王其剛 ，柴衛(wèi)淑 ，王繼華 ，吳學尉

(1.云南省農(nóng)業(yè)科學院 花卉研究所，云南 昆明 650205；2.云南省花卉技術工程研究中心，云南 昆明 650205；3.山東絲綢紡織職業(yè)學院，山東 淄博 255300)

花毛茛(Ranunculus asiaticus)是毛茛科毛茛屬多年生宿根草本植物[1]，起源于地中海沿岸，是當?shù)貜V泛栽種的觀賞植物之一，目前世界各國均有栽培，在法國、意大利等國已培育出不同系列的切花、盆花型新品種，如Elegance系列、Success系列等.20世紀 90年代末，中國引入花毛茛進行切花、盆花生產(chǎn)，云南昆明地區(qū)稱之為“洋牡丹”[2].花毛茛以其冬春產(chǎn)花、花色鮮艷、花型獨特等特性深受消費者喜愛，盆花型生產(chǎn)規(guī)模不斷擴大，花毛茛種源的需求也隨之加大.

在花毛茛繁殖中，分株繁殖無法滿足市場對種源的需求，組織培養(yǎng)技術難度大且成本較高[3-4]，而種子繁殖可快速規(guī)?；@得生產(chǎn)用種球[5].低溫預處理可解除種子休眠，提高種子的萌芽率、萌芽勢等，如3 ℃低溫能解除牡丹種子的上胚軸休眠，改變幼苗對GA3的響應能力[6]，低溫能增加粳稻對GA和ABA的敏感性[7]；3～5 ℃低溫預處理5 d能有效提高鹽脅迫下刺槐種子的萌發(fā)能力[8].花毛茛種子經(jīng)2.5 ℃低溫貯藏30 d，其田間出苗率比常溫貯藏種子有很大的提高[5]，但存在萌芽不一致的問題，達不到快速育苗并整體移栽高效生產(chǎn)模式的要求.在水分、溫度、光照等育苗環(huán)境恒定的基礎上，筆者研究不同低溫預處理對干燥花毛茛種子萌發(fā)的影響，旨在為花毛茛塊根繁殖提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 材 料

花毛茛種子由云南省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究所花毛茛育種圃提供.2007年3月進行人工授粉.果實成熟后采摘保存于沙網(wǎng)袋.干燥種子自然脫落于袋內(nèi)，去雜質后室溫干燥貯藏.1 g種子約1 300～1 500粒，直徑3～5 mm，扁平狀，被一層薄的膜質包裹，中心部位是胚.胚鮮明飽滿者為優(yōu)質種子.

1. 2 方 法

1.2.1 種子低溫預處理

將種子密封保存在低溫冰箱中，預處理溫度T1=(–1±0.2)℃，T2=(2±0.2)℃，T3＝(5±0.2)℃；處理時間 t1＝15 d，t2＝30 d，t3＝45 d.雙因子共組成9 個處理 T1t1、T1t2、T1t3、T2t1、T2t2、T2t3、T3t1、T3t2、T3t3，以常溫貯藏為對照(CK).種子同時從冰箱取出進行試驗.

1.2.2 種子萌發(fā)

種子用清水浸泡12 h，沖洗3次，殺菌劑處理2 min，清水沖洗3次.每處理挑選100粒飽滿種子試驗，3次重復.依照宋松泉等[9]的方法，將種子均勻排列在墊有2層濾紙的培育皿中，加蓋一層薄的紙巾，加入適量蒸餾水，蓋上培養(yǎng)皿蓋，置于(15.5±0.5)℃恒溫箱中，暗光發(fā)芽[10]，定期噴水.

1. 3 數(shù)據(jù)分析

自播種8 d后每天觀察、記錄各處理的種子萌芽情況，分別按以下公式計算有關參數(shù)：

萌芽勢＝(前4 d發(fā)芽種子數(shù)/種子總數(shù))×100%.

萌芽率＝(發(fā)芽種子數(shù)/種子總數(shù))×100%.

活力指數(shù)＝種子苗生長勢×萌芽率.

式中種子苗生長勢為根、莖總長度.隨機挑選出同一處理中 10棵幼苗，測量根莖總長，結果取平均值.

采用SPSS15.0軟件的Duncan進行數(shù)據(jù)分析.

