南敏倫 趙雪嬌 張 玲 赫玉芳

吉林天藥現(xiàn)代中藥科技有限公司（130012）

尾葉香茶菜（Rabdosia excisa）系唇形科香茶菜屬植物，又名龜葉草、狗日草、野蘇子等，全草入藥，性味苦涼，具有清熱解毒、健胃活血之功效，主治胃炎 腹脹、經(jīng)閉、癌癥初期，蛇咬傷等[1]。在朝鮮多被用來治療傷風(fēng)感冒和咽喉腫痛。尾葉香茶菜的植物資源分布很廣，主要分布在我國東北、朝鮮、俄羅斯的遠東地區(qū)。全草高1m左右，根莖粗大，直徑0.8～1.5cm，密生須根。莖方柱形，直徑0.4～0.6cm，黃褐色，略帶紫色，微被柔毛，質(zhì)脆易折，斷面具白色髓酆。對生葉片多卷縮或破碎，水浸展開后完整者為寬卵形，先端深凹，凹中有長尖尾狀頂齒，葉緣具粗鋸齒，葉基部寬楔形，下延至葉柄。偶見花和果，氣微，味苦涼[2]。近年來國內(nèi)學(xué)者對該屬的化學(xué)成分研究較多，從尾葉香茶萊中分離出二萜類苦味成分，藥理實驗證明，對體外艾氏癌細胞顯示細胞毒作用。吉林大學(xué)桂明玉等從尾葉香茶菜中分離得到4個貝殼杉型二萜類新化合物exeisanin H、I、J、K及8個貝殼杉型二萜類已知化合物。二萜類化合物為香茶菜屬植物典型特征性成分，具有抗腫瘤、抗菌消炎、抗氧化及保護心血管等作用[3-7]。還沒有人對揮發(fā)油進行研究，本研究以其全草為材料，采用二氧化碳超臨界萃取法研究揮發(fā)油的化學(xué)成分，目的是為開發(fā)新的藥物資源，擴大藥用部位及選育新品種提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 GC-MS條件

美國HP6890A-5973氣相色譜質(zhì)譜儀聯(lián)用儀，G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。HP-1（30mm×0.25mm，0.25μm）彈性石英毛細管柱；載氣為高純氦氣，載氣流量1.0mL/min；進樣口溫度280℃；分流比50∶1；升溫程序：起始柱溫60℃，維持3min，再以6℃/min升溫至300℃；離子源為EI源，離子源溫度200℃；接口溫度280℃；連接桿溫度200℃；電離電壓70eV；發(fā)射電流34.6A；掃描范圍m/z 20～500，掃描速度2000amu/s。

尾葉香茶菜于2008年8月17日采自吉林省煙筒山大荒山，自然陰干后放蔭涼通風(fēng)處。經(jīng)吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院嚴仲凱研究員鑒定為尾葉香茶菜（Rabdosia excisa）的全草。

1.2 方法

1.2.1 揮發(fā)油的制備

尾葉香茶菜粉碎，20～80目中間的藥材粉，應(yīng)用CO2超臨界萃取裝置（南通華安超臨界萃取有限公司）分離揮發(fā)性物質(zhì)，得總揮發(fā)油粗品，用10倍量的水稀釋，用相同體積的乙醚萃取5次，合并乙醚液，用無水硫酸鈉脫水，低溫揮干乙醚，得到特殊香味的淡黃色透明油狀物, 揮發(fā)油得率為0.211%，低溫4℃密封保存?zhèn)溆谩?/p>

取一定量的揮發(fā)油提取物，用乙酸乙酯溶解，應(yīng)用氣質(zhì)連用儀（美國HP6890A-5973氣相色譜質(zhì)譜儀聯(lián)用儀）進行成分測定，通過比對標準譜庫確定其成分。

1.2.2 揮發(fā)油化學(xué)成分分析

圖1 尾葉香茶菜揮發(fā)油總離子色譜圖

取提取的揮發(fā)油，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進行分析鑒定。通過通過鑒定，明確了該植物揮發(fā)油的主要成分及含量，為該植物進一步有效地開發(fā)利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)，對推動該植物的研究具有重要意義。筆者認為，尾葉香茶菜是否具有其他的藥用價值的重要資源，今后有待于深入研究。本研究結(jié)果將為進一步開發(fā)該植物提供重要理論依據(jù)。

