摘 要 用白花玉簪腋芽作為外植體，篩選出適宜誘導(dǎo)增殖生根等不同階段的配方，以及適合移栽的基質(zhì)，煉苗成活率高，為白花玉簪組織培養(yǎng)快繁技術(shù)提供了技術(shù)參考。

關(guān)鍵詞 白花玉簪;腋芽;組織培養(yǎng)

白花玉簪是百合科玉簪屬多年生宿根花卉。葉叢生，花莖從葉叢中抽出，葉片卵形或卵圓形，花朵簇生或單生，喜濕潤(rùn)肥沃的土壤，耐陰，在園林綠化方面用途廣泛，主要種植在行道樹下、公園、草坡、巖石旁等。白花玉簪常用的繁殖方法有分株繁殖和種子繁殖。

近幾年來，白花玉簪種苗需求量較大，分株繁殖和種子繁殖受季節(jié)影響，繁殖速度慢，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，生產(chǎn)成本增加，植株還容易發(fā)生變異。利用組織培養(yǎng)繁育能解決以上問題，并在短期內(nèi)生產(chǎn)出大量無菌種苗。

白花玉簪組織培養(yǎng)外植體主要有莖段、腋芽等。以白花玉簪腋芽為材料，通過組織培養(yǎng)繁殖方法生產(chǎn)大量無菌種苗，且煉苗成功，現(xiàn)將白花玉簪組織培養(yǎng)繁殖方法總結(jié)如下。

1 外植體的選擇及清洗

1.1 外植體選擇 4—5月，晴天上午11：00或下午3：00前進(jìn)行，選擇生長(zhǎng)旺盛、沒有病蟲害、花朵數(shù)量多的白花玉簪，用鏟子帶根挖出分糵的幼苗。挖取外植體時(shí)工具和手須消毒，防止感染。

1.2 外植體清洗 采回的幼苗先清理干凈泥土和雜物后，剪掉下部須根，保留基部鱗芽，去除葉柄，在自來水下沖洗干凈，再用洗衣粉或洗潔精仔細(xì)清洗，用流水沖洗1 h左右。

2 接種前的準(zhǔn)備工作

2.1 超凈臺(tái)滅菌 接種前1 h打開超凈臺(tái)，讓其處于工作狀態(tài)，打開臺(tái)上紫外線燈，照射20 min，關(guān)掉紫外線燈，用75%酒精對(duì)手進(jìn)行消毒，再把超凈臺(tái)從上到下、從內(nèi)到外、從左到右用75%酒精擦拭1遍。

2.2 工具滅菌 先用75%酒精擦拭刀架1遍，用鑷子夾住蘸有95%酒精的脫脂棉，用酒精燈點(diǎn)燃后，對(duì)刀架、接種盤里外進(jìn)行灼燒滅菌，滅菌好的接種盤放上濾紙。再依次對(duì)解剖刀、鑷子進(jìn)行灼燒滅菌，放在刀架上冷卻，待用。

2.3 培養(yǎng)基及培養(yǎng)瓶滅菌 用蘸有75%的酒精脫脂棉擦拭培養(yǎng)基和無菌水瓶塞、瓶口、瓶身、瓶底，放入超凈工作臺(tái)。

3 外植體消毒

外植體清洗干凈后，放在消過毒的超凈工作臺(tái)上，用無菌脫脂棉擦拭1遍外植體表面。

用75%酒精消毒30 s，用無菌水沖洗3遍;用有效氯1%的NaClO溶液消毒15 min，用無菌水沖洗5遍;剝?nèi)パ客鈧?cè)的苞片，再用有效氯0.5%的NaClO溶液消毒5 min，用無菌水沖洗5遍。

4 誘導(dǎo)及培養(yǎng)條件

消毒好的外植體置于接種盤中，用濾紙吸干表面水分，用刀片切割出腋芽生長(zhǎng)點(diǎn)，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配比如下：

（1）MS+1 mg/L 6-BA+0.1 g/L NAA+30 g/L糖;

（2）MS+3 mg/L 6-BA+0.2 g/L NAA+30g/L糖，瓊脂4.7 g/L，pH值5.8。

每個(gè)培養(yǎng)瓶接種3個(gè)，蓋上瓶塞，注明編號(hào)、日期、品種、培養(yǎng)基名稱、接種人員等，放到培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。

放入培養(yǎng)室后暗光培養(yǎng)約1周， 逐漸增加光照，培養(yǎng)室溫度25 ℃， 光照時(shí)間12 h/d，光照強(qiáng)度800～1 000 lx，室內(nèi)濕度40%。

