田富饒 王旭強(qiáng) 鄭 瀚

(義烏出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)服務(wù)中心，義烏 322000)

苯甲醇又稱芐醇 (benzyl alcohol) 是一種芳香族醇，在多種化妝品中用作芳香族組分、防腐劑、溶劑和降粘劑，是近幾年來新增的防腐劑。我國(guó)和歐共體規(guī)定化妝品中最大允許質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%。苯甲醇有麻醉作用，對(duì)眼部、皮膚和呼吸系統(tǒng)有強(qiáng)烈的刺激作用，吞食、吸入或皮膚接觸均對(duì)身體有害，攝入后引起頭痛、惡心、嘔吐、胃腸道刺激、驚厥、昏迷，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致死亡。目前苯甲醇的檢測(cè)主要集中在藥品(注射液)方面[1-6]，苯甲醇常用的檢測(cè)方法有高效液相色譜法[7，8]和氣相色譜法[9]。

筆者采用高效液相色譜技術(shù)建立了一種測(cè)定化妝品中苯甲醇含量的方法，該方法簡(jiǎn)便、快速，所用試劑毒性小，能滿足對(duì)進(jìn)出口化妝品中苯甲醇含量的監(jiān)管要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

高效液相色譜儀：Agilent 1200型，配帶紫外檢測(cè)器(VWD)，美國(guó)安捷倫公司；

超聲波清洗器：D-78224型，德國(guó)Elma公司；

高速離心機(jī)：3-30K型，德國(guó)Sigma公司；

分析天平：AL204型，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；

超純水儀：Milli-Q型，美國(guó)密理博公司；

有機(jī)性樣品濾膜：0.45 μm；

甲醇：色譜純；

苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(Lot：00907)：純度99.0%，德國(guó)Dr．Ehrenstorfer公司。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

精密稱取苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)品0.111 6 g，用甲醇溶解后定容至100 mL容量瓶中，得到1.116 mg/mL的苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于0～4℃冰箱保存。

分別精密量取一定體積的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋成濃度為0.046 4、0.092 8、0.185 6、0.232、0.464 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3 樣品前處理

以不含蠟質(zhì)的化妝品如護(hù)膚類、香波、粉類等作為樣品。準(zhǔn)確稱取樣品1.000 g于25.0 mL具塞比色管中，加入甲醇至10.0 mL，震搖，使試樣與提取溶劑充分混勻，置于50℃水浴中加熱5 min(液體類樣品不需水浴加熱)，超聲波提取20 min，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中，以5 000 r/min離心5 min，上清液經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，濾液作為試樣溶液備用，同時(shí)做試劑空白。

1.4 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX ODS (4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流動(dòng)相：水-甲醇(體積比65∶35)；流速：1.0 mL/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：10 μL；紫外(VWD)檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

在190～400 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，苯甲醇在200 nm處有最大吸收，但是在檢測(cè)過程中發(fā)現(xiàn)過低的波長(zhǎng)會(huì)造成基線漂移較大，從而影響定量的準(zhǔn)確性；另外，甲醇的紫外透明界限是202 nm，水的透明界限是205 nm，同時(shí)本實(shí)驗(yàn)以甲醇-水作為流動(dòng)相和采用紫外檢測(cè)器檢測(cè)，紫外檢測(cè)器在低波長(zhǎng)范圍內(nèi)較不穩(wěn)定，因?yàn)楹芏辔镔|(zhì)在此區(qū)域的吸收會(huì)變大，直接表現(xiàn)為基線不穩(wěn)噪音較大，因此檢測(cè)波長(zhǎng)選擇在有較大吸收的210 nm處[10]。在此條件下有較好的分離效果，干擾少，靈敏度高，分析速度快。

