陳葉 陳天仁 王多成 王治江 裴惠萍 肖占文
馬鈴薯環(huán)腐病是馬鈴薯生產(chǎn)中為害較大的病害之一,在全國各地均有發(fā)生,每年都造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,其田間發(fā)病率平均約為21.6%,發(fā)病輕的田塊減產(chǎn)13%,嚴(yán)重的減產(chǎn)60%以上,并造成貯藏期間薯塊大批腐爛。馬鈴薯環(huán)腐病屬病原細(xì)菌(Clavibacter michiganensesubsp.SepedonicumDavis)在分類中屬于棒狀桿菌屬。病菌隨種薯越冬,也可隨病殘體在土面越冬。未曾消毒的切刀是病害的主要傳播媒介。只要種薯不帶病,田間病株就少。隨著機(jī)械切塊在馬鈴薯生產(chǎn)上的應(yīng)用和馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,對切塊表面進(jìn)行快速滅菌,防止薯塊間傳毒,是確保種薯質(zhì)量、防治環(huán)腐病的重要手段。通過切刀消毒,防止馬鈴薯環(huán)腐病已有文獻(xiàn)報道,但用機(jī)械大批量切塊,并對切塊表面進(jìn)行快速滅菌,防止薯塊間傳毒,還未見報道,特進(jìn)行此試驗。
①病菌 馬鈴薯環(huán)腐病菌由河西學(xué)院微生物實驗室提供,使用時在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上活化,連續(xù)培養(yǎng)(25℃、黑暗)5 d。
②藥品 葡萄糖、蛋白胨、瓊脂、牛肉膏、氫氧化鈉、鹽酸、磷酸氫二鈉、酒精、脫脂棉、棉花、紗布、標(biāo)簽紙。
③殺菌劑 75%百菌清可濕性粉劑,西安瑞特農(nóng)藥有限公司提供;50%多菌靈超微可濕性粉劑,徐州銳農(nóng)農(nóng)化有限公司提供;72%甲霜靈錳鋅可濕性粉劑,重慶寶豐化工廠生產(chǎn);72%甲基托布津可濕性粉劑,江蘇新沂農(nóng)藥有限公司提供;50%異菌脲懸浮劑,安萬特作物科學(xué)有限公司提供;77%巴克丁 (氫氧化銅)可濕性粉劑,浙江禾本農(nóng)藥有限公司提供;15%三唑酮可濕性粉劑,上海升聯(lián)化工有限公司提供;硫酸銅,廣西化工研究所提供;高錳酸鉀,山東淄博齊魯石化公司提供;20%必菌鯊(氯溴異氰尿酸鈉),山西平陸縣植物保護(hù)公司提供;47%瑞諾葉福(腈菌唑M-47),西安鼎盛生物化工有限公司提供;5%百疫滅(戊二醛-癸甲氯銨),湖南五指峰生化有限公司提供;10%次氯酸鈉,湖北鑫東方商貿(mào)有限公司提供。
④馬鈴薯品種 大西洋,由北京德農(nóng)種業(yè)有限公司張掖分公司提供。
表1 馬鈴薯環(huán)腐病藥效試驗
①不同殺菌劑對馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響 將百菌清、多菌靈、甲霜靈錳鋅、巴克丁、瑞諾葉福、硫酸銅分別配成50 mg/mL溶液;將三唑酮、甲基托布津、異菌脲懸浮劑、必菌鯊、百疫滅分別配成1 mg/mL溶液;將次氯酸鈉配成5 μg/mL溶液;高錳酸鉀配成0.2%;酒精配成75%,配好后備用。將濾紙用打孔器打成直徑0.5 cm的圓形濾紙片,包扎后121℃滅菌30 min;各種殺菌劑按不同濃度配置好后,將濾紙片分別浸入不同濃度的殺菌劑中,每一種藥劑浸泡3片,浸泡1 min后,取出在無菌條件下晾干;每一種藥劑準(zhǔn)備3個培養(yǎng)皿,共42個培養(yǎng)皿;在無菌條件下,將活化菌種制成菌懸液,每一個培養(yǎng)皿加入菌懸液0.5 mL,用刮鏟涂抹均勻后,每一皿中加入含殺菌劑的濾紙片1片,放入培養(yǎng)皿中央;將培養(yǎng)皿倒置后在22℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3 d后觀察,測定抑菌圈直徑。
