劉培培，竇德強(qiáng)*，Smith David C

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 大連 116620；2.Green Gold Inc.Alsaka，USA）

化學(xué)成分

北美刺人參葉化學(xué)成分的研究

劉培培1，竇德強(qiáng)1*，Smith David C2

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 大連 116620；2.Green Gold Inc.Alsaka，USA）

目的：研究北美刺人參葉中的化學(xué)成分。方法：對(duì)北美刺人參葉60%乙醇提取物的正丁醇部分進(jìn)行分離和純化，根據(jù)光譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)鑒定各化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：分離并鑒定了4個(gè)單體化合物，分別為正二十九烷醇（Ⅰ），正二十二烷酸（Ⅱ），3α-羥基羽扇豆-20（29）-烯-23，28-二酸（Ⅲ）和齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（Ⅳ）。結(jié)論：化合物Ⅰ～Ⅳ均為首次從北美刺人參葉中分離得到的化合物。

北美刺人參；正二十九烷醇；正二十二烷酸；羽扇豆；齊墩果酸

北美刺人參Devil′s club［Oplopanax horridus（Sm.）Torr.＆A.Gray ex.Miq.，Araliaceae］為五加科刺人參屬（Oplopanax Miq.）一種多年生落葉小灌木，生長(zhǎng)于太平洋西北部，主要分布在阿拉斯加及不列顛哥倫比亞［1］。北美刺人參是當(dāng)?shù)氐膫鹘y(tǒng)藥用植物，用于治療關(guān)節(jié)炎、感冒、發(fā)燒、喉頭腫脹、肺結(jié)核、糖尿病、便秘、細(xì)菌真菌感染等多種疾病［2-6］。目前報(bào)道該植物含有不飽和脂肪酸、聚炔類(lèi)化合物等。但該植物中皂苷類(lèi)化學(xué)成分尚未有報(bào)道，本文對(duì)采自美國(guó)阿拉斯加的刺人參葉的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究，分離得到了正二十九烷醇（Ⅰ），正二十二烷酸（Ⅱ），3α-羥基羽扇豆-20（29）-烯-23，28-二酸（Ⅲ）和齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷（Ⅳ）。這4種化合物均為首次從該植物中分離得到。

1 儀器、材料與試劑

核磁共振波譜儀：BRUKER-ARX-500；ESI-MS：Agilent1100 LC／MSD Trap-SL spectrometer（USA）；制備HPLC系統(tǒng)采用HITACHI 7100制備型高效液相色譜儀，YMC-Pack ODS-A柱（250mm×10mm，5μm）；柱色譜及TLC所用硅膠（青島海洋化工廠）；ODS（日本Fuji Sylisia化學(xué)品公司）；甲醇、三氯甲烷為分析純。

2 提取與分離

北美刺人參葉于2007年9月采自美國(guó)Homer AK，由美國(guó)阿拉斯加植物資源中心（Alaska Plant Material Center，Butte，Alaska，USA）主管David Smith和Stoney J.wright鑒定。取北美刺人參干燥葉（4.5kg），粉碎成粗粉，用60%乙醇水溶液回流2h，提取2次，合并提取液，回收乙醇，濃縮得浸膏229g。將總浸膏用蒸餾水稀釋成1.5L，依次用石油醚、三氯甲烷、正丁醇萃取。正丁醇萃取物經(jīng)硅膠柱色譜，用三氯甲烷-甲醇（100∶1～1∶1）梯度洗脫，得10個(gè)洗脫組分。組分1經(jīng)三氯甲烷-甲醇（100∶1）分離純化，甲醇重結(jié)晶得到化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ。組分8經(jīng)三氯甲烷-甲醇（3∶1）洗脫，ODS柱HPLC（80%甲醇-水）分離和純化，得化合物Ⅳ。

