周廣生 江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇泰州 225300

新城疫(ND)作為禽類重要疫病之一,從發(fā)現(xiàn)至今已有80多年的歷程,給養(yǎng)殖業(yè)帶來不可估量的經(jīng)濟損失，因而人們對ND的預(yù)防、控制、撲滅采取了大量的措施，但其仍然給集約化養(yǎng)殖帶來威助。雞新城疫發(fā)病后，抗生素、磺胺類藥物無治療作用。為了探討中藥抗雞新城疫病毒的作用，我們依據(jù)中獸醫(yī)的辯證施治理論，對中藥進行篩選，選出了以貫葉連翹、香薷兩味中藥的方劑，進行抗雞新城疫病毒的體外實驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗雞胚：10日齡非免雞胚，購自南京藥械廠。

1.1.2 雞新城疫毒株：由江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)教研室提供，雞胚尿囊液的HA效價為8log2。

1.1.3 藥品：中藥復(fù)方制劑由貫葉連翹、香薷組成，制成含生藥2g/ml的口服液，所用中藥購自泰州仁濟中藥飲片有限公司；金剛烷胺，由江蘇倍康藥業(yè)公司提供，配成0.2mg/ml濃度，滅菌后備用。

1.2 試驗分組：10日齡雞胚60個，隨機分為4組。

具體分組情況見表1。

表1 實驗分組情況

1.3 試驗方法

1.3.1 測定半數(shù)致死量：將尿囊液稀釋不同倍數(shù)，接種非免雞胚，得出胚胎半數(shù)致死量。經(jīng)過測定，尿囊液半數(shù)致死量的稀釋度為1:1000，正式試驗的接種稀釋度用1:500的尿囊液。

1.3.2 藥物毒性試驗：將中藥原藥液用生理鹽水作倍比稀釋，將原藥液及不同濃度的藥液分別接種于4枚10日齡雞胚的尿囊腔中，每只0.2m L，置37℃恒溫箱孵育72小時，每天觀察存活情況，雞胚全部存活的最高藥物濃度為正式試驗的起始濃度。同時設(shè)生理鹽水對照組。

1.3.3 中藥復(fù)方口服液對雞新城疫病毒增殖的抑制作用測定：按1.3.1尿囊液的稀釋度和表2的藥物濃度做為接種的依據(jù)。

1.3.3.1 中藥組：每個雞胚尿囊腔同時接種中藥0.2m L，病毒稀釋液 0.1m L。

1.3.3.2 西藥組：每個雞胚尿囊腔同時接西藥0.2m L，病毒稀釋液0.1m L。

1.3.3.3 生理鹽水對照組：每個雞胚尿囊腔同時接種生理鹽水0.2m L，病毒稀釋液0.1m L。

上述雞胚在37℃恒溫箱中孵育，每天照蛋2～3次，棄去24小時內(nèi)死胚。收取72小時內(nèi)活胚和24～72小時死胚尿囊液，低溫保存?zhèn)溆?。以血凝（HA）試驗檢測每組雞胚尿囊液的病毒滴度。

2 結(jié)果

2.1 藥物毒性實驗：經(jīng)過2次重復(fù)試驗，中藥復(fù)方制劑的原藥液及其不同稀釋度均對雞胚無明顯致死作用。其存活情況見表2。故用原液濃度為正式試驗的起始濃度。

表2 藥物對雞胚毒性實驗結(jié)果（n=4）

2.2 中藥復(fù)方制劑對雞新城疫病毒增殖的影響，結(jié)果見表3。

表3 中藥復(fù)方制劑對雞新城疫病毒增殖的抑制作用測定結(jié)果

3 討論

3.1 雞新城疫是由新城疫病毒感染引起的傳染病，由于疫苗的廣泛應(yīng)用，使該病多以慢性或散發(fā)為特點。雞新城疫發(fā)病以后，目前還無有效療法。用中藥治療畜禽病毒性疾病，已有很多成功經(jīng)驗，本試驗就是為臨床治療雞新城疫提供理論依據(jù)。

3.2 中藥復(fù)方制劑能明顯抑制雞新城疫病毒增殖，降低雞胚死亡率。分析中藥配方的作用，貫葉連翹具有抗抑郁、抗病毒、鎮(zhèn)痛等作用。香薷具有發(fā)汗解表，利水消腫的作用。中藥復(fù)方制劑的效果明顯高于金剛烷胺。

3.3 本試驗對中藥復(fù)方制劑在雞胚內(nèi)抗雞新城疫病毒的效果進行了觀察，在動物上的效果如何以及作用機理有待進一步的試驗研究。

[1]郝文利，葛政文.中草藥免疫作用研究[J].當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè),2005,(05)：44～46.

[2]馬興樹.禽傳染病實驗室診斷技術(shù)[M].北京，化學(xué)工業(yè)出版社，2006，359～367.

[3]瞿自明，徐方舟,江钖基.獸醫(yī)中草藥大全[M].北京,中國農(nóng)業(yè)科技出版社,1998,761-762

[4]魏新，周魏明，陳進.雞新城疫的診斷與防控[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（Z2）：27-29+246

[5]畢延清.雞新城疫的診斷和防控[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（9）：154-456

[6]張延明，張志英，苗永泉等，雞重點疫病的流行特點與防制對策 [J].畜牧與飼料科學(xué)，2005，26（5）：63-64