吳曉華，閆金輝，劉冬梅

滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校診斷教研室，河北滄州 061001

目前，我國(guó)的腦血管疾病發(fā)病率較高，每年為185/10萬(wàn)～219/10萬(wàn)，大約每年有200萬(wàn)例新發(fā)病例及150萬(wàn)例死亡病例[1]，而且發(fā)病率表現(xiàn)為逐年上升趨勢(shì)。腦血管病發(fā)生時(shí)，體內(nèi)的氧化及抗氧化系統(tǒng)的平衡狀態(tài)被打破，致使體內(nèi)氧化及抗氧化物質(zhì)濃度發(fā)生改變。而高血壓、高脂血癥、高血糖這“三高”已成為老年患者發(fā)生心腦血管疾病的重要危險(xiǎn)因素。為了進(jìn)一步研究氧化和抗氧化系統(tǒng)在不同腦血管疾病患者體內(nèi)的改變，本課題小組對(duì)“三高”患者及曾具有“三高”且發(fā)生了腦出血及腦梗死的患者共125例、健康人18例，共143例人員的血清SOD和MDA濃度進(jìn)行了詳細(xì)測(cè)定，現(xiàn)予以總結(jié)報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

于滄州市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收集2009年3月4日～2010年2月2日期間住院的具有高血壓、高脂血癥、高血糖的“三高”危險(xiǎn)因素患者125例，其中發(fā)生腦出血或腦梗死的患者共110例，所有患者均通過(guò)頭顱CT和（或）MRI的檢查確定診斷，符合第四次全國(guó)腦血管病的會(huì)議標(biāo)準(zhǔn)。血站健康獻(xiàn)血員，共18例。每人均于清晨臥位空腹時(shí)抽取靜脈血2 ml，共采集143份血清。

將血清分成四組：腦梗死組(cerebral infarction,CI)42份，其中，男 28 份，女 14 份，平均年齡（67±8）歲；腦出血組（cerebral hemorrhage,CH）68份，其中，男 38份，女 30份，平均年齡（61±6）歲；未發(fā)生腦血管事件的為“三高”組（CNⅡ組），共15 份，其中，男 9 份，女 6 份，平均年齡（63±7）歲；對(duì)照組（CNⅠ組）均為血站健康獻(xiàn)血員，共采集18份，其中，男7份，女11 份，平均年齡（59±8）歲。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

參照衛(wèi)生部“十一五”規(guī)劃教材2008年第7版的《內(nèi)科學(xué)》，規(guī)定“三高”為：高血壓，收縮壓≥140 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）和（或）舒張壓≥90 mm Hg；高脂血癥，總膽固醇(TC)≥6.22 mmol/L，或甘油三酯(TG)≥2.26 mmol/L，或高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)＜1.04 mmol/L，或低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)≥4.14 mmol/L；高血糖，糖尿病臨床癥狀加任意時(shí)間血糖≥11.1 mmol/L或空腹血糖≥7.0 mmol/L。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 儀器與試劑 應(yīng)用7200型上海可見(jiàn)分光光度儀。所用SOD及MDA試劑測(cè)定盒均于南京建成生物工程研究所有限公司購(gòu)置。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)方法 用可見(jiàn)分光光度儀比色法。所有受檢者均于清晨臥位空腹時(shí)抽取靜脈血2 ml，經(jīng)抗凝、離心后，提取血清并封存于冰箱（﹣80℃）中成批待檢。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)規(guī)定的程序進(jìn)行操作，對(duì)所有標(biāo)本進(jìn)行逐一編號(hào)并雙盲檢測(cè)。各種試劑的配制均按照試劑盒標(biāo)注的方法進(jìn)行，用硫代巴比妥酸法（TBA）測(cè)定血清MDA的含量，用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定血清SOD的含量。采用550 nm、0.5 cm光徑的可見(jiàn)分光光度儀，按說(shuō)明書(shū)要求對(duì)各管吸光光度值進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3 計(jì)算方法 據(jù)所測(cè)得的各測(cè)試管吸光光度值，應(yīng)用試劑盒說(shuō)明書(shū)提供的公式，分別計(jì)算SOD及MDA的值，以U/ml，nmol/ml為單位表示。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理，將計(jì)算出的試驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（）的形式表示，并應(yīng)用 t、t′檢驗(yàn)、方差分析進(jìn)行配對(duì)比較。

2 結(jié)果

“三高”及同時(shí)發(fā)生腦血管疾病的患者血清中SOD及MDA含量見(jiàn)表1所示。與健康組、單純“三高”組比較，腦出血及腦梗死組血清中SOD的含量無(wú)顯著性差異 （P＞0.05），但是結(jié)果顯示均有降低的趨勢(shì)；血清MDA的含量均顯示出明顯的升高（P＜0.05）。腦出血組和腦梗死組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。 “三高”組與健康組比較無(wú)明顯差異（P＞0.05），但是“三高”組的SOD偏低，MDA偏高。

表1 “三高”及同時(shí)發(fā)生腦血管疾病的患者血清SOD、MDA含量（）

表1 “三高”及同時(shí)發(fā)生腦血管疾病的患者血清SOD、MDA含量（）

注：與 CNⅡ及 CNⅠ組比較，△P＜0.05，*P＞0.05，但有降低趨勢(shì)

組別 例數(shù)68421518腦出血組（CH組）腦梗死組（CI組）“三高”對(duì)照組（CNⅡ組）健康對(duì)照組（CNⅠ組）MDA（nmol/ml）2.98±0.74△2.94±0.92△2.25±0.422.21±0.58 SOD（U/ml）98.51±14.50*96.62±10.79*105.14±17.79107.78±11.61

