尹 中，朱海波，李巧玲

(黃石愛康醫(yī)院，湖北 黃石 435000)

Cys C(cystain C，胱抑素C)基因?qū)佟翱醇一颉保稍谒薪M織恒定持續(xù)地轉(zhuǎn)錄表達(dá)，且無(wú)組織學(xué)特征，故機(jī)體Cys C產(chǎn)生率相當(dāng)恒定。因Cys C是一種低分子量蛋白質(zhì)，可經(jīng)腎小球自由于濾過(guò)，在近曲小管被重吸收并降解，腎臟是清除循環(huán)中Cys C的唯一器官，所以其在血清中的濃度與腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)密切相關(guān)，被視為Cys C濃度是判斷腎小球?yàn)V過(guò)功能的一種理想的標(biāo)志物，現(xiàn)臨床應(yīng)用極為廣泛。Cys C的生理特征決定了其在尿液中的濃度受腎小管功能影響較大，近年來(lái)相繼有報(bào)道將其作為評(píng)價(jià)早期腎小管功能損傷的高敏標(biāo)志物，因此目前尿液Cys C也被越來(lái)越多地應(yīng)用于臨床診斷及監(jiān)測(cè)。由于Cys C的檢測(cè)目前尚未標(biāo)準(zhǔn)化，不僅存在已知的方法學(xué)差異，并且是否存在地域、人群差異尚未被充分證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)室為了建立一個(gè)適合于本地區(qū)的真實(shí)、客觀的尿液Cys C參考值范圍，進(jìn)行了本次實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本在本院體檢中心健康體檢者中選取，年齡分布為5～69歲，接受調(diào)查的內(nèi)容包括：病史詢問記錄、腎臟B超檢查、尿液常規(guī)檢測(cè)(尿10A及鏡檢)、腎功能(含血清Cys C)檢查。將符合下列條件的體檢者剔除：①有腎臟疾病病史者，或近期診斷有結(jié)石、急性膀胱炎或急性前列腺炎者。②為排除抗生素腎毒性影響，剔除近期持續(xù)用藥(如抗生素等)者、慢性疾病長(zhǎng)期用藥者(如糖尿病、高血壓等)。③尿液鏡檢 紅細(xì)胞＞3/hp、白細(xì)胞＞5/hp、PRO＞±的體檢者。④腎功能(CRE、UN、UA、Cys C)檢查結(jié)果異常者。⑤腎臟B超異常者。

經(jīng)以上條件對(duì)體檢者進(jìn)行篩選，剔除不合格對(duì)象，選取合格對(duì)象215例用于此次參考值建立，其中男性126例，女性89例。

1.2 樣本留取 留取隨機(jī)尿10ml，用1000r/min轉(zhuǎn)速離心5min，取上清液進(jìn)行Cys C檢測(cè)。

1.3 儀器 東芝TBA120FR全自動(dòng)生化分析儀。

1.4 試劑 北京九強(qiáng)金斯?fàn)柟旧a(chǎn)的膠乳增強(qiáng)免疫透射比濁法Cys C檢測(cè)試劑盒。

1.5 校準(zhǔn)物及質(zhì)控物 北京九強(qiáng)金斯?fàn)柟咎峁┑脑噭┖信涮仔?zhǔn)品及質(zhì)控品。

1.6 方法 膠乳增強(qiáng)免疫透射比濁法，實(shí)驗(yàn)過(guò)程均嚴(yán)格按照試劑盒提供的參數(shù)進(jìn)行操作。

1.7 結(jié)果統(tǒng)計(jì) 使用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，采用±2s方法確定參考值范圍。

2 結(jié)果

2.1 215例尿液樣本Cys C(mg/L)均值 x=0.078，標(biāo)準(zhǔn)差 s=0.041。

2.2 男性參考人群測(cè)定結(jié)果為0.077±0.043，女性參考人群測(cè)定結(jié)果為 0.078±0.038，經(jīng)差異顯著性 t檢驗(yàn)，P＞0.05，無(wú)顯著差異。

2.3 使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件確定2.5%和97.5%百分位數(shù)[5]，得出 95%可置信區(qū)間參考范圍為 0～0.15mg/L。

3 討論

Cys C在血液循環(huán)中被清除的過(guò)程與β2M相似，可自由濾過(guò)腎小球?yàn)V膜并且全部被腎小管重吸收降解，因此當(dāng)腎小管重吸收功能障礙時(shí)尿液中Cys C濃度顯著增加，可區(qū)別于以白蛋白為主的腎小球性蛋白尿[1]。而血清中β2M同時(shí)與多種腫瘤相關(guān)，從而降低了其對(duì)腎臟疾病診斷特異性，因此尿液Cys C測(cè)定比β2M相更具臨床診斷價(jià)值。目前使用膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法測(cè)定Cys C方法已開展較為成熟，使用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)方便快捷、精密度好、靈敏度高，適用于尿液標(biāo)本檢測(cè)。而尿液中其他腎臟損傷標(biāo)志物如α1-M、RBP、Trf及免疫球蛋白等指標(biāo)，往往受檢測(cè)靈敏度限制不能用于全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，而采用特種蛋白或化學(xué)發(fā)光等手段進(jìn)行測(cè)定不但成本昂貴，并且檢測(cè)效率相對(duì)于生化分析儀較低，因此采用免疫透射比濁法檢測(cè)尿液Cys C，對(duì)于腎臟早期損傷的診斷更具有普及應(yīng)用的空間。近年來(lái)，相繼有學(xué)者將尿液Cys C作為腎臟早期損傷的標(biāo)志物的文獻(xiàn)報(bào)道，且越來(lái)越多地被臨床應(yīng)用[2-4]。但目前文獻(xiàn)中報(bào)道的關(guān)于Cys C的檢測(cè)方法較多，且同一方法不同廠家試劑所提供的參考值也存在較大差異，因此對(duì)于不同方法及不同廠家試劑檢測(cè)結(jié)果在臨床中的應(yīng)用缺少統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)?；谏鲜鲆蛩兀緦?shí)驗(yàn)室進(jìn)行了此次尿液Cys C參考值調(diào)查，所調(diào)查人群樣本量大、年齡分布較廣、性別分布較均勻，因此該參考值具有一定的客觀性和代表性，可作為本地區(qū)健康人群尿液Cys C參考范圍用于臨床對(duì)腎臟疾病的早期診斷。值得探討的問題是，目前國(guó)內(nèi)各試劑廠家生產(chǎn)的Cys C試劑檢測(cè)靈敏度差異較大，而靈敏度較低的試劑仍然不能滿足尿液Cys C檢驗(yàn)的性能要求，因此實(shí)驗(yàn)室在使用生化分析手段進(jìn)行尿液樣本檢測(cè)時(shí)應(yīng)合理選擇高靈敏度的試劑。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)有公司推出Cys C酶法檢測(cè)試劑，其靈敏度在膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法基礎(chǔ)上有望進(jìn)一步提高，對(duì)于尿液樣本Cys C的檢測(cè)性能提供了更可靠的保障。

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