李 潔，黃桂華，崔美蘭，邵義紅，王麗華

(1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012;2.山東齊都藥業(yè)有限公司，山東淄博255400)

鹽酸昂丹司瓊(ondansetron hydrochloride)作為一類抗腫瘤輔助用藥，為高選擇5－羥色胺受體阻斷劑，臨床上主要用于腫瘤放療、化療以及手術(shù)治療所引起的嘔吐［1］，鹽酸昂丹司瓊已明確的主要微量雜質(zhì)包括:1，2，3，4－四氫－9－甲基－4 H－咔唑酮(中間體I)、9－甲基－3－(二甲胺基)甲基－1，2，3，9－四氫－4 H－咔唑－4－酮鹽酸鹽(中間體Ⅱ)、1，2，3，9－四氫－9－甲基－3－亞甲咔唑酮(雜質(zhì)Ⅲ)［2］。生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)該產(chǎn)品可見異物和滅菌后的有關(guān)物質(zhì)受pH值影響較大，產(chǎn)品滅菌后有明顯變化的雜質(zhì)峰出現(xiàn)。直接接觸藥液的包裝材質(zhì)不同，貯存過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)沉淀;臨床使用過(guò)程中與pH值大于5.7的藥液配伍會(huì)發(fā)生沉淀反應(yīng)［4］。為此，我們對(duì)鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液生產(chǎn)工藝進(jìn)行研究，考察最佳的pH值控制范圍，直接接觸藥液的包裝材料，滅菌參數(shù)，儲(chǔ)存條件等，以減少生產(chǎn)和儲(chǔ)存過(guò)程中藥物的降解，提高產(chǎn)品質(zhì)量，為該藥物的質(zhì)量控制參數(shù)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

PHS－3C型pH計(jì)(上海精科雷磁儀器廠)，BS110S電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，SPX智能生化培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠)，ZWF－J6激光注射液微粒分析儀(天津市天河醫(yī)療儀器有限公司)，YB－2澄明度檢測(cè)儀(天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠)，WD－B藥物穩(wěn)定性檢查儀(天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠)，600－717－2414型Waters高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司)。

鹽酸昂丹司瓊氧化鈉注射液樣品(山東齊都藥業(yè)有限公司)，活性炭(上?；钚蕴繌S)。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方 鹽酸昂丹司瓊(二水合物)8 g，氯化鈉900 g，注射用水適量，溶解定容至100 L。

2.2 生產(chǎn)工藝

2.2.1 制備工藝 在配制罐中加入適量注射用水，加入氯化鈉，加入適量1 mol·L－1稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值在3.5～5.5范圍內(nèi)，于攪拌下加入處方量的鹽酸昂丹司瓊，溶解后，加入已預(yù)先潤(rùn)濕的活性炭，攪拌吸附10 min后，檢驗(yàn)pH值、含量，精濾、灌裝。灌裝好的產(chǎn)品于121℃水浴滅菌15 min，燈檢，包裝。

2.2.2 檢測(cè)方法 照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄V D)測(cè)定［3］。

鹽酸昂丹司瓊:色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用氰基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02 mol·L－1磷酸二氫鈉溶液(用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.4)－乙腈(50∶50)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)310 nm。理論塔板數(shù)按鹽酸昂丹司瓊峰計(jì)算，應(yīng)不低于2 000。

測(cè)定法:精密量取本品適量，加流動(dòng)相稀釋制成每1 mL中約含昂丹司瓊80 μg的溶液，精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖;另取鹽酸昂丹司瓊對(duì)照品，精密稱定，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法:本品適量，加流動(dòng)相制成每1 mL中約含80 μg的溶液，作為供試品溶液;精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。除檢測(cè)波長(zhǎng)為216 nm外，照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液10 μL注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)儀器檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10%～15%，再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各10 μL，分別注入色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的4倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%)。

2.3 產(chǎn)品控制參數(shù)的篩選

2.3.1 調(diào)節(jié)劑選擇及用量的確定 本品主要有效成分為鹽酸昂丹司瓊，因其助溶基團(tuán)為鹽酸基，制備注射液時(shí)加入稀鹽酸來(lái)調(diào)節(jié)pH值，使制劑中不再引入其他成分，保持制劑的穩(wěn)定性。

