沈德華 周亞君

生化分析儀上，交叉污染是一個(gè)普遍存在的問題。不同廠家生產(chǎn)的生化分析儀，不同廠家生產(chǎn)的生化檢測(cè)試劑，其交叉污染程度均會(huì)有所不同。本文主要探討了國(guó)產(chǎn)的英諾華D-360生化分析儀上各肝腎功能項(xiàng)目對(duì)葡萄糖測(cè)定的污染情況。

1 材料和方法

1.1 儀器 國(guó)產(chǎn)英諾華D-360全自動(dòng)生化分析儀，經(jīng)廠家工程師定期維護(hù)保養(yǎng)，以確保其測(cè)量的重復(fù)性符合要求。

1.2 試劑 由于為開放試劑系統(tǒng)，故而自行選配試劑。各試劑生產(chǎn)廠家及方法學(xué)如下：廣州標(biāo)佳公司所產(chǎn)總膽紅素測(cè)定試劑(重氮法)；廣州標(biāo)佳公司所產(chǎn)直接膽紅素試劑(重氮法)；南京英諾華公司所產(chǎn)總蛋白試劑(雙縮脲法)；南京英諾華公司所產(chǎn)白蛋白試劑(溴甲酚綠法)；南京英諾華公司所產(chǎn)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑(酶學(xué)速率法)；南京英諾華公司所產(chǎn)天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑(酶學(xué)速率法)；南京英諾華公司所產(chǎn)堿性磷酸酶試劑(對(duì)硝基酚磷酸鹽連續(xù)監(jiān)測(cè)法)；南京英諾華公司所產(chǎn)γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶試劑(γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺法)；南京英諾華公司所產(chǎn)總膽固醇試劑(膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法)；南京匯標(biāo)公司所產(chǎn)二氧化碳試劑(酶學(xué)速率法)；南京英諾華公司所產(chǎn)尿素氮試劑(酶學(xué)速率法)；南京英諾華公司所產(chǎn)尿酸試劑(尿酸酶-過氧化物酶偶聯(lián)法)；南京英諾華公司所產(chǎn)肌苷試劑(苦味酸法)；南京英諾華公司所產(chǎn)葡萄糖試劑(葡萄糖氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法)。

1.3 定標(biāo)液 使用英國(guó)郎道公司所產(chǎn)人基質(zhì)混合校準(zhǔn)血清CAL2350。

1.4 方法

1.4.1 儀器日常保養(yǎng)之后，使用郎道校準(zhǔn)血清將各項(xiàng)目進(jìn)行定標(biāo)校準(zhǔn)。

1.4.2 分別于各肝腎功項(xiàng)目后面檢測(cè)校準(zhǔn)血清的葡萄糖濃度，得出一個(gè)測(cè)定結(jié)果值。每次葡萄糖測(cè)量之后均進(jìn)行針清洗、管路清洗多次(3次以上)，以盡可能降低對(duì)于后面測(cè)試項(xiàng)目的影響。同一組合每日測(cè)量3次，連續(xù)測(cè)量3天，剔出離群值后將所測(cè)結(jié)果平均為其測(cè)定結(jié)果，以消除偶然誤差。

1.4.3 將于各項(xiàng)目后測(cè)得的葡萄糖濃度值與其給定靶值進(jìn)行對(duì)比，其偏倚為前一試劑所引入的交叉污染，分析其是否在可接受范圍內(nèi)。

2 結(jié)果

各試劑后面進(jìn)行葡萄糖測(cè)量結(jié)果數(shù)據(jù)及偏倚見表1。

表1 肝腎功各檢測(cè)項(xiàng)目在D-360生化分析儀上對(duì)葡萄糖測(cè)定結(jié)果的影響

3 討論

在使用生化分析儀的過程中，交叉污染無可避免。交叉污染主要由3個(gè)方面引起：比色杯、試劑針、攪拌棒這三個(gè)方面引入[1]，比色杯污染需通過日常保養(yǎng)來避免[2]，此處主要討論試劑針和攪拌棒所引入的交叉污染。

