石延霞 張珊珊 黃大野 謝學文 李寶聚

貴州省修文縣地處黔中腹地，為貴陽市北部郊縣，是重要的延晚番茄生產(chǎn)基地，90%的番茄銷往省外市場，包括廣東、廣西、湖南、四川、浙江、上海等南方14省市，甚至走出國門，銷往越南，延晚番茄的種植在政府扶持下已經(jīng)發(fā)展成為當?shù)氐母幻窆こ?。然而，隨著番茄種植面積的不斷擴大，番茄病害也逐年加重，尤其是當?shù)胤Q為“火燒疫”或“金邊葉”的一種病害在2007～2009年間普遍發(fā)生、流行，造成延晚番茄產(chǎn)量損失，嚴重的可達40%～50%，低洼積水地、微酸性土壤，濕度大、連作的田塊發(fā)病尤其重，嚴重影響了番茄的產(chǎn)量和品質，也直接影響了農民的經(jīng)濟收入。

我們于2009年7～8月先后5次收到來自修文縣的番茄“火燒疫”病樣，修文縣農業(yè)科技人員、農藥經(jīng)銷商及一線番茄種植戶多次致電咨詢該病害的病原菌及防治問題，并分別介紹了該病害在當?shù)氐陌l(fā)生情況。鑒于受害番茄面積較大，且病原不明，我們于2009年8月25日來到修文縣，走訪修文縣扎佐鎮(zhèn)、小箐鄉(xiāng)、杉林村、擺矛等地調查研究該病害的發(fā)生情況，同時采集各地不同番茄品種病害樣本，帶回北京實驗室進行分離鑒定?，F(xiàn)將調研及鑒定結果加以總結。

1 田間發(fā)病癥狀

發(fā)病始于番茄第1穗果轉色期，從下部葉片開始發(fā)生，逐步向上蔓延。葉片受害后出現(xiàn)大量淺褐色小斑點，初期為小圓點（彩色圖版1），后期逐漸擴大，呈橢圓形或不規(guī)則形（彩色圖版2），葉緣現(xiàn)深褐色斑塊，有輪紋（彩色圖版3），葉背斑點不明顯。發(fā)病植株莖上也出現(xiàn)深褐色不規(guī)則或橢圓形斑塊，到發(fā)病中后期，莖上出現(xiàn)狹長的褐色條斑（彩色圖版4），向上、向下擴展可達1個或幾個節(jié)間。發(fā)病初期病莖縱剖面癥狀不明顯，僅有輕微褐變（彩色圖版5），待葉片癥狀明顯、且蔓延至2～3層果實位置時，莖髓部變褐以至中空，最后下陷或開裂（彩色圖版6），頂端壞死，植株萎蔫，進一步發(fā)展為全株枯黃褐色（彩色圖版7），一個月內遍布整塊田地，有如火燒過一般（彩色圖版 8）。

果實前期無明顯癥狀，后期呈現(xiàn)“鳥眼斑”。病斑圓形，外圈白色，中心褐色，粗糙略突起。病斑直徑約3 mm，單生或幾個連在一起形成不定形的病區(qū)。

2 病原菌鑒定

經(jīng)過對采集的不同發(fā)病部位的莖、葉進行病原菌的分離鑒定，分離得到菌落形態(tài)相同的菌株14個，該細菌生長緩慢，在NA培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)72小時可觀察到完整、較多的菌落，菌落黃白色、圓形、有光澤（彩色圖版9、10）。菌體桿狀或棒狀，無鞭毛，革蘭氏染色陽性（彩色圖版11），不能產(chǎn)生熒光，不能利用氧化酶，不產(chǎn)生果聚糖，不能利用精氨酸雙水解酶，能液化明膠，不能水解淀粉，不產(chǎn)生吲哚，產(chǎn)生H2S，不還原硝酸鹽，能利用或輕微利用蔗糖、麥芽糖、纖維二糖、乳糖、D-海藻糖、D-半乳糖、L-鼠李糖等。

對兩個菌株進行16S rDNA序列同源性分析（彩色圖版12），其與引起番茄潰瘍病的密執(zhí)安棒桿菌的同源性達到100%。

綜合發(fā)病癥狀、生理生化測試及16S rDNA序列分析結果，確認菌株為番茄潰瘍病密執(zhí)安棒桿菌Clavibacter michiganense subsp.michiganensis（Smith）Davis et al.。

