崔旭紅 陳 陽 李曉宇 林 俊 商晗武

（1中國計量學院生命科學學院生物計量檢驗檢疫技術實驗室，浙江杭州 310018；2江蘇吳江出入境檢驗檢疫局，江蘇吳江 215200）

三葉草斑潛蠅〔Liriomyza trifolii（Burgess）〕屬于雙翅目（Diptera）、潛蠅科（Agromyzidae）、斑潛蠅屬（Liromyza），是一種為害蔬菜、花卉等多種經(jīng)濟作物和園藝植物的重要害蟲。由于殺蟲劑的廣泛使用，三葉草斑潛蠅已對多種化學農(nóng)藥產(chǎn)生了不同程度的抗性，使其防治更加困難，篩選新型、不易產(chǎn)生抗性的殺蟲劑顯得尤為重要（Ferguson，2004）。印楝素（Azadirachtin）是從印楝（Azadirachta indica）中提取的一種四環(huán)三萜類固醇化合物，具有殺蟲范圍廣，害蟲不易產(chǎn)生抗藥性，對人畜、天敵較安全等優(yōu)點，被認為是21世紀最有發(fā)展前景的植物源農(nóng)藥。在國外，印楝素已被用于防治多種斑潛蠅，但防治效果存在一定差異（Weintraub & Horowitz，1997；AzaMet al.，2003）。三葉草斑潛蠅是我國近年來新發(fā)生的重要害蟲，國內(nèi)尚未有印楝素對其防治效果的報道。為了明確印楝素對三葉草斑潛蠅的控制作用，本試驗測定了0.5 %印楝素乳油對三葉草斑潛蠅存活和產(chǎn)卵量的影響，以期為印楝素的合理利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源、寄主植物和藥劑

試驗于2008～2009年在中國計量學院生命科學學院生物計量檢驗檢疫技術實驗室進行。

供試三葉草斑潛蠅采自本實驗室長期維持的種群。寄主植物為菜豆（Phaseolus vulgarisLinn.）品種:天馬地豆。菜豆種子經(jīng)催芽后播種，待長出2片真葉后用于種群維持和試驗。

0.5 %印楝素乳油由光明印楝產(chǎn)業(yè)開發(fā)有限責任公司生產(chǎn)，用超純水稀釋成1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg·L-15個濃度的溶液用于試驗。

1.2 試驗方法

1.2.1 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅不同蟲態(tài)存活的影響 卵:將菜豆清潔苗放入工氣候箱〔溫度（26±1）℃，相對濕度70 %±5 %，光照時間16 h/8 h（晝/夜）〕中的養(yǎng)蟲籠（30 cm×30 cm×30 cm）內(nèi)，每籠接入30對成蟲，任其取食產(chǎn)卵，24 h后驅(qū)除成蟲并將植株從籠中取出。在體視顯微鏡下用記號筆對卵進行標記，為了避免蟲口密度過大造成競爭，保持每1 cm2葉片上的卵數(shù)≤1個，多余的卵用解剖針扎死。將標記好的菜豆苗分成5組，隨后用噴霧器將稀釋的印楝素乳油溶液（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg·L-1）噴灑于植株正反葉面，直至藥液滴落。待藥液不滴后將植株重新放回人工氣候箱，2 d后開始觀察記錄卵的孵化情況，隨后每隔24 h調(diào)查1次，直至沒有卵孵化。每個處理的卵數(shù)不少于20粒。

幼蟲:將菜豆清潔苗放入養(yǎng)蟲籠中，接蟲24 h后驅(qū)除成蟲并取出植株，隨后將接好蟲的植株放入培養(yǎng)箱，待卵孵化發(fā)育至3齡幼蟲時用于試驗。幼蟲齡期參考鄭丹等（2009）的方法和葉片上潛道寬度變化情況來確定，將葉片上3齡幼蟲留下，其余蟲態(tài)用針扎死。將接好蟲的菜豆分成5組，隨后用噴霧器將稀釋好的印楝素藥液噴灑于植株正反葉面，直至藥液滴落。待藥液不滴后將植株重新放回人工氣候箱，24 h后開始觀察記錄幼蟲化蛹情況，以后每隔24 h調(diào)查1次，直到?jīng)]有幼蟲化蛹為止。每個處理的幼蟲數(shù)量不少于25頭。

蛹:隨機采集三葉草斑潛蠅蛹放入培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿底部鋪有濾紙，隨后用噴霧器將稀釋的印楝素藥液噴灑于培養(yǎng)皿內(nèi)，1 min后注意用濾紙將多余藥液吸去。24 h后開始觀察記錄蛹羽化的情況，直至沒有蛹羽化。每個處理的蛹數(shù)量不少于25頭。

