駱永年 梁 捷

黑龍江省大慶市杜爾伯特縣衛(wèi)生監(jiān)督所（166200）

隨著現(xiàn)代科技的飛速發(fā)展，臨床檢測(cè)技術(shù)也在不斷更新，正向著自動(dòng)化、快速、準(zhǔn)確的方向發(fā)展。而作為微生物學(xué)檢驗(yàn)的細(xì)菌培養(yǎng)，雖有自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)儀的開(kāi)發(fā)應(yīng)用，但仍不能向其它檢驗(yàn)項(xiàng)目 那樣快速、準(zhǔn)確地回報(bào)結(jié)果。細(xì)菌培養(yǎng)快速慢、結(jié)果準(zhǔn)確度不高仍然是微生物學(xué)檢驗(yàn)的兩大難題。然而，注重細(xì)菌培養(yǎng)前標(biāo)本涂片鏡檢，對(duì)評(píng)價(jià)標(biāo)本留取質(zhì)量，快速提供信息診斷信息，指導(dǎo)細(xì)菌培養(yǎng)方向，加強(qiáng)質(zhì)量控制都有著極為重要的意義。可有效地提高細(xì)菌培養(yǎng)速度和準(zhǔn)確性。

1 培養(yǎng)前標(biāo)本留取質(zhì)量的評(píng)價(jià)

標(biāo)本留取質(zhì)量，直接影響細(xì)菌的培養(yǎng)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

如標(biāo)在留取過(guò)程中被其它部位的常在菌、定植菌群污染，還進(jìn)行培養(yǎng)鑒定，就會(huì)導(dǎo)致病源學(xué)診斷上錯(cuò)誤，誤導(dǎo)臨訂治療。所以細(xì)菌培養(yǎng)前必需作涂片鏡檢來(lái)評(píng)價(jià)標(biāo)本留取質(zhì)量，只有合格的標(biāo)本才能進(jìn)一步進(jìn)行培養(yǎng)鑒定。

1.1 自然留取的尿液標(biāo)本應(yīng)以不高離心濕片直接鏡檢進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，觀察10個(gè)以上油鏡視野，平均每個(gè)視野有1個(gè)以上細(xì)菌者，說(shuō)明感染的可能性大，作進(jìn)一步培養(yǎng)。還要觀察細(xì)菌的種類，如果有3種以上細(xì)菌同時(shí)存在，則標(biāo)本可能被污染，應(yīng)重新留取。

1.2 對(duì)于痰標(biāo)本，應(yīng)在培養(yǎng)前作革蘭染色鏡檢評(píng)價(jià)留取質(zhì)量，基標(biāo)準(zhǔn)為：扁平上皮細(xì)胞≤10個(gè)/低倍鏡視野，白細(xì)胞≥25個(gè)/低倍鏡視野，細(xì)菌形態(tài)在兩種以下為合格痰標(biāo)本，另外有些標(biāo)本白細(xì)胞數(shù)量上沒(méi)有≥25個(gè)/低倍鏡視野，但見(jiàn)到了明顯形態(tài)，染色特征的致病菌，如流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌等，應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)并向臨床回報(bào)涂片檢查結(jié)果。注重痰標(biāo)本培養(yǎng)前質(zhì)量評(píng)價(jià)，可大大提高培養(yǎng)陽(yáng)性率和結(jié)果的可靠性。

1.3 對(duì)于深部位的傷口、中耳、子宮內(nèi)膜感染留取的膿汁、分泌物標(biāo)本，出應(yīng)進(jìn)行涂片染色質(zhì)量評(píng)價(jià)。如有大量磷狀上皮存在則說(shuō)明留取過(guò)程中被污染，不能再進(jìn)行培養(yǎng)。

2 為臨床直接提供診斷信息

根據(jù)標(biāo)本來(lái)源部位和臨訂懷疑診斷疾病，培養(yǎng)菌標(biāo)本涂片做適當(dāng)染色鏡檢，對(duì)急性感染癥的快速診斷有重要的實(shí)用價(jià)值。

2.1 臨床懷疑細(xì)菌性腦膜炎患者的腦脊液標(biāo)本，離心后沉淀做涂片革蘭染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)有典型形態(tài)、染色特征的腦膜炎雙球菌、新型隱球、流感嗜血桿菌等，可直接向臨床回報(bào)鏡檢所見(jiàn)細(xì)菌的形態(tài)與染色特征，并初步懷疑是哪種細(xì)菌。