2.2 色譜柱及流動(dòng)相的選擇

實(shí)驗(yàn)選擇了Agilent ZORBAX Eclipse XDB -C18( 4.6 mm×250 mm, 5 μm)色譜柱和Agilent ZORBAX ODS ( 4.6 mm×250 mm, 5 μm)色譜柱及甲醇和不同比例的甲醇-水為流動(dòng)相。試驗(yàn)結(jié)果表明，在ZORBAX ODS柱上，少量調(diào)節(jié)兩相(甲醇-水)的比例，苯甲醇峰的保留時(shí)間變化不大，且理論塔板數(shù)、分離度和拖尾因子相近，符合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。在流動(dòng)相為甲醇-水(體積比35∶65) 條件下分離效果最好，且分析時(shí)間短、峰型好、靈敏度高。因此實(shí)驗(yàn)選擇Agilent ZORBAX ODS色譜柱和甲醇-水(體積比35∶65) 作為流動(dòng)相。苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖和潤(rùn)膚乳樣品中苯甲醇的色譜圖分別見圖1、圖2。

圖1 苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

圖2 潤(rùn)膚乳樣品中苯甲醇色譜圖

2.3 提取溶劑的選擇

根據(jù)苯甲醇稍溶于水，可與乙醇、乙醚、苯、氯仿、甲醇等有機(jī)溶劑混溶的性質(zhì)，同時(shí)兼顧本實(shí)驗(yàn)所選擇的流動(dòng)相系統(tǒng)，選擇了甲醇、甲醇-水作為提取溶劑。由于甲醇-水系統(tǒng)的提取會(huì)引入大量的水溶性雜質(zhì)，干擾檢測(cè)結(jié)果，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，甲醇是理想的提取溶劑，且毒性相對(duì)較小，易于操作。

2.4 提取時(shí)間的確定

按照1.3樣品前處理方法，分別在10、15、20、25、30 min測(cè)定提取物的峰面積，結(jié)果見表1。

表1 提取時(shí)間的確定

根據(jù)表1數(shù)據(jù)，確定最佳提取時(shí)間為20 min。

2.5 線性方程和檢出限

將配制好的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(0.046 4～0.464 mg/mL)按照1.4條件進(jìn)行高效液相色譜分析，以峰面積y與濃度x進(jìn)行線性回歸，線性方程為y= 36.236x+84.964，相關(guān)系數(shù)為0.999 92。以3倍信噪比(S/N=3) 計(jì)算方法的檢出限為0.10 mg/kg。

2.6 精密度和加標(biāo)回收率

取同一對(duì)照品溶液按1.4條件重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定6次，測(cè)得的苯甲醇含量分別為94.09、94.42、94.42、94.43、94.36、94.44 μg/mL，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.14%，表明方法的精密度良好。

為驗(yàn)證該方法的可靠性和準(zhǔn)確性，以香水為樣品進(jìn)行了加標(biāo)回收試驗(yàn)，經(jīng)反復(fù)檢測(cè)得出該樣品中苯甲醇的含量為65.77 mg/kg。稱取試樣0.950～1.050 g，加入3個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)濃度平行測(cè)定6次，按1.3方法進(jìn)行樣品處理及1.4條件進(jìn)行測(cè)定，加標(biāo)回收率為82.3%～118.4%，結(jié)果見表2。

表2 香水的回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.7 樣品測(cè)定

按1.3方法進(jìn)行樣品處理及1.4條件對(duì)來自6個(gè)不同企業(yè)的6款產(chǎn)品進(jìn)行了苯甲醇含量的測(cè)定，結(jié)果見表3。

3 結(jié)語

采用高效液相色譜-紫外檢測(cè)器法，以水-甲醇體系作為流動(dòng)相,對(duì)膏、乳、液、粉狀化妝品中苯甲醇的含量進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明方法簡(jiǎn)便易行，精密度好，色譜峰對(duì)稱性好，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，而且未采用磷酸鹽及強(qiáng)酸體系，可以避免對(duì)儀器設(shè)備的損壞和腐蝕，能夠準(zhǔn)確有效地檢測(cè)化妝品中苯甲醇的含量。該法的建立可為化妝品質(zhì)量監(jiān)督提供有力的技術(shù)支撐。

表3 樣品中苯甲醇含量的測(cè)定結(jié)果 mg/kg

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