【摘要】本文通過(guò)對(duì)比JJG 178—2007《紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)》和《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版“0401紫外-可見(jiàn)分光光度法”對(duì)儀器技術(shù)指標(biāo)的要求，發(fā)現(xiàn)兩者在波長(zhǎng)、吸光度、雜散光等方面存在明顯差異，這些差異會(huì)直接影響該儀器在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域中的計(jì)量確認(rèn)，進(jìn)而影響其結(jié)果的有效性。為了保證該儀器的計(jì)量溯源性，筆者對(duì)不同的技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行科學(xué)的比較和分析，最終提出可行性建議。

【關(guān)鍵詞】紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)；檢定；計(jì)量確認(rèn)

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.05.063

Comparison Analysis of UV-Visible Spectrophotometer Calibration Requirements between JJG 178—2007 and Pharmacopoeia of the People’s Republic of China

ZHOU Shaohua

（Wuxi Drug Safety Inspection and Testing Center， Wuxi 214000， China）

Abstract： This article compares the technical requirements of JJG 178—2007 Ultraviolet， Visible， Near-Infrared Spectrophotometers and the 2020 edition of the Pharmacopoeia of the People’s Republic of China ， specifically the "0401 Ultraviolet-Visible Spectrophotometric Method." The comparison reveals significant differences in wavelength， absorbance， stray light， and other aspects. These differences directly impact the metrological confirmation of the instrument in the field of pharmaceutical inspection and can affect the validity of its results. To ensure the metrological traceability of the instrument， the author conducts a scientific comparison and analysis of these different technical specifications and ultimately proposes feasible suggestions.

Keywords： UV visible spectrophotometer； verification； metrological confirmation

0引言

紫外-可見(jiàn)分光光度法是在190～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定物質(zhì)的吸光度，用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測(cè)定的方法。通過(guò)特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)樣品的光譜與對(duì)照光譜或?qū)φ掌饭庾V的比較，或通過(guò)確定最大吸收波長(zhǎng)，或通過(guò)測(cè)量?jī)蓚€(gè)特定波長(zhǎng)處的吸光度比值而鑒別物質(zhì)。用于定量時(shí)，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)量一定濃度樣品溶液的吸光度，并與一定濃度對(duì)照溶液的吸光度進(jìn)行比較或采用吸收系數(shù)法算出樣品溶液的濃度[1]。

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于朗伯-比爾定律，利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行定性和定量分析的一種分析儀器[2]，在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域應(yīng)用極為廣泛。

計(jì)量是指實(shí)現(xiàn)單位統(tǒng)一、量值準(zhǔn)確可靠的活動(dòng)。為保證儀器設(shè)備出具的檢驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確有效，《檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》中要求儀器設(shè)備在投入使用前，應(yīng)經(jīng)過(guò)計(jì)量，確認(rèn)其是否滿足檢驗(yàn)檢測(cè)的要求。

計(jì)量規(guī)程由國(guó)家計(jì)量主管部門組織制定并批準(zhǔn)頒布，在全國(guó)范圍內(nèi)施行，作為計(jì)量器具特性評(píng)定和法制管理的計(jì)量技術(shù)法規(guī)。計(jì)量單位對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行計(jì)量需要按照特定的計(jì)量規(guī)程來(lái)進(jìn)行操作。

長(zhǎng)期以來(lái)由于計(jì)量規(guī)程并沒(méi)有特別關(guān)注儀器在藥品生產(chǎn)、流通、檢驗(yàn)各環(huán)節(jié)中使用的特殊要求，造成了設(shè)備計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)和藥品實(shí)際使用標(biāo)準(zhǔn)的割裂，特別是儀器設(shè)備計(jì)量后的計(jì)量確認(rèn)，由于從業(yè)人員沒(méi)有注意到二者標(biāo)準(zhǔn)的不一致，對(duì)計(jì)量確認(rèn)的概念不明、依據(jù)不清、方法不懂，結(jié)果造成計(jì)量確認(rèn)流于形式，上述現(xiàn)象不利于藥品行業(yè)的發(fā)展和監(jiān)管，會(huì)給人民群眾用藥安全帶來(lái)安全隱患。

目前，紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)適用的計(jì)量規(guī)程為JJG 178—2007《紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)》（以下簡(jiǎn)稱《規(guī)程》），其中的計(jì)量性能要求包括：1）波長(zhǎng)最大允許誤差；2）波長(zhǎng)重復(fù)性；3）噪聲與漂移；4）最小光譜帶寬；5）透射比最大允許誤差；6）透射比重復(fù)性；7）基線平直度；8）電源電壓的適應(yīng)性；9）雜散光；10）吸收池的配套性。通用技術(shù)要求包括：1）安全性能；2）標(biāo)志；3）外觀；4）吸收池。

計(jì)量機(jī)構(gòu)對(duì)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)出具的檢定證書，檢定結(jié)論為合格（符合xx級(jí)）。

同時(shí)《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版（以下簡(jiǎn)稱《藥典》）“0401紫外-可見(jiàn)分光光度法”在儀器的校正和檢定一欄也有相應(yīng)的規(guī)定，主要包括：1）波長(zhǎng)；2）吸光度的準(zhǔn)確度；3）雜散光的檢查三部分。

1《藥典》與《規(guī)程》的差異化研究

1.1波長(zhǎng)

