(xué)院藥劑學(xué)與制藥工程實(shí)驗(yàn)室/廣東省創(chuàng)新藥物制劑工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心，廣州市 510006）

卡馬西平（Carbamazepine，CBZ）應(yīng)用于臨床已有近50年的歷史。目前廣泛用于治療精神病、酒精癖的戒斷綜合征、中樞性尿崩癥、偏頭痛和半側(cè)面肌痙攣等。隨著卡馬西平的廣泛應(yīng)用，特別是大量、合并用藥的出現(xiàn)，其毒副作用也日益受到重視[1，2]。不同廠家的卡馬西平片其內(nèi)在質(zhì)量是否存在差異？如果存在差異，這些差異是否與不良反應(yīng)存在某種相關(guān)性？本文對(duì)市場(chǎng)上流通的9個(gè)不同廠家的卡馬西平片的含量、有關(guān)物質(zhì)及溶出度進(jìn)行了比較研究，擬探討卡馬西平片臨床不良反應(yīng)的差異是否與其內(nèi)在質(zhì)量差異有關(guān)。

1 儀器與試藥

1200型高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司，可編程紫外檢測(cè)器）；RCZ-8M溶出試驗(yàn)儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；RCQ-8C溶出儀自動(dòng)取樣器（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；紫外分光光度計(jì)（TU-1901雙光束，北京普析通用）。

卡馬西平對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：0142-9503）；卡馬西平片A（某合資藥廠，批號(hào)：X0454）；卡馬西平B（產(chǎn)地上海，批號(hào)：091014）；卡馬西平C（產(chǎn)地上海，批號(hào)：1004017）；卡馬西平D（產(chǎn)地廣東，批號(hào)：100601）；卡馬西平E（產(chǎn)地江蘇，批號(hào)：1006131）；卡馬西平F（產(chǎn)地重慶，批號(hào)：100401）；卡馬西平G（產(chǎn)地江蘇，批號(hào)：100721）；卡馬西平H-1（產(chǎn)地江蘇，批號(hào)：20100610）；卡馬西平H-2（廠家同H-1，批號(hào)：20080901）；卡馬西平I（產(chǎn)地上海，批號(hào)：100308）；四氫呋喃、甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。

2 方法[3]與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：phenomenex CN柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-四氫呋喃-水（120∶30∶850），其中每1 000 mL中加0.2 mL甲酸和0.5 mL三乙胺；流速：1.5 mL·min－1；檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器；波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣量：20 μL；柱溫：40 ℃。

2.2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

精密稱取卡馬西平對(duì)照品50 mg，置于50 mL容量瓶中，用甲醇-水（1∶1）稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取20 μL注入液相色譜儀。理論板數(shù)為6 000，卡馬西平峰與10，11-二氫卡馬西平峰分離度為1.70。

2.3 含量測(cè)定

取不同廠家卡馬西平片20片，精密稱定，研細(xì)后精密稱量適量（約相當(dāng)于卡馬西平50 mg），置于50 mL容量瓶中，加甲醇約25 mL使卡馬西平溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 mL，置于25 mL容量瓶中，用甲醇-水（1∶1）稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱量卡馬西平對(duì)照品20 mg，置100 mL容量瓶中，甲醇-水（1∶1）稀釋至刻度，即得0.2 mg·mL－1對(duì)照品溶液。按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量。

不同廠家的卡馬西平片含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，9個(gè)廠家的卡馬西平片含量最低94.5%，最高106.1%，均落在標(biāo)示量的90%～110%之間，均符合規(guī)定。但不同廠家間含量差別仍較明顯。

2.4 有關(guān)物質(zhì)

取不同廠家卡馬西平片20片，精密稱定，研細(xì)后精密稱量適量（約相當(dāng)于卡馬西平50 mg），置于50 mL容量瓶中，加甲醇約25 mL使卡馬西平溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。取濾液20 μL，照“2.1”項(xiàng)下色譜條件，注入液相色譜儀，雜質(zhì)1～9的保留時(shí)間分別為 8.69、10.82、16.66、26.46、30.38、35.08、37.05、42.59、57.37 min，色譜見(jiàn)圖1；有關(guān)物質(zhì)含量見(jiàn)表2。

表1 含量測(cè)定結(jié)果Tab 1 Results of the content determination

圖1 不同廠家卡馬西平片有關(guān)物質(zhì)HPLC圖Fig 1 HPLC chromatograms of related substances in various Carbamazepine tablets

由圖1和表2可知，合資藥廠A與其他8個(gè)廠家的卡馬西平片有關(guān)物質(zhì)差異較大。合資藥廠A的卡馬西平片主要存在編號(hào)為1、2、4、5的主要雜質(zhì)，而除合資藥廠A外的8個(gè)廠家，普遍存在編號(hào)為6、7、8、9的雜質(zhì)，具有截然不同的雜質(zhì)譜。其中，合資藥廠A的雜質(zhì)總量明顯少于其他廠家，為9個(gè)廠家中最低，用面積歸一法計(jì)算，僅為0.04%。9個(gè)廠家中雜質(zhì)總量最多的達(dá)到約0.35%（廠家C、廠家D）。據(jù)參考文獻(xiàn)推測(cè)，雜質(zhì)3可能為10，11-二氫卡馬西平，雜質(zhì)9可能為合成卡馬西平的中間體亞氨基二芐[4]。

表2 不同廠家卡馬西平片有關(guān)物質(zhì)的含量（%%）Tab 2 Contents of related substances of various Carbamazepine tablet（s%%）

