李計(jì)龍,劉建華,高玉瓊#,霍昕,王道平,盛世昌1,(1.貴州大學(xué)生命科學(xué)院,貴陽市 55005;.貴州省生物技術(shù)研究開發(fā)基地,貴陽市 55000;.貴州省中國科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴陽市 550009)
石吊蘭(Lysionotus pauciflorus Maxim.)為苦苣苔科植物吊石苣苔的全草,別名石豇豆、接骨生、吊石苣苔等[1]。生長于海拔300~2000 m的丘陵、山地林中或陰處石巖上或樹上,分布于江蘇、浙江、安徽、江西、福建、臺(tái)灣、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、貴州等地。其根、莖、葉等均可入藥,功效為清熱利濕、祛痰止咳、活血調(diào)經(jīng)。主治風(fēng)濕痹痛、咳喘痰多、月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、跌打損傷[2,3]。文獻(xiàn)資料表明,對石吊蘭的研究主要集中在抗結(jié)核方面[4],未見其揮發(fā)性成分報(bào)道。石吊蘭主要化學(xué)成分為黃酮類、苯乙醇類、β-谷甾醇等。陳林等[5]對石吊蘭全草的脂肪酸成分進(jìn)行研究,亞油酸、甾醇和維生素E等脂肪酸含量較高。馮衛(wèi)生等[6,7]從石吊蘭中分離得到丁香酸、鄰苯二甲酸-雙-(2-乙基己基)酯、5,7-二羥基-6,8,4′-三甲氧基黃酮醇、7-羥基-6,8,4′-三甲氧基-5-O-β-D-葡萄糖黃酮苷、D-(+)-棉子糖、阿魏酸、石吊蘭素等13種化學(xué)成分。Liu Y等[8]從石吊蘭中分離得到苯丙素苷化合物。楊付梅等[9]從石吊蘭中分離得到二十九烷醇-15、正三十烷醇、β-谷甾醇、巖豆素、熊果酸5種化學(xué)成分。其中,阿魏酸具有抗氧化、抑制血栓形成、改善心肌缺血等作用[10];石吊蘭素具有抗結(jié)核菌、抗炎、降壓、清除自由基以及抗腫瘤作用[11]。
筆者首次利用簡便的有機(jī)溶劑-水蒸氣蒸餾法提取石吊蘭的揮發(fā)油,并對其揮發(fā)油的化學(xué)組成進(jìn)行了分析。
HP-6890/HP5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)儀、HP MSD化學(xué)工作站(美國Hcwlctt Packard公司);水蒸氣蒸餾儀(上海玻璃儀器廠)。
藥材為石吊蘭全株,采自遵義,由貴州省生物技術(shù)研究開發(fā)基地霍昕副主任藥師鑒定為苦苣苔科吊石苔苣屬石吊蘭L.pauciflorus Maxim;所用試劑均為國產(chǎn)分析純。
取粉碎(過80目)的石吊蘭藥材50 g,加入2000mL水及適量正己烷,采用2010年版《中國藥典》揮發(fā)油提取裝置[12]提取,收集上層無色油狀物,用無水硫酸鈉干燥作為供試品。
2.2.1 GC條件 色譜柱:HP-5MS 5%彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×250 μm×0.25 μm);柱溫:50 ℃(保留2min),以4 ℃·min-1升溫至280℃(保持2min);汽化室溫度:250℃;載氣:高純度He(99.99%);柱前壓:7.62 Psi;流速:1.0mL·min-1;進(jìn)樣量:1μL;分流比:40∶1。
2.2.2 MS條件 離子源:EI源;離子源溫度:230℃;四級桿溫度:150 ℃;電子能量:70 eV;發(fā)射電流:34.6 μA;倍增器電壓:2013V;接口溫度:280℃;溶劑延遲:4min;質(zhì)量掃描范圍:10~500 amu。
2.2.3 定性分析 通過HP MSD化學(xué)工作站檢索Nist98標(biāo)準(zhǔn)MS圖庫和WILEY275 MS圖庫,同時(shí)結(jié)合有關(guān)MS圖文獻(xiàn)解析,確認(rèn)石吊蘭揮發(fā)性物質(zhì)的化學(xué)成分。
2.2.4 定量分析 通過HP MSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算,求出石吊蘭各化學(xué)成分的峰面積相對百分含量。
石吊蘭揮發(fā)油總離子流圖見圖1;檢出的各化學(xué)成分及其峰面積相對百分含量見表1。
圖1 石吊蘭普通粉揮發(fā)油總離子流圖Fig 1 Total ion chromatogram of volatile oil from ordinary powder of L.pauciflorus
表1 石吊蘭揮發(fā)油化學(xué)成分及峰面積相對百分含量Tab 1 Chemical constituent and relative percentage of peak area of volatile oil of L.pauciflorus
續(xù)表1Subtab 1
筆者首次對石吊蘭揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行研究,從石吊蘭揮發(fā)油中共提取分離88個(gè)化學(xué)成分,鑒定出其中的57個(gè),占揮發(fā)油總量的85.334%,多為萜類化合物(倍半萜、雙萜)和鏈狀芳香族化合物(烯烴、醇、醛及酯)等,其中含量較高的為芳樟醇13.935%、1-辛烯-3-醇7.283%、己醛4.172%、苯乙醛3.162%、2-羥基苯甲酸甲基酯2.956%、3-辛醇2.900%、二異丁基鄰苯二甲酸酯2.683%、反式-金合歡烯2.607%、香葉基丙酮2.436%、2-戊基-呋喃2.396%、α-松油醇2.393%、反式-2-己烯醛2.228%、六氫假紫羅蘭酮2.225%。其中芳樟醇是使用頻率最高的香料品種,也是合成維生素A、維生素D、維生素E和β-胡蘿卜素等藥物的化工原料。
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