倪青松，王 斌，李旭廷，龔 雪，謝良華

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院獸藥研究所，四川 成都 610066；2.四川鼎尖動物藥業(yè)有限責(zé)任公司，四川 成都 610100）

川牛膝是莧科植物川牛膝的干燥根，為川產(chǎn)道地藥材，主產(chǎn)四川天全、金河口等地。其味苦、酸，性平，入肝、腎經(jīng)，自古就有特殊的臨床應(yīng)用價值：補肝腎、強筋骨、治腰膝酸麻和肝腸眩暈、散瘀血、消癰腫等。大量藥理、臨床研究表明，川牛膝多糖（ABP）是一種免疫調(diào)節(jié)劑，能夠促進細(xì)胞免疫和體液免疫。本研究擬通過研究川牛膝多糖對雞血清抗體和血液生化指標(biāo)的影響，來探討其對體液免疫的影響，為川牛膝作為中草藥免疫增強劑及飼料添加劑的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 川牛膝多糖 本實驗室自制。用四川天全產(chǎn)的道地藥材——川牛膝干燥粉碎，再回流提取，并用經(jīng)典的“水提醇沉”法處理后得到精制的川牛膝總多糖。

1.2 試驗動物及分組 健康三黃雞60只，隨機分為3組，每組20只，分籠飼養(yǎng)，基礎(chǔ)日糧相同（基礎(chǔ)日糧配方見表1）。Ⅰ組作為對照組，Ⅱ組和Ⅲ組從7日齡開始分別在基礎(chǔ)日糧中按400mg/kg的比例加入川牛膝多糖添加劑，自由采食。環(huán)境溫度控制在23～25℃左右。

表1 基礎(chǔ)日糧配方

1.3 方法 試驗期間記錄臨床癥狀和剖解變化，分別在飼喂后第7、14、21d和28d頸靜脈采血，分離血清，檢測以下指標(biāo)：

1.3.1 血清抗體IgG、IgA、IgM的含量 用免疫球蛋白IgG、IgA、IgM免疫透射比濁法檢驗試劑盒測定（購于四川省邁克科技有限責(zé)任公司）。

1.3.2 血清白蛋白含量 用白蛋白BCG法檢測試劑盒測定（購于四川省邁克科技有限責(zé)任公司）。

1.3.3 血清鈣含量 用OCPC法試劑盒測定 [購于柏定生物工程（北京）有限責(zé)任公司]。

1.3.4 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性 用轉(zhuǎn)移酶IFCC法檢測試劑盒測定（購于四川省邁克科技有限責(zé)任公司）。

1.3.5 血清堿性磷酸酶活性 用速率法試劑盒測定（購于北京中生生物制品有限公司）。

1.4 統(tǒng)計處理 所有數(shù)據(jù)均以“x±s”表示，采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進行方差分析。

2 結(jié)果

2.1 血清抗體檢測結(jié)果 結(jié)果見表2。由表2可知，川牛膝多糖組與對照組相比，其IgG含量差異不顯著（P＞0.05），但均有明顯的升高趨勢；IgA在21日齡和28日齡均差異顯著（0.01＜P≤0.05），表現(xiàn)為明顯升高；而IgM在14日齡時表現(xiàn)為差異顯著（0.01＜P≤0.05）。

2.2 血液生化指標(biāo)檢測結(jié)果 結(jié)果見表3。由表3可知，川牛膝多糖組與對照組相比，其各項血液生化指標(biāo)（白蛋白、鈣、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶以及堿性磷酸酶）均表現(xiàn)為差異不顯著（P＞0.05）。

表2 川牛膝多糖對雞血清抗體的影響

表3 川牛膝多糖對雞血液生化指標(biāo)的影響

3 討論與結(jié)論

3.1 分析與討論 血清免疫球蛋白含量的變化反映了機體體液免疫系統(tǒng)的功能狀態(tài)。血清IgM在初次應(yīng)答的分泌抗體中占優(yōu)勢，即在早期階段對機體的免疫調(diào)節(jié)具有重要作用。在20日齡后，因機體降解速度超過發(fā)育不成熟的免疫系統(tǒng)合成IgM的速率而出現(xiàn)IgM下降。IgM在大多數(shù)畜禽血清中的含量僅次于IgG，僅存于血液中，對組織液或外分泌液中的保護作用不及IgG。本試驗結(jié)果表明，川牛膝多糖組與對照組相比，在14日齡時可顯著升高血清中IgM的含量，而在21日齡后出現(xiàn)差異不顯著，其結(jié)果與上述理論相符，說明川牛膝多糖可在早期階段通過升高血清中IgM的含量來起到免疫調(diào)節(jié)的作用。

IgG是唯一見于雛禽血清中的母源抗體，在最初兩周逐漸分解，后隨著雛雞本身合成的結(jié)果，IgG水平迅速回升。本試驗結(jié)果表明，川牛膝多糖組的血清IgG含量雖然與對照組相比差異不顯著，但與同日齡相比均有所提高，說明川牛膝多糖可提高血清中IgG的含量。IgA與IgG結(jié)構(gòu)相似，是外分泌液的主要免疫球蛋白，在保護腸道、呼吸道、泌尿生殖道、乳腺和眼睛抵抗微生物入侵方面起十分關(guān)鍵的作用。本試驗結(jié)果表明，川牛膝多糖可顯著提高血清IgA的含量，是否預(yù)示在飼料中添加川牛膝多糖后可增強動物機體對腸道疾病、呼吸道疾病和泌尿生殖道疾病的抵抗力，還需進一步研究。

血清白蛋白主要維持機體滲透壓平衡，它能很好地反映機體蛋白的吸收和代謝狀況，同時與雞的生長速度成正相關(guān)。本試驗結(jié)果表明，川牛膝多糖可通過增加機體蛋白的吸收來提高雞的生長速度，且對機體蛋白質(zhì)的代謝無不良影響。血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶是機體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)氨酶，在氨基酸的分解與生成代謝過程中起著十分重要的作用，同時又是反映肝臟健康狀況的重要指標(biāo)。本試驗結(jié)果提示在臨床上使用川牛膝多糖時，對雞的肝臟無損傷或無不良影響。堿性磷酸酶是機體中催化磷酸脂水解的一組重要的酶，血清中堿性磷酸酶主要來自骨骼和肝臟，可反映動物機體骨骼與肝臟的生理機能狀況。本試驗結(jié)果表明，川牛膝多糖能夠通過升高堿性磷酸酶來促使體內(nèi)鈣動用增強，從而促進骨骼生長，滿足雞快速生長的需要。

3.2 結(jié)論 川牛膝多糖能夠顯著提高雛雞血清抗體IgG、IgA、IgM的含量，對體液免疫具有積極作用，且對各項血液生化指標(biāo)無不良影響，可將其作為一種新型免疫增強劑應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)。

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