②次氯酸鈉濃度和時間對馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響 根據(jù)①結(jié)果,篩選出藥效明顯,且成本較低的殺菌劑次氯酸鈉,配成 0,3,4,5 μg/mL 四種濃度。 分別取出5 mL加入試管中,每只試管中各加入菌懸液0.1 mL,從加入后開始計時,將以上處理分別與菌懸液混合 0(CK),20,30,40,50 s后,用劃線法快速接入培養(yǎng)皿中,重復(fù)3次。將培養(yǎng)皿倒置后在22℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3天后觀察,記載菌種成活情況。
③次氯酸鈉對馬鈴薯薯塊和薯苗的影響試驗將大西洋品種進(jìn)行切塊,薯塊大小為50 g左右,切刀不消毒,每個處理1 000塊,在5 μg/mL濃度的溶液中分別浸種 0(CK),20,60,600,1 800 s,撈出晾干后,每個處理取50塊,置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3次重復(fù),7天后觀察,記載薯塊和出芽情況。剩余的薯塊經(jīng)不同時間浸種處理后,采取常規(guī)方法在田間播種,試驗設(shè)3次重復(fù),以清水處理600 s為對照,小區(qū)面積為20 m2。記載田間出苗、發(fā)病情況,收獲時進(jìn)行測產(chǎn)。
表2 次氯酸鈉最佳藥效濃度和時間試驗
由表1可知,不同的殺菌劑對馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響不同,其中必菌鯊、百菌清、多菌靈、甲霜靈錳鋅、異菌脲懸浮劑、甲基托布津等抑菌效果差;巴克丁、瑞諾葉福、百疫滅、三唑酮等抑菌效果一般;高錳酸鉀、硫酸銅抑菌效果較好;75%酒精、次氯酸鈉抑菌效果最好。但因在生產(chǎn)上75%酒精成本較高,故選用次氯酸鈉最為合適。
從表 2 可以看出, 將 5,4,3,0 μg/mL 四種濃度次氯酸鈉分別與菌懸液混合 20,30,40,50 s后,在濃度為 5 μg/mL 處理 20,30,40,50 s 和 4 μg/mL 處理50 s的培養(yǎng)基上無菌,其他都有病菌存活。綜合考慮,用5μg/mL的次氯酸鈉處理20 s為最佳濃度和時間。
表3 次氯酸鈉浸種時間對馬鈴薯薯苗的安全性及對薯塊和產(chǎn)量的影響
從表3可以看出,用5μg/mL的次氯酸鈉的溶液分別浸種 20,60,600,1 800 s,撈出晾干后,置于 25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),7天后觀察,薯塊表面完好,出芽率在99.6%以上。說明在濃度為5 μg/mL,處理時間為20~1 800 s,對馬鈴薯是安全的。田間試驗表明,濃度為5 μg/mL,處理時間20~1 800 s,田間出苗率都在99%以上,幼苗畸形率為0,進(jìn)一步說明該藥劑對馬鈴薯是安全的,這與實驗室內(nèi)測定結(jié)果是完全吻合的。田間的發(fā)病情況明顯低于CK,產(chǎn)量明顯高于CK,且與CK差異極顯著。說明用濃度為5 μg/mL的次氯酸鈉處理種薯,具有明顯的抑菌和增產(chǎn)作用。
試驗結(jié)果表明,用5 μg/mL的次氯酸鈉處理20 s為最佳濃度和時間,對馬鈴薯生產(chǎn)是安全的,且具有明顯的抑菌和增產(chǎn)作用。分析其原因,主要是次氯酸鈉具有較強(qiáng)的氧化性,能明顯抑制和殺滅馬鈴薯環(huán)腐病病菌,即使在環(huán)境適宜的條件下,該病害也難以擴(kuò)展。本研究只從藥劑處理種薯,短時間內(nèi)抑制馬鈴薯環(huán)腐病病菌的發(fā)生這一因素進(jìn)行了探討,今后還需要進(jìn)行多因素試驗,為綜合防治馬鈴薯其他病害提供依據(jù)。