周 波 張春林 文 敏 焦 玲 (貴陽醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室，貴州 貴陽 550004)

我國帕金森病(PD)患病人數(shù)已超過200萬。目前臨床上對PD的診斷尚無準(zhǔn)確、特異的生物診斷標(biāo)記〔1，2〕。近年來研究發(fā)現(xiàn)α-synuclein的異常聚集與PD密切相關(guān)，以血漿α-synuclein表達水平作為PD診斷的生物標(biāo)記已經(jīng)成為當(dāng)前研究的熱點，但國內(nèi)外研究結(jié)果不盡相同，甚至出現(xiàn)了相反結(jié)果。因此，本研究擬通過對國內(nèi)外公開發(fā)表的以及本課題組尚未發(fā)表的有關(guān)血漿α-synuclein表達水平與PD關(guān)系的研究文獻進行Meta分析，以期綜合評價兩者間的聯(lián)系。

1 資料與方法

1.1 資料來源 分別以“α-synuclein/α-突觸核蛋白”、“parkinson/PD/帕金森”與“blood/plasm/血漿”結(jié)合以“主題、關(guān)鍵詞、主題詞”途徑，聯(lián)合檢索中國生物醫(yī)學(xué)文獻數(shù)據(jù)庫(CMB)和中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(CNKI)獲得全部相關(guān)的中文文獻，運用Endnote檢索Medline、Pubmed等外文數(shù)據(jù)庫，收集1990～2010年國內(nèi)外公開發(fā)表的以及本課題組尚未發(fā)表的有關(guān)人血漿α-synuclein表達水平與PD關(guān)系的研究文獻。

1.2 文獻納入標(biāo)準(zhǔn) ①1990～2010年以前國內(nèi)外發(fā)表的一次文獻及本課題組尚未發(fā)表的數(shù)據(jù);②獨立性研究，目的一致;③各文獻研究對象來源明確，病例診斷明確，病例和對照的例數(shù)明確;④原始數(shù)據(jù)提供了樣本量、均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差;⑤資料收集方法科學(xué)、資料分析方法正確。

1.3 文獻排除標(biāo)準(zhǔn) ①動物實驗;②α-synuclein在血漿外表達。③剔除重復(fù)報告、質(zhì)量差、報道信息太少(未給出α-synuclein均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差)及無法利用的文獻。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 運用RevMan5.0分析軟件進行異質(zhì)性檢驗，如果各研究結(jié)果之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義則用固定效應(yīng)模型，若有則采用隨機效應(yīng)模型，計算合并效應(yīng)指標(biāo)值及95%CI，畫出森林圖，并進行敏感度分析和漏斗分析。

2 結(jié)果

2.1 研究資料基本情況表 共收集到符合納入標(biāo)準(zhǔn)的文獻4篇，累計病例共444人，累計對照共252人。各項研究結(jié)果差異較大，認為PD患者血漿α-synuclein表達水平與正常對照差異有統(tǒng)計學(xué)意義且高于對照的有兩篇(Lee〔3〕和焦玲)。認為PD患者血漿α-synuclein表達水平與正常對照差異有統(tǒng)計學(xué)意義且低于對照的有一篇(Neumayer〔4〕)，認為兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義的有一篇(Min Shi〔5〕)。見表1。

表1 納入Meta分析文獻的基本情況

2.2 資料的異質(zhì)性分析 對納入分析的各研究結(jié)果進行異質(zhì)性檢驗。結(jié)果顯示，χ2=86.47，P ＜ 0.00，I2=97%，因此，認為各獨立研究存在異質(zhì)性，可能與患者年齡、性別、病程等不同有關(guān)，故采用隨機效應(yīng)模型對效應(yīng)指標(biāo)值進行合并統(tǒng)計分析。RevMan軟件繪制森林圖(圖1)，結(jié)果顯示，總體效應(yīng)檢驗Z=0.57，P=0.57，標(biāo)準(zhǔn)化均數(shù)差(S)為0.26，95%CI= －0.64～1.17，在森林圖中，其95%CI橫線與無效豎線相交，提示尚無充分證據(jù)說明血漿α-synuclein表達水平與PD相關(guān)。

2.3 敏感性分析 逐一剔除其中一組數(shù)據(jù)后，再行Meta分析，結(jié)果顯示，合并后95%CI橫線仍與無效豎線相交，與上述結(jié)果一致，說明敏感性低，研究結(jié)果較為穩(wěn)定可信。

圖1 血漿α-synuclein表達水平與PD關(guān)系Meta分析森林圖

2.4 偏倚的評估 圖2，分布呈倒漏斗形，近似對稱，小樣本研究分布在漏斗底部，發(fā)表偏倚較小。

圖2 血漿α-synuclein表達水平與PD關(guān)系Meta分析漏斗圖

3 討論

在篩選文獻過程中發(fā)現(xiàn)，關(guān)于人血漿α-synuclein表達水平與PD關(guān)系國內(nèi)尚無文獻發(fā)表，而國外發(fā)表的文獻中大部分研究并沒有提供均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差等原始數(shù)據(jù)，使得很多研究難以用于分析和驗證，建議今后在病例對照研究的文章中盡可能提供基本的原始數(shù)據(jù)，增加納入分析的文獻數(shù)量，減少偏倚。

本研究利用Meta分析，對人血漿α-synuclein表達水平與PD的關(guān)系做綜合定量評價，通過聯(lián)合使用多種文獻檢索途徑，盡可能全的檢索到相關(guān)文獻，以減少偏倚。對4篇不同研究背景下人血漿α-synuclein表達水平與PD關(guān)系的分析結(jié)果表明，PD組與健康對照組血漿α-synuclein表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義。排除權(quán)重較大或較小的文獻后，Meta分析結(jié)果合并效應(yīng)量變化不大，說明敏感性低，結(jié)果較為穩(wěn)定可信。

Shi等〔5，6〕研究發(fā)現(xiàn)，α-synuclein 廣泛存在于血液的各種成分之中，紅細胞中約占99%，血小板、白細胞和血漿中含量僅占1%，血漿中α-synuclein表達水平易受溶血及血小板污染等因素的影響，因此，檢測血漿中α-synuclein表達水平存在許多不穩(wěn)定因素，這可能是各研究結(jié)果不一致的原因之一。

近年對α-synuclein蛋白纖維化過程的生理物理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，α-synuclein主要以單體、寡聚體和多聚體三種形式存在〔7〕，Wakabayashi等〔8〕進一步研究發(fā)現(xiàn)對神經(jīng)細胞產(chǎn)生毒性作用的主要是可溶性的寡聚體，提示α-synuclein寡聚體可能是帕金森發(fā)病機制的關(guān)鍵。因此，檢測人血漿中α-synuclein寡聚體的表達水平在總α-synuclein中所占比例可能會更有意義〔9〕。本課題組檢測了貴州地區(qū)人血漿中α-synuclein寡聚體的表達水平在總α-synuclein中所占比例，證實了上述推斷。但要將這一結(jié)論推廣，尚需更多的研究數(shù)據(jù)支持。

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