3 鑒定

3.1 化合物Ⅰ

白色結(jié)晶（三氯甲烷），mp94～95℃。ESI-MS：m／z424［M］＋，分子式為C29H60O。1H-NMR（C5D5N，500MHz）δ0.88（1H，t，J＝6.3Hz）提示為CH3信號(hào)；δ1.33（50H，br.s）提示為25個(gè)CH2重疊氫信號(hào)；δ1.53（2H，m，J＝6.3Hz）和δ1.77（2H，p，J＝6.3Hz），推測(cè)為CH2-CH2CH2-結(jié)構(gòu)片段；δ3.90（2H，t，J＝6.3Hz）提示有CH2-CH2-OH片段。13CNMR（C5D5N，500MHz）δ62.2的信號(hào)提示該化合物有一連氧碳；δ33.8，32.1，30.1，30.0，29.9，26.6，22.9提示應(yīng)存在多個(gè)亞甲基碳信號(hào)；δ14.3提示該化合物有一甲基信號(hào)。故推測(cè)該化合物為飽和脂肪醇類(lèi)化合物。其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］對(duì)照一致，鑒定該化合物為正二十九烷醇（1-nonacohol）。

3.2 化合物Ⅱ

白色結(jié)晶（三氯甲烷），mp85～86℃。ESI-MS：m／z340［M］＋，分子式為C22H44O2。1H-NMR（C5D5N，500MHz）δ0.88（1H，t，J＝6.8Hz）提示為CH3；δ1.25（36H，br.s）提示為18個(gè)CH2重疊氫信號(hào)；δ1.63（2H，p，J＝7.5Hz）和δ2.34（2H，t，J＝7.5Hz）推測(cè)含有CH2-CH2CH2-結(jié)構(gòu)片段。13C-NMR譜（C5D5N，500MHz）δ178.9推測(cè)該化合物含有-COOH，δ33.9，31.9，29.7，29.6，29.5，29.4，29.3，29.1，24.7，22.7提示應(yīng)存在多個(gè)亞甲基碳信號(hào)；δ14.1提示該化合物有一甲基。故推測(cè)該化合物為飽和脂肪酸類(lèi)化合物。根據(jù)NMR波譜數(shù)據(jù)結(jié)合ESI-MS給出的分子離子峰，鑒定該化合物為正二十二烷酸（docosanic acid）。

3.3 化合物Ⅲ

白色結(jié)晶（甲醇），mp260～262℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，Molish反應(yīng)呈陰性，表明該化合物為三萜類(lèi)成分。ESI-MS：m／z486［M］＋（C30H46O5）。1H-NMR（C5D5N，500MHz）給出了5個(gè)甲基單峰，分別為δ0.94，0.94，1.12，1.46，1.78，以及兩個(gè)烯氫信號(hào)δ4.77（1H，s）和δ4.93（1H，d，J＝1.9Hz），進(jìn)一步說(shuō)明該化合物為三萜類(lèi)化合物。13C-NMR（C5D5N，500MHz）給出30個(gè)碳信號(hào)，其中低場(chǎng)處δ179.6，178.6提示該化合物含有兩個(gè)羧基，同時(shí)δ151.4和109.9的兩個(gè)烯碳原子說(shuō)明該化合物為羽扇豆二酸類(lèi)化合物。詳細(xì)的13C-NMR波譜數(shù)據(jù)如下：δ179.6（C-23），178.6（C-28），151.4（C-20），109.9（C-29），73.0（C-3），56.7（-17），52.1（C-4），51.1（C-9），49.3（C-18），47.8（C-19），45.1（C-5），43.0（C-14），41.8（C-8），38.7（C-13），37.6（C-10），37.5（C-22），34.8（C-7），33.1（C-1），32.9（C-16），31.3（C-21），30.3（C-15），26.2（C-12），26.1（C-2），21.9（C-11），21.1（C-6），19.5（C-30），18.0（C-24），16.8（C-25），16.8（C-26），14.9（C-27）。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻(xiàn)［8］對(duì)照，基本一致，鑒定該化合物為3α-羥基羽扇豆-20（29）-烯-23，28-二酸［3α-hydroxy-lup-20（29）-en-23，28-dioic acid］，化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

