【摘要】目的：分析金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法測定人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體的臨床意義。方法：研究對象為2021年1月—2023年6月期間我疾控中心篩查高風(fēng)險場所人群1459人，涉及賓館、酒店、KTV、洗浴中心、足療店，對所有人員先用金標(biāo)法初篩檢測HIV抗體，然后實(shí)施酶聯(lián)免疫法予以復(fù)查，分析不同方法的檢查結(jié)果。結(jié)果：1459人最后確證試驗(yàn)表明陽性人數(shù)12人，兩種檢查方法的診斷效能比較差異較小，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法均可用于HIV抗體的檢測，通過將兩者聯(lián)合使用，可進(jìn)一步減少假陽性，為艾滋病患者的診治提供重要依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】艾滋病；HIV抗體；金標(biāo)法；酶聯(lián)免疫法；檢測價值

Clinical significance research of gold labeling and enzyme-linked immunosorbent assay for detecting HIV antibodies

GAO Zhibin

Zibo Linzi District Center for Disease Control and Prevention， Zibo， Shandong 255400， China

【Abstract】Objective：To analyze the clinical significance of gold standard method and enzyme-linked immunoassay for detecting human immunodeficiency virus （HIV） antibodies.Methods：The study objects were 1459 high risk population screened by our CDC from January 2021 to June 2023，involving guesthouses，hotels，KTV，bath center and foot therapy shops.All personnel were first screened to detect HIV antibodies using the gold standard method，then implemented enzyme-linked immunization method to review，and the examination results of different methods were analyzed.Results：The final confirmatory test of 1459 individuals showed that there were 12 positive cases，and the diagnostic efficacy of the two examination methods was relatively small，with no statistical significance （P>0.05）.Conclusion：Both gold standard method and enzyme-linked immunoassay method can be used for the detection of HIV antibody.By combining the two methods，the false positives can be further reduced and provide an important basis for the diagnosis and treatment of AIDS patients.

【Key？Words】AIDS； HIV antibody； Gold standard method； Enzyme-linked immunoassay； Test value

艾滋病是常見的一類傳染性疾病，結(jié)合有關(guān)艾滋病的研究分析，其可通過性接觸、血液、母嬰等方式傳播。艾滋病可使人體產(chǎn)生嚴(yán)重的免疫缺陷，由于缺乏免疫力的抵抗，感染將更難治愈，并可導(dǎo)致患者75+zfgfZWm4OykWuLsxVtXooxhyrgS1RZBd8VHtIKlQ=死亡[1]。進(jìn)行艾滋病檢測主要的作用是篩查艾滋病，能夠幫助患者盡早明確是否感染艾滋病病毒，并及時采取治療措施，積極控制疾病進(jìn)展，提高患者的生存質(zhì)量，還有助于防止艾滋病進(jìn)一步蔓延。此外，已經(jīng)明確感染的患者進(jìn)行艾滋病檢測，其檢測結(jié)果能夠提供相關(guān)參考依據(jù)，有助于治療[2]。通過對HIV抗體的免疫檢測可作為艾滋病診斷與治療的重要依據(jù)[3]。依據(jù)衛(wèi)生部在2020年頒布的《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（2020年修訂版）》中的相關(guān)要求，HIV抗體免疫檢測需要實(shí)施初篩、復(fù)檢和確認(rèn)，不同階段可使用的檢測技術(shù)也較多。我疾控中心通過對相關(guān)人員實(shí)施金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法測定HIV抗體，證實(shí)將兩者聯(lián)合應(yīng)用，更有利于保證艾滋病診斷的準(zhǔn)確性，規(guī)避假陽性，現(xiàn)就有關(guān)資料予以分析，旨在更好地指導(dǎo)HIV抗體的檢測。

1資料與方法

1.1一般資料

研究對象為2021年1月—2023年6月期間我疾控中心篩查高風(fēng)險場所人群1459人，涉及賓館、酒店、KTV、洗浴中心、足療店，其中2021年檢測總?cè)藬?shù)為668人，2022年檢測總?cè)藬?shù)為460人，2023年檢測總?cè)藬?shù)為331人，其中包括男性959人，女性500人，年齡在20～48歲，平均年齡（34.80±4.35）歲。不同人員均在我疾控中心完成HIV抗體檢測，且初篩、復(fù)檢試驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)均有詳細(xì)記錄。

