鐘 琳 江西興國(guó)縣婦幼保健院（342400）

腦紅素中毒性腦病的病死率高，至少有50%～75%的患兒死于急性期，即使幸存，也常留下手足徐動(dòng)癥、眼球運(yùn)動(dòng)障礙、聽覺障礙、牙釉質(zhì)發(fā)育不全（即“核黃疸四聯(lián)癥”）和智力低下等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥[1-2]。

氧化應(yīng)激損傷被認(rèn)為是膽紅素中毒性腦病的關(guān)鍵機(jī)制之一，活性氧族物質(zhì)（ROS）的升高已經(jīng)被證明與膽紅素中毒性腦病的發(fā)生和并發(fā)癥的產(chǎn)生密切相關(guān)[3-5]。三七三醇皂苷是從我國(guó)傳統(tǒng)中藥三七中提取出的有效成分，具有改善微循環(huán)、抗氧化及抗炎等作用。本文主要研究三七三醇皂苷對(duì)膽紅素中毒性腦病新生豚鼠MDA和SOD的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 生后5～7天的豚鼠30只，重量為40～50g，雌雄各半。

1.1.2 試劑與藥品 超氧化物歧化酶（SOD）測(cè)定試劑盒、丙二醛（MDA）測(cè)定試劑盒及考馬斯亮蘭蛋白試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，晶體膽紅素購(gòu)自Sigma公司。

1.1.3 儀器 7200 型紫外分光光度計(jì)（上海精工）；冷凍離心（Eppendorf）；恒溫培養(yǎng)箱（HPX29272MBE，常州諾基儀器有限公司）；玻璃勻漿器（上海儀器二廠）。

1.2 方法

1.2.1 分組與治療 隨機(jī)分為3組，分別為對(duì)照組、模型組、三七三醇皂苷治療組，每組各15只豚鼠，三七三醇皂苷治療組在造模注射膽紅素的同時(shí)給予三七三醇皂苷20mg治療。對(duì)照組和模型組不做治療，建立模型8小時(shí)后處死新生豚鼠取腦。

1.2.2 膽紅素中毒性腦病新生豚鼠模型的制作 避光稱取晶體膽紅素20mg溶解于1ml 0.5M NaOH中，加入雙蒸水9ml，用0.5M HCl調(diào)節(jié)PH至8.5。給予新生豚鼠膽紅素200 μg/g腹腔注射，8小時(shí)后模型建立。

1.2.3 腦組織SOD活性及MDA含量的測(cè)定 豚鼠術(shù)后8小時(shí)予以20%烏拉坦（0.15ml/100g）麻醉，快速斷頭取腦。去除低位腦干及嗅束，用生理鹽水沖洗腦表面血液，濾紙吸干表面水分，剝除軟腦膜，取雙側(cè)大腦半球。以重量（g）/體積（ml）比1∶9加入冰生理鹽水后用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)制成組織勻漿，冷凍離心機(jī)離心15min，速度3000r/min。取上清液，分別采用黃嘌呤氧化法、硫代巴比妥顯色（TBA）法和考馬斯亮藍(lán)蛋白測(cè)定法測(cè)定SOD、MDA和勻漿蛋白量。嚴(yán)格按說明書操作。

2 結(jié)果

SOD、MDA含量的改變：如表1所示。

表1 SOD、MDA含量的改變

3 討論

尋找腦紅素中毒性腦病治療的方法具備重大的意義。中藥有望從整體上有效治療膽紅素中毒性腦病，具有其獨(dú)特的魅力[3-5]。

本研究以新生一周以內(nèi)的豚鼠為腦紅素中毒性腦病模型動(dòng)物，豚鼠中樞神經(jīng)發(fā)育相對(duì)成熟，檢測(cè)膽紅素神經(jīng)毒性較可靠。證明三七三醇皂苷可以有效治療腦紅素中毒性腦病。

大腦的正常功能活動(dòng)和神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整主要取決于神經(jīng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性。腦部因?yàn)榫哂休^高的氧化代謝率，含有高密度的膜不飽和脂肪酸以及依賴完整的神經(jīng)元突觸傳導(dǎo)，所以特別易于遭受自由基的攻擊[2]。因此可以通過測(cè)定腦組織MDA、SOD的變化，間接反應(yīng)腦組織中自由基含量及腦組織損傷程度[1-5]。

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