李惠清　孫　輝　高功臣

[摘要] 目的 探討腎透明細(xì)胞癌中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1、基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的臨床價(jià)值。方法 采用免疫組化SP法測(cè)定60例腎透明細(xì)胞癌（RCCC）及30例正常腎組織中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP2）的表達(dá)。結(jié)果 TGF-β1和MMP2在RCCC中的陽(yáng)性表達(dá)率為81.6％和86.7％，明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。TGF-β1和MMP2表達(dá)RCCC病理分級(jí)、臨床分期呈明顯正相關(guān)（P＜0.01）。結(jié)論 兩者可作為反映RCCC生物學(xué)行為的指標(biāo)，也可作為判斷RCCC預(yù)后的分子指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 腎透明細(xì)胞癌；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1；基質(zhì)金屬蛋白酶

[中圖分類(lèi)號(hào)] R692[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1673-9701（2009）12-66-02

腎透明細(xì)胞癌（RCCC）是泌尿系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，其轉(zhuǎn)移率較高，有30％的腎透明細(xì)胞癌發(fā)生骨髓轉(zhuǎn)移。研究表明[1]，MMP2和TGF-β1參與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程。本文通過(guò)觀察腎透明細(xì)胞癌患者癌與癌旁組織中MMP2和TGF-β1的表達(dá)水平，探討其與腎透明細(xì)胞癌病理分級(jí)和臨床分期之間的關(guān)系，為臨床診斷和治療提供理論依據(jù)。

1資料與方法

1.1臨床資料

選取我院2006年6月～2008年6月收治的RCCC患者60例，其中男42例，女18例，年齡16～80歲，平均年齡（55.6±10.9）歲。癌組織標(biāo)本進(jìn)行石蠟包埋，按照2004年WHO病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，其中Ⅰ級(jí)15例，Ⅱ級(jí)23例，Ⅲ級(jí)15例，IV級(jí)7例；按照2004年WHO臨床分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期，其中Ⅰ期25例，Ⅱ期18例，Ⅲ期12例，IV期5例。與此同時(shí)選取2008年6月后RCCC 30例于術(shù)中留取距離癌組織邊緣3cm以上的正常腎組織，進(jìn)行石蠟包埋處理，作為正常對(duì)照組。

1.2試劑與方法

1.2.1試劑兔抗人TGF-β1多抗，兔抗人MMP2多抗，均來(lái)自南京凱基生物技術(shù)有限公司。

1.2.2方法免疫組織化學(xué)SP法所有標(biāo)本均經(jīng)10％福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度為4μm，每例標(biāo)本切5張，備免疫組化染色用。采用免疫組化SP法進(jìn)行免疫組化染色，嚴(yán)格參照試劑盒說(shuō)明操作。每次染色時(shí)均用已知陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。TGF-β1、MMP2表達(dá)均位于胞質(zhì)和胞膜，表現(xiàn)為淺黃、棕黃或棕褐色。用半定量法評(píng)估其染色，無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為（-），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占腫瘤細(xì)胞數(shù)<25％為（+），25％-50％為（++），>50％為（+++）。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS11.0建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用卡方檢驗(yàn)及Spearman秩相關(guān)分析，以P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

TGF-β1、MMP2表達(dá)與病理分級(jí)及臨床分期之間的關(guān)系（如表1）：RCCC中TGF-β1及MMP2陽(yáng)性表達(dá)率分別為81.6％（49/60）、86.7％（52/60），著色見(jiàn)于RCCC細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞膜，高于對(duì)照組的33.3%（10/30）、23.3％（7/30），P均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。RCCC中TGF-β1、MMP2表達(dá)強(qiáng)度隨著病理分級(jí)、臨床分期的增加，TGF-β1、MMP2表達(dá)增強(qiáng)，且均呈明顯的相關(guān)性。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.689，P＜0.01；r=0.578，P＜0.01及r=0.713，P＜0.01；r=0.601，P＜0.01）。見(jiàn)表1。

3討論

腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要生物學(xué)特征，基底膜（ECM）細(xì)胞基質(zhì)被降解是腫瘤向鄰近組織浸潤(rùn)進(jìn)而遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的必要階段。MMP2為Ⅳ型膠原酶，它通過(guò)降解1V型膠原和細(xì)胞外基質(zhì)從而使ECM完整性喪失，促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移酶[2]。本研究發(fā)現(xiàn)，MMP2表達(dá)在不同病理分級(jí)、不同臨床分期腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平均較癌旁組織顯著增高，提示其在腎透明細(xì)胞癌浸潤(rùn)生長(zhǎng)的各個(gè)階段均發(fā)揮重要作用。同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，MMP2表達(dá)強(qiáng)度與病理分級(jí)及臨床分期的相關(guān)關(guān)系為隨著病理分級(jí)、臨床分期的增加，MMP2表達(dá)增強(qiáng)，提示MMP2對(duì)RCCC的診斷及預(yù)后具有重要的參考價(jià)值。TGF-β1在腫瘤生長(zhǎng)分化、細(xì)胞凋亡等方面發(fā)揮重要的作用，是機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)的重要抑制因子。有研究表明[3]，TGF-β1在腫瘤發(fā)生的初期是腫瘤抑制因子，隨后卻成為腫瘤的促進(jìn)劑和轉(zhuǎn)移因子，這可能與TGFq31在腫瘤發(fā)生的進(jìn)程中改變信號(hào)傳導(dǎo)途徑和促進(jìn)MMP2的分泌有關(guān)。

本組研究表明，TGF-β1表達(dá)在不同病理分級(jí)、不同臨床分期腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平均較癌旁組織顯著增高，且與病理分級(jí)及臨床分期呈明顯的相關(guān)性。以上研究均提示TGF-β1、MMP2表達(dá)與RCCC惡性進(jìn)展、侵襲轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)，提示TGF-131和MMP2與不良預(yù)后有關(guān)，兩者可作為反映RCCC生物學(xué)行為的指標(biāo)，也可作為判斷RCCC預(yù)后的分子指標(biāo)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 許景，劉偉國(guó)，楊小鋒，等. MMP2、MMP9、TIMP1在星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其意義[J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2002，19（3）：245-246.

[2] Tjing MY，Van N，Ter JS，et a1．Cytokines in cervicovaginal washing fluid from patients with cervical neoplasia[J]. Cytokine，2001，14（6）：357-360.

[3] 丁國(guó)芳，徐銀峰，楊最素，等. TGF-I31在前列腺癌中的表達(dá)及其與生存率關(guān)系的研究[J]. 浙江醫(yī)學(xué)，2006，28（9）：709-711．

（收稿日期：2008-12-29）