2.5 溶出度

以鹽酸24 mL加水至1 000 mL為溶出介質(zhì)，采用漿法，轉(zhuǎn)速為150 rmp·min－1，溫度為（37.0±0.5）℃，分別于0.5、1.0 h取溶出液適量，用0.8 μm微孔濾膜過(guò)濾，濾液用溶出介質(zhì)稀釋成每1 mL中含卡馬西平6～15 μg的溶液，在285 nm處測(cè)定吸光度，按C15H12N2O的吸收系數(shù)為518計(jì)算每片的溶出度。

不同廠家卡馬西平片的累積百分溶出度如圖2所示。結(jié)果顯示，不同廠家的卡馬西平片在1 h的累積溶出百分率均達(dá)到65%以上，均符合2010年版《中國(guó)藥典》（二部）要求。但將8個(gè)廠家的卡馬西平片0.5、1.0 h的累積溶出百分率與合資藥廠A進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)均存在顯著性差異（P＜0.01）。合資藥廠A生產(chǎn)的卡馬西平片體外溶出較慢，0.5 h溶出度不到60%，1.0 h溶出僅72%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。而8個(gè)國(guó)內(nèi)廠家的卡馬西平0.5 h平均溶出度均達(dá)到80%以上，1.0 h平均溶出90%以上。

圖2 不同廠家卡馬西平片0.5、1.0 h累積溶出度（%%，n＝6）Fig 2 Accumulative dissolution rates of various Carbamazepine tablets in 0.5 and 1.0 （h%%，n＝6）

另外，國(guó)內(nèi)廠家H的不同批號(hào)（H-1和H-2，生產(chǎn)日期分別為2008年和2010年）在含量、溶出和有關(guān)物質(zhì)方面均有很好的一致性。

3 討論

筆者對(duì)9個(gè)廠家的卡馬西平片進(jìn)行了含量、有關(guān)物質(zhì)和溶出度比較分析，發(fā)現(xiàn)合資藥廠A與其他8個(gè)國(guó)內(nèi)廠家的卡馬西平片在有關(guān)物質(zhì)和體外溶出兩方面存在顯著差異。

合資藥廠A的卡馬西平片主要存在編號(hào)為1、2、4、5的主要雜質(zhì)，而其余的8個(gè)國(guó)內(nèi)廠家，普遍存在編號(hào)為6、7、8、9的雜質(zhì)，具有截然不同的雜質(zhì)譜。

溶出結(jié)果表明，合資藥廠A的卡馬西平片的體外溶出是9個(gè)廠家中最慢的?；魡浀萚6]曾對(duì)6個(gè)不同廠家卡馬西平片進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)，并測(cè)定了包括某合資藥廠在內(nèi)的3個(gè)廠家的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，3個(gè)廠家的藥-時(shí)曲線下面積相似，而合資藥廠A的卡馬西平片有較小吸收速率常數(shù)（Ka）和最高血藥濃度（Cmax），較長(zhǎng)的最高血藥濃度時(shí)間（Tmax），國(guó)內(nèi)廠家與其存在差異。此結(jié)果似乎可以用溶出試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行解釋：與8個(gè)國(guó)內(nèi)藥廠相比，合資藥廠A的卡馬西平片具有較慢的溶出速度（溶出度較大），導(dǎo)致體內(nèi)經(jīng)胃腸吸收較慢，藥-時(shí)曲線可能較平緩，多次給藥后血藥濃度波動(dòng)小。反映在藥動(dòng)學(xué)參數(shù)上，即Ka和Cmax較小，Tmax延長(zhǎng)。2010年版《中國(guó)藥典》（二部）對(duì)卡馬西平片的溶出只規(guī)定了下限，即1.0 h溶出不低于65%，而卡馬西平的治療窗較窄，卡馬西平片的溶出是否越快越好，該藥典中的標(biāo)準(zhǔn)是否合理，都值得進(jìn)一步研究。

有關(guān)物質(zhì)主要反映原料藥的質(zhì)量，溶出主要反映制劑的質(zhì)量。從本研究結(jié)果可以推測(cè)，合資藥廠A與其他8個(gè)廠家在原料藥和制劑方面均存在顯著差異，這些差異有可能是導(dǎo)致卡馬西平片臨床不良反應(yīng)差異的原因。

筆者對(duì)總雜質(zhì)含量較高的廠家C、廠家D的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行了高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用電噴霧和大氣壓化學(xué)離子源、正負(fù)電離和全掃描模式，有關(guān)物質(zhì)均未出峰。究其原因可能是：雜質(zhì)含量太低，達(dá)不到儀器檢測(cè)限；流動(dòng)相中水的比例較高（85%）不利于霧化；流動(dòng)相中含有四氫呋喃抑制了電離?？R西平片有關(guān)物質(zhì)的定性鑒別還在進(jìn)一步研究中。

[1] 張一力，張山川，陳新民，等.卡馬西平的不良反應(yīng)及臨床應(yīng)用[J].華西醫(yī)學(xué)，2007，22（1）：177.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：126-127.

[4] 王春華，邵新春.高效液相色譜法測(cè)定卡馬西平含量及有關(guān)物質(zhì)[J].藥物分析雜志，2002，22（6）：484.

[5] 崔九虎，張 慧，曾大利，等.不同廠家卡馬西平片溶出度考察[J].海峽藥學(xué)，2009，21（3）：19.

[6] 霍啟錄，胡敏燕，劉世庭，等.卡馬西平片的質(zhì)量分析與體內(nèi)吸收評(píng)價(jià)[J].華西藥學(xué)雜志，2000，15（6）：441.