武漢新華揚生物股份有限公司 張 芹 曾福海 鄒增丁 程時軍

植酸酶應(yīng)用于飼料中已有多年的歷史，隨著對植酸酶作用機理及使用方法研究的深入，植酸酶在飼料中的使用也越來越廣泛。但由于植酸酶本身的耐熱性問題，高溫制粒料中使用植酸酶仍有一定的局限性及風險。酶通常在干燥的狀態(tài)下較穩(wěn)定，能保留較高的酶活，但在飼料高溫制粒的濕熱環(huán)境中較易變性失活，因而限制了植酸酶在顆粒料中的應(yīng)用。因此，本研究在低磷日糧中添加耐熱植酸酶及普通植酸酶，探討其對肉雞生產(chǎn)性能及血清、骨骼中相關(guān)指標的影響，為在顆粒飼料中合理選用植酸酶提供指導。

1 材料與方法

1.1 植酸酶及酶活 普通植酸酶及耐熱植酸酶均來源于武漢新華揚生物股份有限公司，酶活均為5000 U/g。

植酸酶酶活定義：在37℃，pH為5.0的條件下，每分鐘從5.0 mmol/L的植酸鈉溶液中釋放出1 μmol的無機磷所需的植酸酶量為1個酶活單位（U）。

1.2 日糧組成及試驗設(shè)計 選取1日齡 （均重36.0 g左右）健康艾維茵肉仔雞192只，隨機分成4組，每組4個重復，每重復12羽?；\養(yǎng)，自由飲水和自由采食，試驗各組飼養(yǎng)管理條件一致。從1日齡開始，飼喂至42日齡，分1～21日齡和22～42日齡兩階段飼養(yǎng)。試驗于湖北團風縣國家級原種場示范養(yǎng)雞場進行。試驗日糧在武漢工業(yè)學院飼料科學系制粒，制粒溫度80℃左右。各組試驗日糧設(shè)計見表1。正對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表2，負對照組在正對組的基礎(chǔ)上降低0.11%有效磷，其他兩組在負對照組基礎(chǔ)上分別添加1000 U/kg普通植酸酶和500 U/kg耐熱植酸酶。

1.3 試驗指標 生產(chǎn)性能：在21日齡和42日齡清晨以重復為單位稱空腹肉雞及剩余料重量（前一晚20∶00開始禁食12 h，僅供飲水），記錄并計算各重復平均日增重、平均日采食量和料重比。

表1 試驗設(shè)計

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

血鈣、血磷、堿性磷酸酶：在42日齡清晨每重復選取1只母雞，空腹稱重及翅靜脈采血，測定血清中鈣、磷及堿性磷酸酶活性。堿性磷酸酶活性在團風縣人民醫(yī)院檢測，血清中鈣、磷含量在廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院檢測。

脛骨鈣、磷：脛骨中鈣及磷的含量在湖北省飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗站進行檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 酶制劑對1～21日齡肉雞生產(chǎn)性能的影響見表3。

表3 植酸酶對1～21日齡肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可見，與正對照相比，負對照組日采食量降低 12.11%（P<0.05），C組日采食量降低3.65%，C、D組與負對照相比，日采食量分別升高9.63%（P>0.05）和 12.72%（P<0.05），D 組日采食量較C組提高2.81%；各組日增重與正對照相比，負對照降低 16.94%（P<0.01），C組降低7.27%（P<0.05），D組日增重與正對照相比差異不顯著，C、D組日增重較負對照分別升高11.64%（P<0.01）、19.06%（P<0.01），D 組日增重較C組升高6.64%（P<0.05）；各組料重比與正對照相比，D組相同，B、C組分別提高5.78%和 3.47%，均未形成顯著差異（P>0.05），C、D 組與B組相比分別降低2.19%和5.46%。

2.2 植酸酶對22～42日齡肉雞生產(chǎn)性能的影響見表4。

表4 植酸酶對22～42日齡肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表4可見，各組后期日采食量與正對照相比，除D組升高外，負對照及C組均降低，但都未形成顯著差異（P>0.05），C、D組與負對照相比，日采食量分別提高0.85%和2.60%，D組日采食量較C組升高（P>0.05）；各組日增重與正對照相比，負對照及C組均降低，其中負對照降低5.56%，D組有一定程度升高，但差異不顯著（P>0.05），C、D組與負對照相比分別增加4.36%和7.86%，D組較C組升高，差異不顯著（P>0.05）；與正對照相比，B、C組料重比均升高，D組降低，差異均不顯著（P>0.05），與負對照相比，C、D 兩加酶組料重比均降低（P>0.05）。