2.3.2 pH值控制范圍的篩選 pH值篩選試驗(yàn):鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液pH值范圍為4.5～6.5(鹽酸昂丹司瓊氯化鈉注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)YBH01592003)，參照其pH值范圍，按處方配制一定量的藥液，分別用10%鹽酸溶液和10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至3.5、4.5、5.5、6.0、6.3左右后灌裝50瓶(中性高硼硅玻璃瓶包裝)，每個(gè)pH值條件留樣2瓶，剩余樣品121℃，12 min滅菌。比較不同pH值條件下，樣品滅菌前后性狀、pH值、含量、有關(guān)物質(zhì)等指標(biāo)變化情況。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇最佳pH值控制范圍。試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 pH值范圍的篩選試驗(yàn)結(jié)果

分析:隨著藥液pH值的升高，特別是pH值大于5.8以后，樣品變渾濁。取樣檢測(cè)，有關(guān)物質(zhì)及含量。將渾濁的藥液加入稀鹽酸溶解至澄清狀態(tài)，取樣檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果見表2、3、4。

表2 不同pH值范圍的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果(%)

分析結(jié)論:隨著藥液pH值的升高，在調(diào)節(jié)pH值5.5以上時(shí)，藥液滅菌后有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)色譜圖上在保留時(shí)間4 min左右有明顯的新雜質(zhì)峰出現(xiàn)，該雜質(zhì)峰隨pH值的升高呈明顯上升趨勢(shì)，成品pH值5.8的樣品其有關(guān)物質(zhì)已超出限度。

表3 不同pH值范圍的鹽酸昂丹司瓊含量檢測(cè)結(jié)果(%)

分析結(jié)論:隨著pH值的升高，鹽酸昂丹司瓊?cè)芙舛瘸拭黠@下降趨勢(shì)，含量偏低。

表4 復(fù)溶后的鹽酸昂丹司瓊注射液含量及有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果

由試驗(yàn)結(jié)果可知:各個(gè)pH值條件的樣品滅菌后與滅菌前相比pH值均有不同程度的升高，但有滅菌前半成品pH值越高，滅菌后pH值升高幅度越大的趨勢(shì)。另由表2、表3統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知:隨著pH值的升高，樣品中鹽酸昂丹司瓊含量呈下降趨勢(shì)，滅菌后有關(guān)物質(zhì)呈上升趨勢(shì)。

表4結(jié)果顯示，即隨著pH值的升高，鹽酸昂丹司瓊的溶解度降低，原先已溶解的主藥析出結(jié)晶，含量下降，有關(guān)物質(zhì)增加。但復(fù)溶后原料重新溶解，含量與初始配制液吻合。但有關(guān)物質(zhì)稍有增加。

2.3.3 直接接觸藥液包裝材料的選擇 分別采用普通鈉鈣玻璃瓶、高硼硅玻璃瓶、中性高硼硅玻璃瓶、非PVC包裝，注射液pH值控制在5.0和5.5，40℃加速條件放置1個(gè)月后室溫放置6個(gè)月，檢測(cè)外觀、pH值、含量、有關(guān)物質(zhì)，檢測(cè)結(jié)果如表5。

表5 穩(wěn)定性考察的鹽酸昂丹司瓊注射液含量及有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果

分析:普通鈉鈣玻璃瓶含有過(guò)多的玻璃堿或?qū)λ牡挚沽Σ粡?qiáng)時(shí)，經(jīng)熱滅菌或長(zhǎng)期儲(chǔ)存后將顯著增加注射液的pH值，導(dǎo)致昂丹司瓊析出結(jié)晶。

2.3.4 滅菌參數(shù)選擇 由鹽酸昂丹司瓊的化學(xué)性質(zhì)及結(jié)構(gòu)可知，本品對(duì)滅菌溫度有一定的敏感性，主要體現(xiàn)在滅菌后產(chǎn)品有關(guān)物質(zhì)增高，我們分別按制備工藝制備了3批樣品，批號(hào)100901、100902、100903，三批產(chǎn)品各取50瓶，采用121℃、12 min條件滅菌，剩余樣品115℃、30 min滅菌，滅菌結(jié)束后按本品含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定有關(guān)物質(zhì)及主藥含量，對(duì)比滅菌條件對(duì)產(chǎn)品造成的影響，結(jié)果如表6。

