吳利鋒 劉靜波 （山東省濟寧市畜牧獸醫(yī)局 272037）

2010年7月份，一5000只規(guī)模蛋雞場發(fā)生疫病，每日死亡50只左右，初步診斷為大腸桿菌病，但經(jīng)多種藥物治療效果不佳，懷疑可能有流感，隨送實驗室進行診斷。經(jīng)診斷，禽流感RT-PCR實驗陰性，細菌學診斷為大腸桿菌病。藥敏實驗顯示，對多種藥物耐藥，因此造成臨床上治療效果不佳。

1 臨床和剖解癥狀

病雞有呼吸道癥狀，呼吸時發(fā)生“咕咕”的聲音或張口呼吸，雞冠暗紫，精神沉郁，羽毛松亂，食欲下降或廢絕。剖檢見心包膜肥厚、混濁，肝臟腫大、質(zhì)脆易爛，有出血點，肝臟表面有少量白色膠狀透明膜；脾臟充血腫脹，可見到小壞點；肺臟充血或出血，有炎性病灶；氣管有黏液。

2 細菌分離和藥敏試驗

2.1 細菌分離 采集解剖病死雞肝、脾內(nèi)臟病料。無菌操作劃線接種于麥康凱瓊脂平板上37℃培養(yǎng)24h。分離菌在麥康凱瓊脂平板上形成粉紅色或紅色、光滑、圓形隆起、邊緣整齊，直徑1.5～2.5mm的小菌落。挑取菌落及病料涂片經(jīng)革蘭氏染色鏡檢，可見革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短粗桿菌，多單在，偶有2～3個菌體連在一起。如圖1。

圖1 染色鏡檢結(jié)果

由此基本可以肯定，此雞群已經(jīng)感染大腸桿菌。

2.2 藥敏試驗 為了有效控制疫病，實驗室進一步對此細菌進行了藥敏試驗。選取了呋喃妥因(呋），氧佛沙星(嗪)，阿米卡星(丁)，慶大霉素(慶)，諾氟沙星(氟)，鏈霉素(鏈)，四環(huán)素(四)，氯霉素(氯)，環(huán)丙沙星(環(huán))，頭孢曲松(菌)，卡那霉素(卡)，頭孢噻肟(肟)，共計12種藥敏片進行藥敏實驗。12種藥敏紙片均購自杭州天和微生物試劑有限公司。用無菌棉拭子蘸取稀釋液，在LB培養(yǎng)基上均勻涂抹，最后用棉簽涂抹瓊脂平板邊緣，蓋上平皿蓋，在室溫下放置5min。用無菌眼科鑷子在無菌狀態(tài)下將12種藥敏紙片貼于平板上，藥敏紙片貼完15min后將平板倒置，置37℃溫箱中培養(yǎng)16h-18h,觀察結(jié)果。結(jié)果顯示，此細菌耐藥性極強，僅對頭孢曲松和頭孢噻肟敏感，其他10種藥物都是耐藥。藥敏結(jié)果如圖2。

根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，給雞群投服頭孢曲松，病情很快得到控制。

3 禽流感RT-PCR試驗

為了排除流感的可能性，采集肝臟、脾臟、腎臟進行病原學檢測。試驗結(jié)果顯示，全部為陰性。結(jié)果如圖3。

圖3 禽流感PJ-PCR測定結(jié)果

根據(jù)試驗結(jié)果，排除了禽流感的可能。

4 討論

（1）雞大腸桿菌病是由大腸埃希氏菌的某些血清型菌株所引起的雞傳染病的總稱。不同品種不同日齡的雞都可發(fā)生。本病還常與其他疾病混合感染或繼發(fā)感染。此病的水平傳播和垂直傳播途徑及誘發(fā)因素也越來越多，特別是在集約化養(yǎng)殖場，暴發(fā)的機會不斷增加。雖然本病可以通過藥物進行治療，但由于大腸桿菌流行株廣泛存在著耐藥性，給治療造成一定的困難，往往導致較大的損失。（2）本試驗結(jié)果表明，此次分離的致病性大腸桿菌耐藥水平較高，耐藥譜較廣，對所做的12種抗生素，耐藥種類達到10種，有些藥物甚至完全沒有效果。這些耐藥性較高的抗生素主要是獸醫(yī)臨床使用頻率較高的，因此沒有能夠及時控制此次疫病。（3）應引起重視的是:獸醫(yī)臨床很少使用的呋喃妥因、氯霉素也已嚴重耐藥。表明在臨床治療和預防中存在不合理用藥的現(xiàn)象，致病性大腸桿菌對其快速適應，也提示獸醫(yī)臨床抗生素藥物的選擇要合理。（4）對一些確診的細菌性病例，一旦用藥無法控制時，及時借助實驗室，進行必要的藥敏實驗。不要盲目用藥和斷定是病毒性疾病，以免增加治療成本和延誤治療時機，進而造成嚴重的經(jīng)濟損失。