試劑針和攪拌棒引入交叉污染，主要是由于試劑成分的差異，前一檢測(cè)項(xiàng)目試劑對(duì)后一檢測(cè)項(xiàng)目造成影響[3-4]。但因?yàn)槭褂迷噭S家所生產(chǎn)試劑，其具體成分一般來說廠家都沒有公開，導(dǎo)致我們無從探究試劑間交叉污染的根源。雖然從一些技術(shù)角度方面進(jìn)行改進(jìn)，比如在儀器中使用隔絕空氣加樣，專用清洗液清洗[5]等方法，等以期盡可能的降低交叉污染。但作為臨床試驗(yàn)室，我們所能做的是在使用型號(hào)一定的儀器時(shí)，盡可能的避免試劑之間的交叉污染，確保結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

適當(dāng)?shù)脑噭┡判蚴桥R床試驗(yàn)室降低交叉污染的一個(gè)簡(jiǎn)單易行辦法[6]。但由于各臨床試驗(yàn)室所使用的試劑品牌不同，導(dǎo)致其效果也不盡相同，各實(shí)驗(yàn)室有必要自己通過試驗(yàn)找出本實(shí)驗(yàn)室所使用試劑的最佳排列順序。一些文獻(xiàn)對(duì)于這一策略有過相關(guān)報(bào)道[7-8]，但均不同程度存在一定的局限性。本試驗(yàn)使用郎道校準(zhǔn)血清進(jìn)行定標(biāo)，由于定標(biāo)時(shí)，會(huì)在測(cè)試校準(zhǔn)血清之前進(jìn)行試劑空白測(cè)試，相當(dāng)于試劑針和攪拌棒經(jīng)過了試劑的潤(rùn)洗，故而我們可以認(rèn)為在進(jìn)行校準(zhǔn)血清測(cè)定的時(shí)候，不存在試劑間的交叉污染，試劑校準(zhǔn)沒有問題。在對(duì)校準(zhǔn)血清進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候，測(cè)定結(jié)果的偏差只由試劑針和攪拌棒帶入的交叉污染引起。通過對(duì)測(cè)定結(jié)果與校準(zhǔn)血清給定靶值的比較，能夠比較容易的得出前一試劑對(duì)后一測(cè)試項(xiàng)目的污染程度大小。如表1所示，在肝腎功能檢測(cè)各項(xiàng)目中，總蛋白、膽固醇和二氧化碳對(duì)于血糖污染較大，其導(dǎo)致的偏倚均超過了5%，其他項(xiàng)目對(duì)于血糖污染均較小(＜5%)，可以接受。

由于各實(shí)驗(yàn)室所使用儀器型號(hào)和試劑品牌的不同，測(cè)量條件的差異會(huì)導(dǎo)致各臨床試驗(yàn)室結(jié)果存在不同。最終結(jié)果還需要各臨床試驗(yàn)室自行探索，希望本試驗(yàn)?zāi)軌驗(yàn)楦髋R床試驗(yàn)室降低本實(shí)驗(yàn)室試劑間的交叉污染提供一定程度的幫助，將實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作做的更好。

[1] 周奎成,周奎娟,李合峰等.全自動(dòng)生化分析儀交叉污染的來源和避免對(duì)策[J].檢驗(yàn)與臨床,2009,47(23):114.

[2] 白尚星,雅培Aeroset全自動(dòng)生化分析儀分析項(xiàng)目交叉污染的處理體會(huì)[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥.2009,4(11):256.

[3] 劉津.試劑間交叉污染干擾無機(jī)磷測(cè)定的探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,28(3):286.

[4] 于嘉屏,全自動(dòng)生化分析儀及其試劑間化學(xué)污染對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2007,30(11):1301-1302.

[5] 陳強(qiáng).全自動(dòng)生化分析儀試劑交叉污染及清洗實(shí)驗(yàn)操作方法的探討[J].臨床核試驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,8(7):60-61.

[6] 杜興權(quán).正確安排生化自動(dòng)分析項(xiàng)目順序，防止試劑帶來的交叉污染[J].中國(guó)醫(yī)藥指南.2008,6(5):121.

[7] 黃倩婷,賈璋琳等.呂偉標(biāo)等.23種常用生化試劑交叉污染情況調(diào)查[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2009,6(19):1612-1613.

[8] 喻飛,何介武,王佑清等.全自動(dòng)生化分析儀試劑間交叉污染的分析[J].中外醫(yī)療,2009,1(1):150-151.