1.2方法

對所有人員先采取金標(biāo)法完成HIV抗體初篩檢測，然后對所有人員再實(shí)施酶聯(lián)免疫法予以復(fù)查，最后通過確證試驗(yàn)得到最終結(jié)果，詳細(xì)檢查方法如下。

金標(biāo)法：疾控中心工作人員采集不同人員的靜脈血液，采血過程中需要做好防護(hù)措施，避免接觸不同篩查人員的血液，抽取血液3mL，并將血樣裝到試管中。本次所使用的人類免疫缺陷病毒（HIV1+2型）抗體診斷試劑盒（金標(biāo)法）來源于北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，嚴(yán)格按照詳細(xì)說明書完成初篩、比對與分析，其中HIV抗體陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：同時出現(xiàn)質(zhì)控線、檢測線兩條紅線，如果檢測后無質(zhì)控線則屬于無效測試，視情況重復(fù)進(jìn)行金標(biāo)法檢測。

酶聯(lián)免疫法：人類免疫缺陷病毒（HIV）抗原抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）、質(zhì)控血清均來源于北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司。采集不同人員的血樣，血樣需要凝集超過30min。利用稀釋液稀釋酶復(fù)合物，符合要求后加血清及陰、陽性的對照，后續(xù)經(jīng)過孵育、洗板加底物，避光反應(yīng)、加終止液等完成整個反應(yīng)，反應(yīng)完成后需要及時分析并讀取結(jié)果，結(jié)合具體數(shù)值結(jié)果判斷HIV抗體的陽性或者陰性。

對于酶聯(lián)免疫法檢測后的陽性、陰性人員，需要實(shí)施確證試驗(yàn)，具體可使用免疫印跡試驗(yàn)完成驗(yàn)證。

1.3觀察指標(biāo)

（1）不同檢測方法對HIV抗體的檢測結(jié)果；（2）不同檢測方法對HIV抗體檢測的診斷效能，其中診斷準(zhǔn)確率=（真陰性人數(shù)+真陽性人數(shù)）/（真陽性人數(shù)+假陽性人數(shù)+假陰性人數(shù)+真陰性人數(shù)）×100.00%；靈敏度=真陽性人數(shù)/（真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù)）×100.00%；特異度=真陰性人數(shù)/（真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù)）×100.00%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1不同檢測方法對HIV抗體的檢測結(jié)果

金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法測定HIV抗體陽性檢出率比較差異較小，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），如表1所示。

2.2不同檢測方法對HIV抗體檢測的診斷效能

金標(biāo)法診斷準(zhǔn)確率為99.93%（1458/1459），靈敏度為100.00%（12/12），特異性為99.93%（1446/1447）；酶聯(lián)免疫法診斷準(zhǔn)確率為100.00%（1459/1459），靈敏度為100.00%（12/12），特異性為100.00%（1447/1447）。金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法測定HIV抗體的診斷效能存在一致性，差異較?。≒>0.05），相關(guān)數(shù)據(jù)見表2。

3討論

艾滋病作為一種危害性較大的傳染性疾病，通過對其篩查與診斷，有利于更好地指導(dǎo)艾滋病治療，改善我國艾滋病發(fā)病與治療現(xiàn)狀[4]。HIV抗體檢測是篩查相關(guān)人員有無感染艾滋病的常用方法之一，結(jié)合有關(guān)HIV抗體篩查的研究，如果HIV抗體為陽性，則需要進(jìn)一步開展確診實(shí)驗(yàn)的，這是因?yàn)槌鹾Y陽性中可能存在假陽性情況。通過確診實(shí)驗(yàn)后顯示為陽性者則可確診為艾滋病。對于確診感染艾滋病病毒患者則需要及時做好規(guī)范治療，并重視對患者病毒水平、CD4細(xì)胞等監(jiān)測，從而保證患者預(yù)后[5]。