《規(guī)程》中為便于描述計(jì)量性能要求，將儀器的工作波長(zhǎng)劃分為三段，分別是A段（190 nm～340 nm）、B段（340 nm～900 nm）、C段（900 nm～2600 nm）。按照計(jì)量性能的高低將儀器劃分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，共4個(gè)級(jí)別[2]。波長(zhǎng)最大允許誤差要求見(jiàn)表1。

《藥典》中紫外-可見(jiàn)分光光度法的波長(zhǎng)范圍為190～800 nm，對(duì)應(yīng)為計(jì)量規(guī)程中的A+B段，《藥典》對(duì)儀器波長(zhǎng)的允許誤差為：紫外光區(qū)±1 nm，500 nm附近±2 nm；對(duì)比表1可以發(fā)現(xiàn)，A段波長(zhǎng)需要滿足Ⅲ級(jí)要求，在B段需要滿足Ⅱ級(jí)要求。

1.2吸光度的準(zhǔn)確度（透射比最大允許誤差）

《藥典》的規(guī)定是吸光度的準(zhǔn)確度，判斷參數(shù)為吸收系數(shù)，但是《規(guī)程》中檢定的項(xiàng)目為透視比。二者檢查過(guò)程及標(biāo)準(zhǔn)如下：

《藥典》：可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60 mg，精密稱定，用0.005 mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000 mL，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定并計(jì)算其吸收系數(shù)，并與規(guī)定的吸收系數(shù)比較，應(yīng)符合表2中的規(guī)定。

《規(guī)程》：用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.06000/1000重鉻酸鉀的0.001 mol/L高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液及標(biāo)準(zhǔn)吸收池，分別在235、257、313、350 nm處測(cè)量透射比三次，結(jié)果應(yīng)符合表3規(guī)定。

通過(guò)比較筆者發(fā)現(xiàn)，二者雖然檢查的波長(zhǎng)點(diǎn)相同均為235 nm、257 nm、313 nm、350 nm四個(gè)點(diǎn)，但是所用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以及最后判斷的參數(shù)還有允許誤差范圍均有較大的差異，檢定的數(shù)據(jù)無(wú)法作為藥典要求的判斷依據(jù)，如果不對(duì)儀器進(jìn)行藥典附加項(xiàng)目的檢查就會(huì)造成該項(xiàng)檢查的缺失，對(duì)結(jié)果數(shù)據(jù)的可靠性造成影響。

1.3雜散光的檢查

《藥典》按表4所列的試劑和濃度，配制成水溶液，置1 cm石英吸收池中，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定透光率，透光率應(yīng)符合表4中的規(guī)定。

《規(guī)程》選擇規(guī)定的雜散光測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，在相應(yīng)波長(zhǎng)處測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比，其透射比值即為儀器在該波長(zhǎng)處的雜散光。

A段用碘化鈉標(biāo)準(zhǔn)液（濃度為10.0 g/L）于220 nm，亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液（濃度為50.0 g/L）于360 nm，10 nm標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池，蒸餾水作參比，光譜帶寬2 nm（無(wú)光譜帶寬調(diào)整擋的儀器不設(shè)）測(cè)量其透射比示值，應(yīng)符合表5中的規(guī)定。

對(duì)比不難發(fā)現(xiàn)，二者標(biāo)準(zhǔn)液的濃度相差較大，而且測(cè)定的波長(zhǎng)有所不同，藥典要求在220 nm和340 nm處測(cè)定測(cè)光率，而規(guī)程要求在220 nm和360 nm處測(cè)定透射比，并且限度范圍也不一樣，二者的對(duì)比見(jiàn)表6。

2結(jié)論和建議

通過(guò)對(duì)《中華人民共和國(guó)藥典》、JJG 178—2007在波長(zhǎng)、吸光度的準(zhǔn)確度（透射比最大允許誤差）以及雜散光三部分內(nèi)容的比較，發(fā)現(xiàn)計(jì)量部門的計(jì)量規(guī)程并不能完全滿足藥典對(duì)儀器設(shè)備的性能要求。由于藥品檢驗(yàn)部門長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)儀器設(shè)備的計(jì)量確認(rèn)存在著一些誤區(qū)，即認(rèn)為計(jì)量檢定合格的儀器設(shè)備就一定是滿足藥品檢驗(yàn)要求的，如果藥品的檢驗(yàn)部門沒(méi)有意識(shí)到這些差異，而是想當(dāng)然地將計(jì)量部門的結(jié)論作為設(shè)備計(jì)量確認(rèn)的結(jié)論，很容易造成數(shù)據(jù)的偏差以及結(jié)果的錯(cuò)誤。

基于上述情況，筆者提出以下建議：1）建議藥品檢驗(yàn)部門將計(jì)量的檢定證書改成計(jì)量校準(zhǔn)證書，校準(zhǔn)證書中的上述項(xiàng)目與計(jì)量單位協(xié)商進(jìn)行相應(yīng)的微調(diào)，按照《藥典》的方法進(jìn)行操作。2）考慮到上述三個(gè)項(xiàng)目的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制作較為簡(jiǎn)單，藥品檢驗(yàn)單位可內(nèi)部制定相應(yīng)的儀器性能測(cè)試SOP，在計(jì)量檢定/校準(zhǔn)證書以外對(duì)上述三個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行單獨(dú)測(cè)量判別。

【參考文獻(xiàn)】

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：2020版四部[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020.

[2]紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)：JJG 178—2007[S].

【作者簡(jiǎn)介】

周紹華，男，1984年出生，主管藥師，碩士，研究方向?yàn)橹扑幑こ獭?/p>

（編輯：于淼）