3.4 化合物Ⅳ

白色結(jié)晶（甲醇），mp264～266℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性，表明該化合物為三萜皂苷類(lèi)成分。ESI-MS：m／z618［M］＋（C36H58O8）。1H-NMR（C5D5N，500MHz）給出了7個(gè)甲基峰信號(hào)，分別為δ0.82，0.96，0.99，0.99，1.02，1.33，1.33；13C-NMR（C5D5N，500MHz）給出36個(gè)碳信號(hào)，其中低場(chǎng)處δ180.2，172.3為兩個(gè)羰基信號(hào)，δ144.9和122.6為兩個(gè)烯碳信號(hào)，說(shuō)明該化合物為齊墩果酸型化合物。此外，δ107.3，75.6，78.2，73.5，77.9，172.3 6個(gè)碳信號(hào)提示該化合物含有一葡萄糖醛酸。C-3向低場(chǎng)位移至δ89.1，說(shuō)明該碳與葡萄糖醛酸相連。詳細(xì)的13CNMR波譜數(shù)據(jù)如下：δ180.22（C-28），172.3（C-6′），144.9（C-13），122.6（C-12），107.3（C-1′），89.1（C-3），78.2（C-3′），77.9（C-5′），75.6（C-2′），73.5（C-4′），55.8（C-5），48.0（C-9），46.7（C-17），46.5（C-19），42.2（C-14），42.0（C-18），39.8（C-8），39.6（C-4），38.7（C-1），37.0（C-10），33.3（C-21），33.2（C-29），32.1（C-7），30.9（C-20），30.0（C-22），28.4（C-15），28.2（C-23），26.7（C-2），26.2（C-27），23.8（C-11），23.8（C-30），23.8（C-16），18.5（C-6）17.4（C-26），17.0（C-24），15.2（C-25）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］對(duì)照基本一致，鑒定該化合物為齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸（oleanolic acid-3-O-β-D-glucuronopyranoside），化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

圖1 化合物Ⅲ和Ⅳ的結(jié)構(gòu)

［1］Lantz T，Swerhun K，Turner N.Devil’s Club（Oplopanax horridus）：An Ethnobotanic ReviewHerbal Gram［J］.American Botanical Council，2004，62：33-48.

［2］M cCutcheon AR，Ellis SM，Hancock REW，et al.Antifungal screening of medical p lants of the British Columbia native peop les［J］.J Ethnopharmacol，1994，44：157-169

［3］McCutchen AR，Robers TE，Gibbons E，et al.Antiviral screening of British Columbia medicinal plants［J］.JEthnopharmacol，1995，49：101-110

［4］Kobaisy M，Abramowski Z，Lermer L，et al.Antimycobacterial polyynes of Devil＇s Club（Oplopanax horridus），a North American native medicinal plant［J］.J Nat Prod，1997，60（11）：1210-1213.

［5］Tai J，Cheung S，Cheah S，et al.In vitro anti-proliferative and antioxidant studies on Devil′s clubOplopanax horridus［J］.J Ethnopharmacol，2006，108（2）：228-235.

［6］Inui T，Wang Y，Deng S，et al.Counter-current chromatography based analysis of synergy in an anti-tuberculosis ethnobotanical［J］.JChromatogr A，2007，1151（1-2）：211-215.

［7］林佳，郝小江，梁光義，等.小花青風(fēng)藤化學(xué)成分的研究［J］.中草藥，1999，30（5）：334-335.

［8］Adam G，Lischewski M，Phietet HV，et al.3α-hydroxy-lup-20（29）-ene-23，28-dioic acid fromSchefflera octophylla［J］.Phytochemistry，1982，21：1385-1387.

［9］Chen Y，Chiu MH.Cucuribitacin and triterpenoid glycosides fromhemsleya giganty［J］.Chin chem letters，2003，14（5）：475-478.

Study on Chem ical Constituents from Leaves of Devil′s Club

Liu Peipei1，Dou Deqiang1，David C Simith2
（1.College of Pharmacy，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian Liaoning11660，China；2.Green Gold Inc.Alsaka，USA）

Objective：To study the chemical constituents of n-butanol extracts from leaves of Devil′s club［Oplopanax horridus（Sm.）］.MethodsVarious chromatographic methods were applied to isolate pure compounds and their structureswere elucidated by spectroscopicmethods.ResultsFour compounds were isolated and identified as 1-nonacohol（Ⅰ），docosanic acid（Ⅱ），3α-hydroxy-lup-20（29）-en-23，28-dioic acid（Ⅲ）and oleanolic acid-3-O-β-D-glucuronopyranoside（Ⅳ）.ConclusionAbove all compounds were isolated from Devil′s club［Oplopanax horridus（Sm.）］.for the first time.

Oplopanax horridus；1-nonacohol；Docosanic acid；Lupane；Oleanolic acid

*竇德強(qiáng)，E-mail：doudeqiang2003＠yahoo.com.cn

2010-01-13）