對于一些高風(fēng)險場所從業(yè)人員進(jìn)行HIV抗體篩查，則可避免相關(guān)人員本身存在艾滋病并通過相關(guān)途徑導(dǎo)致他人的感染，影響到整體艾滋病控制現(xiàn)狀。HIV抗體檢測技術(shù)是進(jìn)行艾滋病篩查的常用方法，具體篩查中需要經(jīng)過初篩、復(fù)檢和確認(rèn)，從而保證實(shí)際檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性[6]。不同方法在具體HIV抗體檢測原理、方法等方面存在差異性，其中使用率較高的為金標(biāo)法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。

結(jié)合有關(guān)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金標(biāo)法在HIV抗體檢測方面的應(yīng)用，兩種檢測方法均可較快得到檢驗(yàn)結(jié)果，通過HIV抗體檢測篩查出不同受檢者有無艾滋病風(fēng)險。部分學(xué)者指出，HIV抗體檢測中，金標(biāo)法滿足疾控中心實(shí)驗(yàn)室檢測要求，具有較高的診斷特異性、靈敏度與準(zhǔn)確率，操作簡單，可較快出結(jié)果，但是其在操作中，如果加血樣過量很容易引起假陽性，即使操作規(guī)范，但是從金標(biāo)法本身檢驗(yàn)原理方面分析，該方法在使用中易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。部分學(xué)者指出，金標(biāo)法在HIV抗體檢測中無法滿足大樣本量的檢測需要，使得金標(biāo)法在HIV抗體檢測方面的應(yīng)用受到影響[7]。

HIV抗體使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測過程中，早期使用的是間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測方法，敏感性、特異性一般，此后經(jīng)過不斷發(fā)展，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測HIV抗體過程中，不僅提高了檢測的特異性與靈敏度，同時還能縮短HIV病毒感染者的窗口期，保證了HIV抗體整體檢測效果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測HIV抗體過程中可進(jìn)行較多樣本的檢測，但是整個操作過程較繁瑣，涉及多個環(huán)節(jié)，對工作人員的要求較高，耗時也明顯增加[8]。

本研究中通過對高風(fēng)險場所人員進(jìn)行HIV抗體篩查，具體篩查中先使用金標(biāo)法，這主要是因?yàn)榻饦?biāo)法檢測操作更加便捷，能夠更快出結(jié)果，但是考慮到金標(biāo)法檢測后存在假陽性可能，故而在復(fù)檢試驗(yàn)中采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，通過兩種不同檢查方法的對比，可更好地保證診斷結(jié)果，降低單一方法在應(yīng)用中可能出現(xiàn)的誤診、漏診情況。結(jié)合確證試驗(yàn)分析，金標(biāo)法在HIV抗體檢測中有1例為假陽性，而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測后的整體診斷準(zhǔn)確率、特異性、靈敏度均達(dá)到100.00%。由此可見，在HIV抗體檢測中，同時應(yīng)用金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法可保證實(shí)際診斷結(jié)果。實(shí)際在HIV抗體檢測中，考慮到聯(lián)合檢查的成本以及工作量問題，可先用金標(biāo)法初篩檢測出HIV抗體陽性，再用酶聯(lián)免疫法復(fù)查，并依據(jù)確證試驗(yàn)得到最終陽性人數(shù)。通過兩種方法的互相對照，優(yōu)勢互補(bǔ)，保證HIV抗體檢測的準(zhǔn)確性，降低可能出現(xiàn)的HIV抗體假陽性。

疾控中心在進(jìn)行HIV抗體檢測過程中，需要掌握不同HIV抗體檢測的原理、操作步驟，并保證各項(xiàng)操作均符合質(zhì)控要求，與此同時，不同疾控中心還需要考慮自身實(shí)驗(yàn)室條件能否滿足相關(guān)HIV抗體檢測要求，避免實(shí)驗(yàn)室環(huán)境因素對實(shí)際檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。實(shí)際在HIV抗體檢測中還需要考慮部分篩查者可能存在的窗口期問題，結(jié)合前期篩查結(jié)果，囑咐部分高風(fēng)險人員定期進(jìn)行HIV抗體檢測。

綜上所述，金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法均可用于HIV抗體的檢測，通過將兩者聯(lián)合使用，可進(jìn)一步減少假陽性，為艾滋病患者的診治提供重要依據(jù)。

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