2.2 陰道、尿道、前列腺分泌物或膿法標(biāo)本培養(yǎng)前做革蘭染色鏡檢，如見(jiàn)到白細(xì)胞內(nèi)，外有典型的革蘭陰性腎形雙球菌，結(jié)合臨床癥狀即可快速診斷為淋病。臨床疑為真菌感染的陰道分泌物標(biāo)本培養(yǎng)前可做涂片墨法染色鏡檢察院，如在墨色背景下查到不著色有肥厚夾膜的酵母真菌，即可向臨床回報(bào)真菌的形態(tài)染色特點(diǎn)，為臨床作出快速診斷。

2.3 深部位感染標(biāo)本，在培養(yǎng)前做革蘭涂片染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)菌體淡染、染色不一的革蘭陰性桿菌、球桿菌等常為厭氧菌，結(jié)合標(biāo)本來(lái)源部位、感觀性狀（有惡臭、膿血等）向臨床回報(bào)所見(jiàn)細(xì)菌的形態(tài)，染色特性并疑為氧菌，以便臨床快速、正確選擇抗厭氧菌藥物治療。

2.4 標(biāo)本培養(yǎng)前涂片鏡檢，還可觀察到白細(xì)胞的種類與數(shù)量，如見(jiàn)到大量多形核白細(xì)胞和較多細(xì)菌則說(shuō)明是急性細(xì)菌感染，如白細(xì)胞數(shù)量較少并以單個(gè)核細(xì)胞為主則說(shuō)明為慢性感染。此住信息為臨床診斷也極為重要，應(yīng)及時(shí)回報(bào)。

3 指導(dǎo)培養(yǎng)方向，縮短培養(yǎng)時(shí)間

細(xì)菌培養(yǎng)前標(biāo)本涂片染色觀察細(xì)菌的形態(tài)，染色特點(diǎn)，結(jié)合標(biāo)本留取部位和臨床初步診斷。初步確認(rèn)是那一類細(xì)菌，并向這一類細(xì)菌方向培養(yǎng)與鑒定。可以直接選用鑒別培養(yǎng)基和專用分離培養(yǎng)基接種分離培養(yǎng)。大大縮短檢測(cè)時(shí)間，避免培養(yǎng)的盲目性。如腦脊液標(biāo)本涂片染色觀察到革蘭陰性短小桿菌，則應(yīng)疑為水磨石嗜血桿菌，直接接種到巧克力平板上培養(yǎng)。尿液標(biāo)本如涂片見(jiàn)到桿菌則直接接各在亞酸鉀平板上分離鑒定。

4 細(xì)菌培養(yǎng)質(zhì)量控制的重要手段

細(xì)菌培養(yǎng)前涂片觀察到某細(xì)菌，而培養(yǎng)結(jié)果為陰性或是培養(yǎng)生長(zhǎng)的細(xì)菌與涂片觀察到的細(xì)菌在形態(tài)和染色特點(diǎn)上不一致，不能再向臨床回報(bào)該結(jié)果，應(yīng)及時(shí)從如下幾方面查找原因：①厭氧菌標(biāo)本采集、運(yùn)送等技術(shù)操作不當(dāng)，淋球菌等脆弱細(xì)菌未及時(shí)接種培養(yǎng)，較長(zhǎng)時(shí)間放置在自然環(huán)境中都可造成細(xì)菌的死亡，而使培養(yǎng)出現(xiàn)假陰性。②已經(jīng)應(yīng)用抗生素治療的標(biāo)本中殘余抗生素抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)。③培養(yǎng)基成分比例、pH值等不能達(dá)到要求，就不利于細(xì)菌的生長(zhǎng)，甚至使細(xì)菌發(fā)生形態(tài)、染色性質(zhì)的變異，另外，培養(yǎng)基所處環(huán)境氣體成分、溫度的變化都會(huì)影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。④細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室內(nèi)消毒不徹底，用過(guò)的培養(yǎng)物和培養(yǎng)基不及時(shí)處理，操作者無(wú)菌操作觀念淡薄，可造成實(shí)驗(yàn)室內(nèi)污染。使用權(quán)得培養(yǎng)結(jié)果與涂片結(jié)果不一致。

有了培養(yǎng)前標(biāo)本涂片鏡檢，就可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，分析原因，解決處理，提高了細(xì)菌培養(yǎng)的可信度。