2 結果與分析

2.1 不同處理花毛茛種子的萌芽率

對照花毛茛種子播種后第 12天開始萌發(fā)，而低溫預處理種子的最早萌發(fā)時間顯著(P＜ 0.05)早于對照，其中 T1預處理種子的萌發(fā)時間提前最明顯(P＜0.01)，播種后8 d開始萌發(fā)，T2和T3預處理的最早萌發(fā)時間差異不顯著.各溫度處理的種子萌發(fā)結束時間差別不大，但最終的種子萌芽率差別很大，低溫預處理的種子萌芽率均極顯著(P＜0.01)高于對照(圖 1)，其中，T1t2顯著高于 T1t1和 T3(P＜0.05)，T1t2極顯著高于 T1t3和 T2(P＜0.01)，T2t1和T3t3差異不顯著.

圖1 不同處理花毛茛種子的萌芽率Fig.1 Germination rate of Ranunculus asisticus seeds in different treatments

2.2 不同處理花毛茛種子的萌芽勢

對照花毛茛種子的萌芽勢為24.30%，處理1、處理2、處理3、處理4、處理5、處理6、處理7、處理8、處理9的萌芽勢分別為61.20%、62.00%、52.60%、52.00%、50.60%、51.30%、60.00%、50.70%、55.30%.可見，花毛茛種子經(jīng)低溫預處理的萌芽勢顯著高于常溫貯藏(P＜0.01)，其中T1t1和T1t2的種子萌芽勢最高，均達到60%以上，且處理1和處理2無顯著差異；T3t1的種子萌芽勢次之，其他各低溫處理萌芽勢差異不顯著.

2.3 不同處理花毛茛種子苗的生長勢和種子活力

由表1可見，對照花毛茛種子苗的生長勢較強，僅低于T1t2，顯著(P＜0.05)高于其他各低溫處理.低溫預處理生長勢最高達到1.61 cm，最低僅為1.30 cm，各處理胚根的生長基本相同，其生長勢的差異主要來源于種子苗胚芽的長勢強弱.

表1 不同處理花毛茛種子的生長勢和活力指數(shù)Table 1 Effects of pre-chilling on the growth index and vigor index of Ranunculus asisticus seeds

T1t2處理花毛茛種子的萌芽率、生長勢均優(yōu)于其他處理，其種子活力最強(P＜0.05)，比對照高0.36，T1t1、T3t2、T3t3處理間種子活力差異不顯著；CK、T1t3、T2t1、T2t2、T3t15個處理的種子活力差異不顯著.

3 討 論

a. 低溫預處理對花毛茛種子萌發(fā)的影響.本研究結果表明，低溫預處理花毛茛種子的萌芽率、萌芽勢均顯著高于常溫貯藏種子(P＜0.01)，而且萌芽時間也提前；低溫預處理改變了花毛茛種子的萌發(fā)進程，盡管試驗后期種子的萌芽數(shù)量和種子萌發(fā)結束時間差異不大，但能明顯提高種子的萌芽勢和萌芽率，說明短時低溫預處理是花毛茛種子萌發(fā)的刺激因子.鳳陽牡丹種子[6]和刺槐種子[8]是在充分吸水后才完成低溫處理過程的，而花毛茛種子未經(jīng)吸水，其萌芽率也能顯著提高.若種子吸水后再經(jīng)低溫處理，其萌芽率是否能提高還有待研究.

低溫解除牡丹種子上胚軸休眠的效果與低溫處理時間有關[6]，于(–1±0.2)℃儲存30 d對花毛茛種子的萌發(fā)效果最好，其萌芽勢、萌芽率、生長勢及活力指數(shù)最高，分別為62%、90.60%、1.61 cm、1.46，可見，低溫預處理促進了花毛茛種子苗的生長，在生產(chǎn)中具有指導意義.本研究中花毛茛干燥種子是在密閉環(huán)境中完成低溫預處理的，而室溫貯存的花毛茛種子存在過度失水.貯存環(huán)境溫度變化等因素可能導致種子萌發(fā)延遲或喪失活力.

b. 花毛茛種子貯藏與育苗.溫度對種子劣變的影響是十分顯著的，溫度愈高，種子的壽命愈短[11].長時間低溫對刺槐種子有傷害作用，適當?shù)牡蜏仡A處理對種子是有益的[8].本研究中(5±0.2)℃儲存種子仍保持較強的生活力，雖然萌芽率比(–1±0.2)℃儲存30 d低，而在更低的溫度條件下，貯存時間延長，種子萌芽率和種子苗生長勢都顯著降低.花毛茛種子育苗與缽播、箱播相比，田間地播的出苗最好[5].為防止晝夜溫差對種子萌發(fā)造成不良影響，選擇密閉暗光且溫度恒定的環(huán)境育苗，同時創(chuàng)造和田間類似的育苗基質厚度(不低于8 cm)，可達到規(guī)模化快速育苗的效果.

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