摘 " "要：為挖掘優(yōu)良的促生細(xì)菌菌株，通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對(duì)煙草中分離的內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行鑒定，并測(cè)定其對(duì)小白菜的促生活性。經(jīng)鑒定該內(nèi)生菌為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens），命名菌株為NTBA。該菌具有解有機(jī)磷、解無(wú)機(jī)磷和解鉀活性，并能夠產(chǎn)IAA。采用土壤中施入100、10、1 μL菌液的澆灌施菌法和小白菜種子的菌液浸種法，并以澆灌無(wú)菌水作為對(duì)照，測(cè)定對(duì)小白菜的促生作用。結(jié)果表明，培養(yǎng)10、15和20 d，2種施菌方法處理的小白菜的葉長(zhǎng)、葉寬、株高及莖粗均顯著高于對(duì)照；培養(yǎng)20 d時(shí)，3個(gè)濃度菌液澆灌處理和菌液浸種處理的小白菜鮮質(zhì)量分別比對(duì)照增加了78.99%、76.08%、70.29%和84.78%，干質(zhì)量增加了86.44%、76.27%、31.36%和88.98%，最長(zhǎng)根長(zhǎng)分別增加了118.98%、83.94%、45.99%和63.50%?？梢?jiàn)，解淀粉芽孢桿菌NTBA能夠明顯促進(jìn)小白菜生長(zhǎng)，提高其產(chǎn)量。研究結(jié)果可為小白菜生產(chǎn)提供有益的促生菌，也為其他作物生產(chǎn)提供了潛在的促生菌資源。

關(guān)鍵詞：解淀粉芽孢桿菌；小白菜；促生

中圖分類(lèi)號(hào)：S634.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1673-2871（2024）08-123-08

Isolation of Bacillus amyloliquefaciens NTBA and determination of the growth-promoting activity on Chinese cabbage

WANG Mei1， SHANG Chunxiao2， LIU Zhenyu3， LI Xiangying3

（1. Agricultural Technology Extension Center， Fei County Agriculture and Rural Bureau， Feixian 273400， Shandong， China; 2. Agriculture and Rural Bureau， Liaocheng Jiangbei Water City， Liaocheng 252000， Shandong， China; 3. College of Plant Protection， Shandong Agricultural University， Taian 271018， Shandong， China）

Abstract： To explore excellent strains of growth promoting bacteria， endophytic bacteria isolated from tobacco were identified using morphological and molecular biology methods， and its growth promoting activity on Chinese cabbage was determined. The endophytic bacterium was identified as Bacillus amyloliquefaciens， and assigned as NTBA. It was found that the bacterium had the activity of hydrolyzing organic phosphorus， inorganic phosphorus and potassium， and could produce IAA. The growth promotion effect on Chinese cabbage was determined by pouring 100 μL， 10 μL and 1 μL bacterial solutions in the soil and by soaking Chinese cabbage seeds with bacterial solution， with sterile water as the control. The results showed that after cultured for 10， 15， and 20 days， the leaf length， leaf width， plant height， and stem diameter of Chinese cabbage treated with the two methods were significantly higher than those of the control. After 20 days of culture， compared with the control， the fresh mass of Chinese cabbage treated by pouring three concentrations of the bacterial solution and soaking seeds with bacterial solution increased by 78.99%， 76.08%， 70.29%， and 84.78%， respectively. The dry mass increased by 86.44%， 76.27%， 31.36%， and 88.98%， respectively. The root growth of Chinese cabbage was increased by 118.98%， 83.94%， 45.99%， and 63.50%， respectively. In conclusion， B. amylolyquenfaciens NTBA can obviously promote the growth of Chinese cabbage and increase its yield. This study provides beneficial plant growth-promoting bacteria for the production of Chinese cabbage and potential growth-promoting bacteria resources for other crops.

Key words： Bacillus amyloliquefaciens; Chinese cabbage; Growth-promoting activity

蔬菜等作物的產(chǎn)量增加和品質(zhì)提升是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要目標(biāo)，合理使用肥料是達(dá)成此目標(biāo)的重要方法。一直以來(lái)，化學(xué)肥料是重要的農(nóng)用投入品，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中起到重要作用。隨著人們對(duì)施用化肥利與弊認(rèn)識(shí)的不斷深入，近年來(lái)微生物肥料發(fā)展迅速且已成為肥料行業(yè)最具活力的板塊之一[1-2]。挖掘可用于蔬菜等作物生產(chǎn)的微生物資源，已成為科研人員和生產(chǎn)實(shí)踐者關(guān)注的熱點(diǎn)[3-5]。

