前言
近年來,玻尿酸(俗稱透明質(zhì)酸,HA)因?yàn)槠渥鳛榛瘖y品成分的應(yīng)用受到了廣泛的關(guān)注。它最為卓越的特性在于它能鎖住大約1000倍自身重量的水分。但是,作為化妝品成分,透明質(zhì)酸在使用方面也有一些缺點(diǎn)。如果能正確使用,它能在肌膚表面起到極好的保濕效果。但是即使分子粒徑從3MD百下降到大約50KD,透明質(zhì)酸的短鏈依然因?yàn)樘蠖鵁o法正常滲透入肌膚。注射是將透明質(zhì)酸運(yùn)送到正確位置的一種方法。但是累積重復(fù)注射并不是運(yùn)用化妝品活性成分的最方便的方法。
因此,我們一直在尋找另一種合適的方法,能夠使化妝品成分刺激肌膚自身的功能,從而提升透明質(zhì)酸的水平。
產(chǎn)品描述
實(shí)驗(yàn)首先篩選了450種縮氨酸。這些縮氨酸都是為了刺激I型膠原蛋白而設(shè)計(jì)的,能刺激透明質(zhì)酸的合成。對篩選出的結(jié)構(gòu)進(jìn)行進(jìn)一步的分析,并將優(yōu)化過的縮氨酸進(jìn)行測試。最后,我們選擇了如圖1所示的三肽作為化妝品活性成分的開發(fā)對象。
我們發(fā)現(xiàn),三肽1不僅促進(jìn)了透明質(zhì)酸的合成,同時也加強(qiáng)了核心蛋白聚糖和基膜聚糖的水平。這兩種蛋白聚糖能控制膠原纖維的直徑,對膠原纖維的性質(zhì)起到很重要的作用。蛋白聚糖是由一條或多條糖或糖的衍生物鏈經(jīng)過修飾而組成的蛋白質(zhì)。
三肽是由1000ppm的縮氨酸溶于水溶性丙三醇溶液,不添加乳化劑、防腐劑、聚乙二醇、植物乳化劑、硅膠或聚合物等添加劑。
溶液包含370ppm的氯化鎂。
體外功效
透明質(zhì)酸
實(shí)驗(yàn)在96孔板細(xì)胞培養(yǎng)板上培養(yǎng)了正常人體纖維母細(xì)胞(NHF)。三天后,加入不含胎牛血清的適量1號縮氨酸,繼續(xù)培養(yǎng)三天。實(shí)驗(yàn)采用ECHELON公司(鹽湖城,美國猶他州)的透明質(zhì)酸分析設(shè)備測量了成長中期分泌的透明質(zhì)酸。圖2說明了當(dāng)1號縮氨酸濃度為12.5μmol/L時透明質(zhì)酸增加了302%。
核心蛋白聚糖及基膜聚糖合成
實(shí)驗(yàn)在96孔板細(xì)胞培養(yǎng)板上培養(yǎng)了正常人體纖維母細(xì)胞(NHF)。三天后,加入不含胎牛血清的適量1號縮氨酸。采用酶聯(lián)免疫法(EIA),通過4%的多聚甲醛固定細(xì)胞,用0.5%的氚核-X100浸泡。然后用5%的脫脂牛奶封閉非特定的結(jié)合部位。細(xì)胞培養(yǎng)板一式兩份,分別用如下之一的方式培養(yǎng)。
采用山羊抗基膜聚糖(L-20)抗體(santaCruz Biotechnology,sc-27718)培養(yǎng)細(xì)胞給基膜聚糖著色。該抗體采用山羊抗小鼠HRP共軛二抗體(Pierce)檢測。
采用山羊抗核心蛋白聚糖抗體(R&D系統(tǒng),AF143)培養(yǎng)細(xì)胞并給核心蛋白聚糖著色。采用兔抗羊HRP共軛二抗體(Pierce)檢測。
在添加了基質(zhì)后用酶標(biāo)儀(Multiskan Ascent,Thermolabsystems)在492nm處對目標(biāo)合成物進(jìn)行測量。圖3顯示了在劑量為12.5μmol/L時,三肽1對基膜聚糖及核心蛋白聚糖的合成影響達(dá)到穩(wěn)定。
體內(nèi)功效
我們在雙盲體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中對40名女性志愿者(55-65歲,有明顯的面部及上臂肌膚松弛現(xiàn)象)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),研究了新化學(xué)活性成分的功效。志愿者們每天兩次在面部及上臂使用含25ppm三肽1的配方乳液。
圖4顯示了兩個月后的治理功效。通過cutometer測定儀分別檢測了緊實(shí)度、拉張性及彈性這幾個生物力學(xué)參數(shù)。
兩三個月后,運(yùn)用primos身體技術(shù)對雙下巴在垂直面上的改變進(jìn)行了記錄。圖5顯示了與DO相比,在面上有明顯的改變。這種改變是任何對照組都無法達(dá)到的。
安全性及生態(tài)性
標(biāo)準(zhǔn)且明確的安全性實(shí)驗(yàn)表明:三肽1用于化妝品中是安全的。獲得的數(shù)據(jù)表明產(chǎn)品對環(huán)境沒有任何危害性影響。整個制造過程符合責(zé)任關(guān)懷計(jì)劃的標(biāo)準(zhǔn),即產(chǎn)品是安全、健康的,且從保護(hù)人類及環(huán)境的角度出發(fā)。
配方
用三肽1做面霜、凝膠、乳液等的配方非常簡單。通常情況下,該原料可在最后一步添加香精時添加。如果配方需要在高溫下增加原料,三肽可在80℃下穩(wěn)定兩個小時,而不會降解。配方包括原料可以適應(yīng)的pH值范圍很廣,3-7之間變化能保證其穩(wěn)定。即使在10%的溶液中它在50℃下放置兩個月之后仍然可保持穩(wěn)定。這說明那些微不足道的氯化鎂對配方的穩(wěn)定性沒有任何影