3 病原菌致病性試驗

將分離獲得的菌株進行致病性試驗，壓力噴霧接種病原菌于番茄葉片，人工接種后7天，8個菌株全部出現(xiàn)發(fā)病癥狀。葉緣有明顯的黑褐色壞死斑（彩色圖版13）。接種后60天，植株頂端壞死，葉片大多枯死（彩色圖版14），莖部出現(xiàn)條形斑，維管束變褐，嚴重的莖部開裂呈潰瘍狀（彩色圖版15），葉柄處橫切有典型的“馬蹄形”壞死病變（彩色圖版16）。這與田間采集病樣的發(fā)病癥狀完全一致，證明病原菌能夠從葉緣侵入組織，最終侵染維管束組織造成病變。從接種發(fā)病的組織中能很容易重新分離到致病菌，經(jīng)鑒定仍然為密執(zhí)安棒桿菌。由此證實，2009年發(fā)生在貴州修文縣的番茄“火燒疫”病害，實為番茄潰瘍病。

4 防治方法推薦

結合修文縣番茄的栽培現(xiàn)狀及潰瘍病發(fā)生特點，我們對修文縣發(fā)生的番茄潰瘍病防治提出以下建議。

①種子消毒。種子帶菌是病害異地傳播的最重要途徑，種子消毒處理可以在一定程度上控制病害的發(fā)生。播種前用55℃溫水浸種30分鐘，或70℃干熱滅菌72小時，或用硫酸鏈霉素200 mL·L-1浸2小時，沖凈晾干后催芽；或者藥劑浸種，將種子用40℃左右的溫水浸泡3～4小時，放入1%的高錳酸鉀溶液中浸泡10～15分鐘，撈出沖洗干凈，防止出現(xiàn)藥害。

②苗床消毒。番茄潰瘍病的病原菌在土壤中可存活2～3年，育苗盡量選用新苗床，在沒種過茄科蔬菜的地塊里建造苗床或用營養(yǎng)土育苗。使用舊苗床的應做好消毒工作，即用40%的福爾馬林溶液處理。其方法是在播前20天左右，將床土耙松，每平方米用福爾馬林30 mL加水3～4 kg，澆到苗床上，隨后用塑料膜覆蓋5天，揭去塑料膜，將床土耙松，半個月后再播種。

③輪作換茬。應該定期與其他非茄果類作物進行輪作倒茬栽培，不少于3年，修文縣部分地塊有番茄和水稻輪作的栽培習慣，值得推廣應用。

④化學藥劑防治。根據(jù)修文縣病害發(fā)生特點，在番茄第1層果實坐果后、未轉色前及時噴施防治細菌性病害的藥劑做好預防工作，如3%中生菌素可濕性粉劑800倍液，或72%農用硫酸鏈霉素4 000倍液，或77%氫氧化銅可濕性粉劑500倍液全株噴淋，每隔5～7天均勻噴施1次，連續(xù)噴施3～5次；在田間發(fā)病初期，首先需要及時清除中心病株，然后噴施化學藥劑，可用3%中生菌素可濕性粉劑800倍液，或者新植霉素（100萬單位）5 000倍液，或72%農用硫酸鏈霉素4 000倍液，或77%氫氧化銅可濕性粉劑500倍液，或14%絡氨銅水劑300倍液，每隔5～7天均勻噴施1次，連續(xù)噴施3～5次。

5 討論

貴州修文縣境內大部分地區(qū)海拔高度為940～1 360 m，屬亞熱帶季風濕潤溫暖氣候。年平均氣溫13.6℃，年降雨量1 235 mm，冬無嚴寒，夏無酷暑。番茄潰瘍病在當?shù)匕l(fā)生狀況與該病害的傳統(tǒng)表現(xiàn)時期有所不同，修文縣很少出現(xiàn)苗期發(fā)病現(xiàn)象，發(fā)病初期是在第1層果實轉色期，葉片首先表現(xiàn)癥狀，之后葉片大量枯黃變褐，莖稈表現(xiàn)發(fā)病癥狀，到發(fā)病后期果實才表現(xiàn)癥狀。雖然種子帶菌是造成潰瘍病流行的一個因素，但鑒于當?shù)胤衙缙诤苌俦憩F(xiàn)癥狀的特點，造成該病害在當?shù)卮蟀l(fā)生的主要傳播途徑是病殘體？是種子？還是農事操作等？則需要詳細研究才能夠得出結論。但總體來說注重病害的預防，找好最佳防治時期對防治該病害至關重要。