經(jīng)過30 d的觀察，第1種培養(yǎng)基出芽率高、芽品質(zhì)一致、感染率低，適宜作誘導(dǎo)培養(yǎng)基。

5 增殖培養(yǎng)

培養(yǎng)30 d無菌芽長(zhǎng)出，將健康的芽切割下來，轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基：

（1）MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+50 mg/L KH2PO4+水解乳蛋白500 mg/L+30 g/L糖;

（2）MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L糖，瓊脂4.7 g/L，pH值5.8。

增殖階段每瓶放16個(gè)芽，放置在培養(yǎng)室培養(yǎng)，溫度25 ℃，光照時(shí)間12 h/d，光照強(qiáng)度1 500 lx。

接種3 d后檢查芽感染情況，并及時(shí)清理。培養(yǎng)15 d左右，萌發(fā)出2～3片葉。1個(gè)月后，玉簪芽長(zhǎng)到一定高度，形成多個(gè)芽簇狀。把每個(gè)芽分離出來，剪掉1/2葉片，繼續(xù)進(jìn)行繼代培養(yǎng)。每月繼代1次，以后每月大約以10倍以上的速度繁育，半年內(nèi)就可以形成大量的無菌植株。繼代階段也可以挑出健壯的芽直接進(jìn)行生根培養(yǎng)，其余芽繼續(xù)繁殖。

增殖階段第2種培養(yǎng)基分化率高、感染率低、無畸形苗，繼代后芽的品質(zhì)穩(wěn)定， 適宜作增殖培養(yǎng)基。

6 生根培養(yǎng)

芽苗生長(zhǎng)到一定高度時(shí)，選擇健壯無感染、3～4片葉、長(zhǎng)約2 cm的芽，用消毒過的剪刀剪下來，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)接時(shí)不要傷及葉片或莖部。

（1）1/4MS+0.1 mg/L NAA+30 g/L糖;

（2）MS+1 mg/L IAA+30 g/L糖，瓊脂4.7 g/L，pH值5.8。

生根階段每瓶放11個(gè)芽，放置培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。溫度25 ℃，光照時(shí)間12 h/d，光照強(qiáng)度2 000 lx。

培養(yǎng)10 d左右，第1種培養(yǎng)基根長(zhǎng)出，根長(zhǎng)約0.5 cm，3～4條。培養(yǎng)30 d， 根長(zhǎng)1.5 cm以上，根多、粗壯、有活力，適合煉苗的標(biāo)準(zhǔn)。故選擇第1種培養(yǎng)基做為白花玉簪的生根培養(yǎng)基。

7 馴化及移栽

從培養(yǎng)室移到溫室的瓶苗，在移栽前必須馴化15～20 d。先用遮陰網(wǎng)蓋住瓶苗，白天溫度23～27 ℃，晚上20～23 ℃，濕度70%左右。經(jīng)過一段時(shí)間的鍛煉，幼苗葉片由嫩黃色帶有白色條紋變成純翠綠色，白色條紋消失，而且還萌發(fā)新葉，原有葉片由長(zhǎng)形長(zhǎng)大變成卵圓形，幼苗整體長(zhǎng)高，并長(zhǎng)出新根，根變粗，表明幼苗已經(jīng)適應(yīng)外界環(huán)境，即可移栽。

出瓶前1 d，打開瓶塞，蓋上報(bào)紙，使瓶?jī)?nèi)濕度與溫室濕度接近，用高錳酸鉀對(duì)花盆（10 cm×10 cm硬塑料盆）進(jìn)行滅菌。準(zhǔn)備好所需的基質(zhì)，園土（帶細(xì)沙）、泥炭、珍珠巖、椰糠按2 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 1比例混合，并用多菌靈消毒備用。

用鑷子從瓶里將幼苗取出時(shí)，應(yīng)注意不要弄傷葉片和根部。苗取出來后，先把黃葉剪掉，清理根部雜物，1條根或無根的苗，撿出扔掉。選擇生長(zhǎng)健壯、根系發(fā)達(dá)、根多的幼苗，用純凈水洗掉雜質(zhì)和培養(yǎng)基，再放到10%多菌靈溶液中消毒60 s后移栽到硬塑料盆中。栽好幼苗后，按品種分類擺放在苗床上，注明品種、日期，方便以后查看。

移栽15 d左右，長(zhǎng)出新葉片后，可以移到溫室外的樹下自然生長(zhǎng)。

任武婷，陜西省苗木繁育中心，郵編722300（眉縣）。

收稿日期：2024-04-12