3 討論

氧自由基在機(jī)體內(nèi)通過(guò)酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)而產(chǎn)生，非酶系統(tǒng)能夠攻擊生物膜中存在的多不飽和脂肪酸，從而引發(fā)出脂質(zhì)過(guò)氧化作用，且形成MDA等脂質(zhì)過(guò)氧化物，脂質(zhì)過(guò)氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成非自由基的脂質(zhì)分解產(chǎn)物，且進(jìn)一步通過(guò)鏈?zhǔn)交蛘哝準(zhǔn)街ф湻磻?yīng)，把活性氧的作用放大。故而初始的單個(gè)活性氧就能夠?qū)е露鄠€(gè)脂類分解產(chǎn)物形成，在這些分解產(chǎn)物中，盡管有些是無(wú)害的，但是有些卻能夠引起細(xì)胞代謝和功能障礙，以至于導(dǎo)致死亡。而通過(guò)血清MDA的測(cè)試往往可以反映出機(jī)體內(nèi)的脂質(zhì)過(guò)氧化程度，并且間接地反映出機(jī)體細(xì)胞被自由基攻擊的嚴(yán)重程度。正常的人體內(nèi)含有足夠量的維生素C、維生素E、GSH-Px、SOD等抗氧化物質(zhì)，來(lái)對(duì)抗MDA等體內(nèi)不斷產(chǎn)生出的自由基產(chǎn)物[2]。腦組織內(nèi)存在的清除自由基的一種主要抗氧化酶SOD，可以阻斷脂質(zhì)過(guò)氧化鏈鎖反應(yīng)，SOD活力的高低間接反映了機(jī)體對(duì)氧自由基的清除能力。通常機(jī)體病變發(fā)生時(shí)，SOD與MDA的含量會(huì)隨之一起發(fā)生變化。故而，血清中SOD與MDA的含量同時(shí)檢測(cè)，能間接了解氧化和抗氧化能力在患者體內(nèi)的情況，進(jìn)一步揭示這些變化與腦血管意外發(fā)生的關(guān)系，以助于腦血管疾病的診斷、預(yù)防和治療。

從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，具有腦血管疾病的受檢者血清中MDA的濃度均明顯升高，示腦出血和腦梗死患者體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，可以產(chǎn)生大量自由基。腦出血后，血腫壓迫周圍區(qū)域腦組織，導(dǎo)致腦血流量明顯降低，腦組織缺氧，進(jìn)而產(chǎn)生大量自由基，后者可誘發(fā)腦水腫的發(fā)生。腦缺血發(fā)生時(shí)，通過(guò)花生四烯酸-環(huán)氧酶系統(tǒng)、黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)及線粒體的“單價(jià)泄漏”等反應(yīng)途徑產(chǎn)生了較多的羥自由基和超氧陰離子自由基，使機(jī)體的防御機(jī)制降低，從而造成了自由基的損傷[3]。

相關(guān)研究資料表明，SOD與體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物呈現(xiàn)出顯著的負(fù)相關(guān)性[4]。機(jī)體阻止氧自由基過(guò)氧化損害的主要防御酶即SOD，能夠有效清除氧自由基且阻斷由其所引發(fā)的惡性循環(huán)過(guò)程，從而減輕腦水腫[5]。SOD也是維護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞和血管功能的關(guān)鍵酶，可以通過(guò)催化過(guò)氧化氫和超氧陽(yáng)離子反應(yīng)，阻止NO滅活，維護(hù)NO濃度并維護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞功能[6]。有人提出[7]，應(yīng)用外源性的SOD和過(guò)氧化氫酶，可保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的功能，促使NO釋放，松弛血管平滑肌。大面積腦梗死后機(jī)體SOD被大量消耗，自由基產(chǎn)生增多，脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)。但實(shí)驗(yàn)顯示，發(fā)生腦血管疾病的兩組患者SOD活性與“三高”及健康對(duì)照組比較變化無(wú)顯著性差異，可能是因?yàn)橛^察例數(shù)、時(shí)間限制所致，但都存在降低趨勢(shì)。說(shuō)明腦血管疾病使MDA含量升高，并消耗SOD使其活性下降，對(duì)腦組織具有明顯的破壞作用。

“三高”組與健康組比較無(wú)明顯差異，但“三高”組的SOD偏低，MDA偏高?？赡苁且?yàn)楦哐獕?、高脂血癥、糖尿病發(fā)展的某些病理過(guò)程與脂質(zhì)過(guò)氧化損傷有關(guān)，而脂質(zhì)過(guò)氧化損傷使清除自由基的多種抗氧化酶類活性降低，包括SOD等。本研究顯示，“三高”組患者血清MDA含量較健康組升高，表明體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化作用增強(qiáng)。也可能與“三高”患者內(nèi)源性SOD生成不足有關(guān)，同時(shí)由于機(jī)體產(chǎn)生大量氧自由基，SOD用于消滅氧化自由基的消耗增加，進(jìn)一步造成“三高”患者體內(nèi)SOD活性顯著下降。

本實(shí)驗(yàn)研究顯示，腦血管疾病患者機(jī)體存在著氧自由基的異常表達(dá)，促進(jìn)了疾病的發(fā)生和發(fā)展，檢測(cè)血清SOD和MDA的含量有助于對(duì)腦血管疾病患者的診斷，而且研究提示，在臨床上應(yīng)積極有針對(duì)性地給予抗氧化治療，對(duì)改善預(yù)后有一定的幫助。

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