2.3 植酸酶對1～42日齡肉雞生產(chǎn)性能及跛腿的影響 見表5。

表5 植酸酶對1～42日齡肉雞生產(chǎn)性能及跛腿的影響

由表5可見，低磷日糧對1～42日齡肉雞平均日采食量無顯著影響（P>0.05），但負對照組及C組日采食量與正對照相比有下降的趨勢；各組日增重與正對照相比，負對照組降低9.93%（P<0.01），加酶組差異不顯著（P>0.05），加酶組與負對照相比，D組全期日增重較負對照極顯著提高（P<0.01），D 組較 C 組提高 4.48%（P>0.05）；各組全期料重比與正對照比較，差異均不顯著（P>0.05），加酶組與負對照組比較，D組顯著降低，C組差異不顯著，D組較C組降低2.35%；正對照及D組無跛腿現(xiàn)象，B組及C組跛腿個數(shù)分別為3只和1只。

2.4 植酸酶對42日齡肉雞血清生化指標的影響見表6。

表6 植酸酶對42日齡肉雞血清生化指標的影響

由表6可見，負對照、加酶組血清中磷含量與正對照相比，均有一定程度降低，但均未形成顯著差異（P>0.05），C、D 組與負對照相比，血清中磷含量均有一定程度升高，但均未形成顯著差異（P>0.05）；各組血清中鈣含量與正對照相比差異均不顯著（P>0.05），除 B組外，均有一定程度下降，C、D組與負對照相比均下降，但差異不顯著（P>0.05）；各組血清中堿性磷酸酶活性與正對照相比均升高，但差異不顯著（P>0.05），與負對照相比，植酸酶組血清中堿性磷酸酶活性均下降，差異不顯著（P>0.05）。

2.5 植酸酶對42日齡肉雞脛骨中鈣磷含量的影響 見表7。

表7 植酸酶對42日齡肉雞脛骨中鈣磷含量的影響 %

由表7可見，與正對照相比，各試驗組脛骨中鈣含量均降低，其中負對照組降低32.98%（P<0.01），C、D 組與正對照差異不顯著（P>0.05），與負對照相比，兩植酸酶組脛骨中鈣含量均升高，其中D組（耐熱植酸酶組）較負對照升高26.70%，差異顯著（P<0.05）；與正對照相比，各試驗組脛骨中磷含量均降低，其中負對照降低27.83%（P<0.01），C、D 組與正對照差異不顯著（P>0.05），與負對照相比，兩植酸酶組脛骨中磷含量均升高，其中C、D組 （耐熱植酸酶組）較負對照分別升高18.47%（P>0.05）和 26.91%（P<0.05）。

3 討論

3.1 低磷日糧對肉雞生產(chǎn)性能的影響 本試驗通過減少日糧中磷酸氫鈣添加量以降低有效磷的含量，隨之減少的鈣含量及多出的配方空間分別通過添加石粉及沸石粉進行補充。研究表明，將1～21日齡肉雞日糧有效磷含量降低至0.31%時，肉雞的采食量、日增重與有效磷含量為0.42%的正對照組相比分別降低12.11%（P<0.05）和 16.94%（P<0.01），料重比增加 5.78%。將22～42日齡肉雞日糧有效磷含量降低到0.27%時，肉雞的各項生產(chǎn)性能指標均低于正對照組。從整個試驗期間來看，低磷日糧顯著抑制了肉雞的生長，該結(jié)果與朱連勤（2003）、馮定遠等（2005）的報道一致。Carew 等（1985）研究了低磷日糧對萊航公雞生產(chǎn)性能的影響，發(fā)現(xiàn)受試雞生長緩慢是雞采食量降低的結(jié)果。這可能是由于低磷日糧改變了垂體的代謝，使甲狀腺增大和血清生長激素降低，進而降低受試雞的食欲，最終導致動物生產(chǎn)性能的降低。

3.2 植酸酶對肉雞生產(chǎn)性能的影響 近年來，大量的研究表明，在低磷日糧中添加植酸酶能顯著提高肉仔雞的采食量及體增重，降低料重比。Selle（2003）報道，在肉仔雞日糧中添加500 U/kg微生物植酸酶，平均體重從809 g增到854 g，增加了5.6%，飼料利用率提高了5.4%。樓洪興（2000）在1～21日齡肉仔雞玉米-糠麩-豆粕型日糧中添加500～1000 U/kg植酸酶，增重極顯著提高了9.76%～17.75%。本研究與上述報道相一致，在低磷日糧中添加普通植酸酶及耐熱植酸酶均提高了肉仔雞的生產(chǎn)性能，其中耐熱植酸酶組與正常磷含量的正對照組各項生產(chǎn)性能指標均無顯著差異（P>0.05），普通植酸酶組各項生產(chǎn)性能指標略低于耐熱植酸酶組，但差異不顯著（P>0.05）。