表6 不同滅菌條件對(duì)有關(guān)物質(zhì)及鹽酸昂丹司瓊含量的影響

分析結(jié)論:121℃、12 min滅菌條件較115℃、30 min滅菌條件劇烈，產(chǎn)品有關(guān)物質(zhì)增高，但檢測(cè)結(jié)果均合格。為增加無(wú)菌保證值，因此首選滅菌參數(shù)是121℃、12 min，F(xiàn)0≥12的過(guò)熱滅菌條件。

2.3.5 影響因素試驗(yàn) 影響因素試驗(yàn)在較為激烈的條件下進(jìn)行的。其目的探討藥物的固有穩(wěn)定性，了解影響其穩(wěn)定性的因素及可能的降解途徑與降解產(chǎn)物，為制劑生產(chǎn)工藝、包裝、貯存條件和建立降解產(chǎn)物分析提供科學(xué)依據(jù)。

取樣品(批號(hào):100901)，于低溫(4℃)和高溫(60℃)及光照，照度為(4500±500)lx條件下考察10 d，于第5、10天取樣，考察其性狀、可見異物、pH值、含量、有關(guān)物質(zhì)是否有明顯變化，試驗(yàn)結(jié)果見表7。

表7 影響因素試驗(yàn)結(jié)果

由試驗(yàn)結(jié)果可知，本品在光照(4500±500)lx、低溫4℃和高溫60℃條件下放置10 d后，光照條件下有關(guān)物質(zhì)略有升高，其性狀、可見異物、含量均無(wú)明顯變化，故本品應(yīng)避光密閉條件下保存。

2.3.6 低溫凍融試驗(yàn) 由于本品在水中溶解度較低(略溶)，故儲(chǔ)存過(guò)程中易析出片狀結(jié)晶。我們進(jìn)行低溫凍融試驗(yàn)，考察試制樣品的穩(wěn)定性。取樣品(批號(hào):100901)分別于－15℃條件下放置2 d，然后于40℃條件下融化并放置2 d，而后檢查樣品性狀、可見異物、pH值，如此反復(fù)循環(huán)共3次。試驗(yàn)結(jié)果見表8。

表8 凍融循環(huán)試驗(yàn)結(jié)果

由試驗(yàn)結(jié)果可知:凍融試驗(yàn)前后，監(jiān)測(cè)的各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，但低溫析出結(jié)晶，建議常溫保存。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

3.1.1 通過(guò)pH值調(diào)節(jié)劑及范圍的選擇實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，pH值大小對(duì)鹽酸昂丹司瓊?cè)芙舛扔绊戄^大，當(dāng)pH值較高時(shí)，鹽酸基與氫氧化鈉發(fā)生反應(yīng)，昂丹司瓊游離，溶解度減小，易析出結(jié)晶。

3.1.2 直接接觸藥品的包裝材料材質(zhì)對(duì)產(chǎn)品影響極大，當(dāng)玻璃瓶?jī)?nèi)壁保護(hù)膜退落后，玻璃中含有過(guò)多的玻璃堿，在貯存過(guò)程中可增加注射液的pH值，導(dǎo)致昂丹司瓊析出結(jié)晶。

3.1.3 低溫凍融試驗(yàn)結(jié)果表明，低溫易析出結(jié)晶，需2次加熱溶解，增加了產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，因此注射劑要避免低溫放置。

3.1.4 通過(guò)穩(wěn)定性及影響因素的考察結(jié)果表明，該產(chǎn)品室溫放置過(guò)程各質(zhì)量指標(biāo)無(wú)明顯變化，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

3.2 結(jié)論 通過(guò)pH值調(diào)節(jié)劑及范圍的選擇、包裝材料的選擇、滅菌工藝的選擇、影響因素、低溫凍融等試驗(yàn)結(jié)果表明，生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)該產(chǎn)品可見異物和滅菌后的有關(guān)物質(zhì)受pH值影響較大，不同的pH值控制條件，產(chǎn)品滅菌后有明顯變化的雜質(zhì)峰出現(xiàn)。貯存過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)沉淀。為此，采用鹽酸調(diào)節(jié)pH值;半成品pH值控制在3.5～5.5之間;采用中、高硼硅玻璃瓶和非PVC包裝，過(guò)熱滅菌的制備工藝能夠得到穩(wěn)定優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。產(chǎn)品避光保存，更利于保證質(zhì)量。

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