在實驗中，我們也用了水蒸氣蒸餾的辦法提取揮發(fā)油，結(jié)果表明超臨界萃取法優(yōu)于水蒸氣蒸餾法，主要原因為超臨界萃取法萃取能力強，萃取效率高，有利于提高產(chǎn)品和資源利用率，而且提取時間短、耗能低[8]。水蒸氣蒸餾法此法雖簡單，但受熱溫度較高，有可能使揮發(fā)油的某些成分發(fā)生分解，導(dǎo)致提取得率較低，同時可以使淀粉粒等物質(zhì)，在長時間G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，檢索NIST98譜圖庫，并分別與峰索引及EPA/NIH質(zhì)譜圖集的標準譜圖進行對照、復(fù)合，再結(jié)合有關(guān)文獻進行人工譜圖解析，確定其揮發(fā)油中的各個化學(xué)成分。按峰面積歸一化法進行定量分析，分別求得各化學(xué)成分在尾葉香茶菜揮發(fā)油中的相對百分含量。

表1 尾葉香茶菜揮發(fā)油化學(xué)成分及其含量

2 結(jié) 果

對尾葉香茶菜揮發(fā)油的GC-MS分析，測得揮發(fā)油氣相色譜共有24個峰，總離子色譜圖見圖1；共鑒定出15個化合物，利用面積歸一法計算各化合物相對含量，鑒定出化合物含量占總揮發(fā)油的74.69%，化學(xué)成分及相對含量結(jié)果見表1。

3 結(jié)論與討論

分析結(jié)果表明，尾葉香茶菜所含揮發(fā)油成分主要有15種。揮發(fā)油化學(xué)成分以5β，11α-11-羥基-3，20-孕甾二酮（相對含量為19.26%），5-α-12，20-孕甾二酮（17.13%），[1R-（1α，4aβ，10aα]-7-（1-甲乙基）-1，4-二甲基-1，2，3，4，4a，9，10，10a-八氫-1-菲甲醛（12.67%），4-二烯-3，11-雄甾二酮（5.08%）為主，占總揮發(fā)油成分的49.06%。在檢測的化合物中，孕甾二酮占總揮發(fā)油的36.39%，酸類化合物占13.17%，醛類化合物占13.96%。經(jīng)文獻檢索，所有化合物均首次從該植物中檢出。納智研究了疏花毛萼香茶菜的揮發(fā)油成分、姚煜研究了線紋香茶菜揮發(fā)油化學(xué)成分、高幼衡研究了顯脈香茶菜葉揮發(fā)油成分、趙玉蘭研究了藍萼香茶菜的揮發(fā)油化學(xué)成分，但是與我們研究的尾葉香茶菜的揮發(fā)油化學(xué)成分有很大的區(qū)別。的加熱蒸餾過程中易與水蒸氣、揮發(fā)油一起被蒸餾出，造成提取的揮發(fā)油中含有大量的泡沫，油水易形成乳濁液，難于分層；并且加熱時間過長可能引起其發(fā)生分解與轉(zhuǎn)化，影響其功效。為了盡量保證揮發(fā)油有效成分的完整性，運用二氧化碳超臨界萃取技術(shù)提取揮發(fā)油可能解決上述問題，綜上所述可知二氧化碳超臨界萃取技術(shù)比傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾法有省時、能耗低、收率高、純度高等優(yōu)點，值得推廣應(yīng)用。

[1]嚴仲鎧,李萬林.中國長白山藥用植物彩色圖志[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:367.

[2]王迪等,尾葉香茶菜的生藥學(xué)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,1998,6(5):30-31.

[3]龐勁松,于倩,劉寶.尾葉香茶菜化學(xué)成分及藥理作用研究[J].東北師大學(xué)報(自然科學(xué)版),2005,37(4):94-97.

[4]孫漢董,許云龍,姜北.香茶菜屬植物二萜化合物[M].北京:科學(xué)出版社,2001:114.

[5]吳桂凡.唇形科香茶菜屬植物化學(xué)成分研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2003,21(6):1012-1013.

[6]張崇禧,王雪.長白山地區(qū)尾葉香茶菜化學(xué)成分的研究[J].中成藥,2008,30(1):120-104.

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[8]謝瑩,杭太俊,張正行,等.4種姜黃屬藥材揮發(fā)油中莪術(shù)醇含量比較[J].中草藥,2001,32(7):600.