植酸酶降解植酸鹽的同時釋放出鈣、磷等礦物質(zhì)元素，以及蛋白質(zhì)、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)，使得可供畜禽利用的礦物質(zhì)元素、蛋白質(zhì)和氨基酸等營養(yǎng)元素增多，因而畜禽的生長性能得到提高。許多研究表明，低鈣、低磷有利于植酸酶作用的發(fā)揮（Inkee，2003；張克英等，2001；Setastian，1996），本試驗通過減少磷酸氫鈣的添加量來減少日糧磷水平，但鈣含量未做改變，因而，如何調(diào)整鈣磷比，達到植酸酶的最佳作用效果，還有待進一步的量化研究。

植酸酶是一種蛋白質(zhì)，因而高溫制粒過程中的損失在所難免，這也是限制目前植酸酶在高溫制粒料中使用的一個最主要因素。通常酶在干燥的情況下，結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，具有一定的耐熱性，但在制粒過程中，在高溫蒸汽的作用下，酶較易變性失活。本研究中，耐熱植酸酶組獲得了與正對照相近的生產(chǎn)性能，說明在該肉雞顆粒料的加工過程中，高溫調(diào)制制粒并沒有明顯影響到耐熱植酸酶的活性。

3.3 植酸酶對肉雞血清生化指標及脛骨鈣、磷含量的影響 檢測植酸酶對血清中礦物質(zhì)元素含量的影響是衡量植酸酶改善動物礦物質(zhì)元素吸收利用最可行、最敏感的手段之一（Mitchell，1996）。 馮定遠等（2005）研究表明，低磷會影響血液中重要的礦物質(zhì)元素的含量，尤其是磷。本研究發(fā)現(xiàn)，降低日糧磷的含量，血清中磷的含量也隨之降低，添加植酸酶能夠提高血清中磷含量；而血清中鈣的含量在低磷組及植酸酶組均變化較小。血清中磷含量的降低可能與日糧中可利用磷水平低、動物不能吸收足夠的磷有關(guān)。本試驗中，低磷組日糧鈣含量與正對照相同，可能是導致各組血鈣含量差異較小的原因。

本研究中，低磷日糧血清中堿性磷酸酶活性較正對照組大幅升高，而植酸酶的添加則降低了血清中堿性磷酸酶的活性。該結(jié)果與馮定遠等（2005）、蔡青和等（2004）和蘇曉鷗（1997）的報道一致。堿性磷酸酶活性的變化，也反映了植酸酶的添加確實能改善日糧中植酸磷的利用。血清堿性磷酸酶活性受血磷濃度的影響，血磷濃度降低時，破骨細胞活動增強，使骨鹽降解并釋放入血，同時腎臟對磷的重吸收增強，使血中游離鈣和磷濃度均升高，而血鈣升高則引起降鈣素的分泌，使成骨細胞活動增強，堿性磷酸酶釋放量增加，以降解焦磷酸，破壞骨組織附近Ca2+和PO43-過飽和狀態(tài)，使之沉積，因此，血清堿性磷酸酶活性升高，說明動物處于缺磷狀態(tài)。

脛骨灰分中礦物質(zhì)元素含量是衡量畜禽骨骼礦物元素儲備狀況的主要參數(shù)。當畜禽由飼料中攝入鈣、磷含量不足時，鈣磷就從骨組織中動員出來，以滿足機體的需要，導致骨中鈣、磷含量較低。飼料中添加植酸酶能促進鈣、磷等礦物質(zhì)元素的吸收利用，從而提高脛骨中鈣、磷的含量。程茂基等（1999）研究表明，在低鈣磷含量的日糧中添加植酸酶，脛骨中鈣、磷含量顯著提高。本研究表明，在低磷日糧中添加植酸酶，提高了脛骨中鈣、磷的含量，與上述報道結(jié)果一致，說明植酸酶的添加促進了機體對鈣、磷的吸收利用。另外，耐熱植酸酶組脛骨中鈣、磷的含量均高于普通植酸酶組，說明耐熱植酸酶組增強了對鈣、磷的吸收利用，這可能是由于在飼料高溫制粒過程中，耐熱植酸酶存留了更多的酶活。

4 小結(jié)

低磷日糧顯著降低了肉雞的生產(chǎn)性能，植酸酶的添加均提高了肉雞的采食量及日增重，降低了料重比，且耐熱植酸酶較普通植酸酶獲得了更好的生產(chǎn)性能；低磷日糧降低血清及骨骼中鈣、磷含量，提高血清堿性磷酸酶活性，而植酸酶的添加提高了血清及骨骼中鈣、磷含量，降低堿性磷酸酶活性。

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