以噴灑清水的處理作為空白對照。每個處理3次重復。

1.2.2 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅成蟲產(chǎn)卵量的影響 將噴灑過不同濃度印楝素藥液和清水的菜豆苗各1株隨機擺放在養(yǎng)蟲籠中，接入25對三葉草斑潛蠅成蟲（♀∶♂=1∶1），48 h后采用染色法（Parrella & Robb，1982）調(diào)查記錄每片葉上的卵量。各處理3次重復。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用統(tǒng)計軟件SPSS10.0和SPSS Inc（USA）進行數(shù)據(jù)分析。用單因素方差分析（One-way Analysis，S-N-K test）來檢驗不同處理間的差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅不同蟲態(tài)存活的影響

由表1可知，用1.25～20.00 mg·L-1的印楝素噴灑菜豆后，葉片上三葉草斑潛蠅卵的孵化率超過90.0 %，與對照差異不顯著。3齡幼蟲的死亡率隨著印楝素藥液濃度的升高迅速升高。當印楝素濃度為1.25 mg·L-1時，超過90 %的3齡幼蟲能夠正?；?，與對照差異不顯著；印楝素濃度為2.50 mg·L-1及以上時，3齡幼蟲的死亡率迅速上升；印楝素濃度為20.00 mg·L-1時，3齡幼蟲全部死亡。三葉草斑潛蠅蛹經(jīng)過印楝素處理后，死亡率迅速上升，遠高于卵和3齡幼蟲。當噴灑1.25 mg·L-1印楝素后，蛹死亡率超過70 %；經(jīng)過10.00 mg·L-1印楝素處理后，三葉草斑潛蠅的蛹全部死亡。因此，印楝素對三葉草斑潛蠅卵孵化沒有顯著影響，但對 3齡幼蟲和蛹致死作用明顯。

表1 印楝素藥液處理后三葉草斑潛蠅的死亡率和成蟲產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵忌避率

2.2 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅成蟲產(chǎn)卵量的影響

經(jīng)1.25～20.00 mg·L-1的印楝素處理后，菜豆葉片上三葉草斑潛蠅成蟲的產(chǎn)卵量顯著低于對照，且隨著印楝素濃度的增加，三葉草斑潛蠅成蟲產(chǎn)卵量呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢，印楝素對三葉草斑潛蠅雌蟲產(chǎn)卵具有明顯的忌避作用（表1）。

3 結論與討論

印楝素對三葉草斑潛蠅卵孵化沒有顯著影響，對幼蟲、蛹有明顯的致死作用，其中對蛹的致死作用大于幼蟲，這與前人對美洲斑潛蠅和南美斑潛蠅的研究結果一致（Weintraub & Horowitz，1997；Hossain，2005）。因此，根據(jù)三葉草斑潛蠅的發(fā)生狀況選擇使用印楝素的時機對提高其防治效果非常重要。

根據(jù)報道，印楝素對南美斑潛蠅產(chǎn)卵量沒有顯著影響（Weintraub & Horowitz，1997），但本試驗表明，2.50 mg·L-1的印楝素即對三葉草斑潛蠅成蟲表現(xiàn)出明顯的產(chǎn)卵忌避作用（產(chǎn)卵忌避率＞50 %）；成蟲產(chǎn)卵量隨著印楝素濃度的增加顯著下降。這可能與印楝素的施用方式有關，采用噴霧葉片的方式使用印楝素對多種害蟲的產(chǎn)卵有抑制作用，灌根的方式則產(chǎn)卵忌避較差（文吉輝 等，2007）。成蟲的產(chǎn)卵情況對害蟲后代種群發(fā)展具有重要影響，因此使用印楝素防治三葉草斑潛蠅時宜采用噴霧的方式。

文吉輝，侯茂林，盧偉，黎家文．2007．印楝素乳油不同施用方式對煙粉虱寄主選擇和產(chǎn)卵的影響．中國生物防治，23（4）:333-337.

鄭丹，崔旭紅，李志江，陳陽，商晗武．2009．三葉草斑潛蠅對6種寄主植物的選擇適應性及其與寄主化學物質(zhì)含量的關系．植物保護，36（3）:93-96.

AzaMK M，Al-Raeesi A A，Srikandakumar A，Bowers W S．2003．Control of leafMiner（Liriomyza trifoliiBurgess）on cucumber by plant extracts．Crop Research，25:567-571.

Ferguson J S．2004．Development and stability of insecticide resistance in the leafminerLiriomyza trifolii（Diptera:Agromyzidae）to cyromazine，abamectin，and spinosad．Journal of Economic Entomology，97:112-119.

Hossain MB．2005．Effects of Azadirachtin and the natural pesticides Spinosad and Avermectin on the leafMinerLiriomyza sativae（Diptera:Agromyzidae）and its parasitoids on tomatoes under protected cultivation in the huMid tropics．Germany:University of Hannover.

Parrella MP，Robb K L．1982．Technique for staining eggs ofLiriomyza trifoliiwithin chrysanthemum，celery，and tomato leaves．Journal of Economic Entomology，75:383-384.

Weintraub P G，Horowitz A R．1997．Systemic effects of a neeMinsecticide onLiriomyza huidobrensislarvae．Phytoparasitica，25:283-289.