胡 波
(武漢市普愛醫(yī)院西院,武漢 430034)
Survivin為凋亡蛋白抑制劑(IAP)家族成員,廣泛表達于人胚胎組織和腫瘤組織,并能強烈抑制細胞凋亡,與惡性腫瘤發(fā)病相關。2010年10月,我們采用RT-PCR法對Survivin mRNA在24份胃癌組織中的表達進行了檢測,旨在進一步探討胃癌發(fā)生、發(fā)展機制。
材料與方法:2008年1月~2010年6月我院胃腸外科胃癌組織及癌旁正常組織手術標本各24份,患者男17例,女7例;年齡49~75歲,平均62歲。其中胃癌臨床分期為T1、T2、T3、T4期各6例,術前均未行化療、放療、生物治療等。取上述標本,采用Trizol一步法取組織總RNA:循環(huán)32次,退火溫度為56℃;GAPDH引物上游為CAGGAACAGCCGAGATGAC、下游為 CCATGGAGAAGGCTGGGG,循環(huán) 32次,退火溫度為58℃。用紫外分光光度計測定總RNA在波長260和280 nm吸光度(A)值;取PCR反應產(chǎn)物6 μl加1 μl載樣緩沖液,以1×TAE為電泳緩沖液,在1.5%瓊脂糖凝膠上電泳(電壓 80 V),紫外燈下觀察結(jié)果并攝片,用JS2300凝膠成像分析儀進行圖像掃描分析,以檢測產(chǎn)物A值與對應 GAPDH吸光度值的比值作為表達結(jié)果。采用SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計學處理,計量資料以表示、行t檢驗,檢驗水準α=0.05。
結(jié)果:癌組織Survivin mRNA表達 T1、T2、T3、T4期分別為 0.8043 ±0.0107、0.8752 ±0.0156、0.9234 ±0.0117、0.9734±0.0218,癌旁正常組織無 Survivin mRNA 表達,兩兩比較P均<0.01。
討論:胃癌是我國最常見的消化系統(tǒng)腫瘤,死亡率占惡性腫瘤第一位,發(fā)病率男∶女約為3∶1,發(fā)病年齡高峰為50~60歲,但發(fā)病原因尚未完全查明。Survivin特異性表達于胚胎發(fā)育組織及未分化成熟組織,并在幾乎所有惡性腫瘤組織中出現(xiàn)高表達,而在正常成人多數(shù)組織中不表達(胸腺、胎盤、子宮內(nèi)膜除外)。Survivin是迄今發(fā)現(xiàn)的最強的凋亡抑制因子,可促進細胞表型惡性轉(zhuǎn)化,可能是某些惡性腫瘤發(fā)生的關鍵因素,而其本身的抗凋亡與細胞周期特異表達特性為腫瘤的基因治療提供了新的靶向物。本研究顯示,Survivin在癌旁正常組織中無表達,而在 T1、T2、T3、T4期胃癌組織中均呈逐漸遞增的高表達狀態(tài)。提示Survivin可能通過抑制惡性腫瘤細胞凋亡參與胃癌發(fā)生過程,并通過促進胃癌腫瘤細胞增殖進一步參與腫瘤浸潤。
總之,Survivin可能與胃癌發(fā)生及腫瘤浸潤程度相關,此為臨床進一步研究胃癌的發(fā)生機制及提供新的治療靶點提供了理論依據(jù)。