細(xì)菌在自然界中種類(lèi)很多且分布廣泛，功能復(fù)雜多樣，是重要的生態(tài)元素也是重要的農(nóng)業(yè)資源。芽孢桿菌屬是一類(lèi)具有良好功能并取得較多應(yīng)用的細(xì)菌資源[6-8]，在促進(jìn)植物生長(zhǎng)[9-10]、植物抗病[11-13]和抗逆[14]等方面發(fā)揮了突出作用。研究發(fā)現(xiàn)，以解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZHRO制成的生物菌肥能夠提高甘蔗的生物量，提高根際土壤肥力[15]；解淀粉芽孢桿菌SQ-2具有解磷酸三鈣活性和固氮能力，具有對(duì)水稻的促生活性[16]；解淀粉芽孢桿菌DGL1具有一定的降解纖維素活性，具有促進(jìn)牧草種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)的能力[17]。張開(kāi)祥等[18]研究也發(fā)現(xiàn)，解淀粉芽孢桿菌微生物菌劑可使小白菜增產(chǎn)15.44%。上述研究表明，解淀粉芽孢桿菌對(duì)多種作物具有良好的促生作用，發(fā)掘和利用該類(lèi)菌株具有重要意義。

解淀粉芽孢桿菌廣泛存在于土壤、植物表面和體內(nèi)，開(kāi)展從不同生境中獲取有價(jià)值的菌株，并嘗試用于作物生產(chǎn)的研究有重要意義。筆者的研究即嘗試從煙草中獲取內(nèi)生細(xì)菌，并以小白菜為試材，探究菌株對(duì)小白菜的促生作用，以期為小白菜乃至其他作物生產(chǎn)提供菌種資源。

1 材料與方法

1.1 細(xì)菌的分離和鑒定

1.1.1 細(xì)菌的分離與純化 所用細(xì)菌菌株分離自成株期健康煙草莖稈，煙草莖稈采集自山東省諸城市賈悅鎮(zhèn)瑯埠煙田，采集時(shí)間為2017年9月，保存于超低溫冰箱備用。將煙草莖稈切成長(zhǎng)度5 cm左右的小段，75%酒精浸泡1 min后，用無(wú)菌水沖洗3次，再用酒精外焰輕燒表面滅菌10 s，將髓部組織縱向切成2 mm×2 mm薄片，并接種到LB固態(tài)培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)3 d。根據(jù)細(xì)菌菌落特征，選取細(xì)菌單菌落，在LB固態(tài)培養(yǎng)基劃線(xiàn)培養(yǎng)，28 ℃培養(yǎng)3 d。挑取單菌落置于5 mL的LB培養(yǎng)基中，在28 ℃、200 r·min-1的條件下振蕩培養(yǎng)24 h，命名為NTBA，于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 細(xì)菌的鑒定 細(xì)菌鑒定試驗(yàn)于2018年5月開(kāi)展，地點(diǎn)為山東農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

將菌株NTBA接種到LB固態(tài)培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)3～5 d，采用體式熒光顯微鏡觀察菌落特征并拍照，采用革蘭氏染色法，觀察細(xì)菌菌體形態(tài)和芽孢特征。

菌株分子鑒定：在LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌，獲得菌體，提取菌體基因組DNA。以菌體DNA為模板，PCR擴(kuò)增該菌株16S rRNA、gyrA和rpoB基因片段。16S rRNA基因的引物對(duì)為27f （5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'）和1492r （5'-CGGTGTGTACAAGGCCC-3'）；gyrA的引物對(duì)為gyrA-F （5'-CAGTCAGGAAATGCGTACGTCCTT-3'）和gyrA-R （5'-CAAGGTAATGCTCCAGGCATTGCT-3'）；rpoB的引物對(duì)為rpoB 2292f-F （5'-GACGTGGATGGCTACAACT-3'）和rpoB 3354r （5'-ATTGTCGCCTTTAACGATGG-3'）。反應(yīng)體系：95 ℃預(yù)變性 5 min；94 ℃變性40 s，56 ℃復(fù)性40 s，72 ℃延伸90 s，30個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min。電泳檢測(cè)，將獲得的16S rRNA、gyrA和rpoB基因片段測(cè)序，并將16S rRNA、gyrA和rpoB基因序列進(jìn)行BLASTn，根據(jù)BLASTn結(jié)果，利用MEGA 11軟件，基于最大似然法（Maximum Likelihood）進(jìn)行多基因聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)構(gòu)建。

1.2 解磷、解鉀及產(chǎn)IAA活性測(cè)定

試驗(yàn)開(kāi)展于2018年5—8月，地點(diǎn)為山東農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2.1 解磷活性測(cè)定 參照張玉苗[19]的方法測(cè)定菌株NTBA解磷活性。配制解無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基和解有機(jī)磷培養(yǎng)基。將活化好的菌懸液2 μL點(diǎn)接于解磷培養(yǎng)基中，28 ℃培養(yǎng)120 h，觀察測(cè)定透明圈大小，測(cè)量透明圈（即溶磷圈）直徑（D）和菌落直徑（d），計(jì)算D/d值。試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)。

1.2.2 解鉀活性測(cè)定 參照文獻(xiàn)[20-21]的方法檢測(cè)NTBA的解鉀活性。取NTBA菌懸液2 μL點(diǎn)接在鉀長(zhǎng)石粉的培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)120 h，測(cè)量透明圈（即解鉀圈）直徑（D）和菌落直徑（d），計(jì)算D/d值。試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)。

1.2.3 產(chǎn)IAA活性測(cè)定 將細(xì)菌接種在含200 mg·L-1 L-色氨酸R2A培養(yǎng)基中，28 ℃、200 r·min-1培養(yǎng)3和5 d，然后使用Salkowski方法測(cè)定IAA活性[22]。將未接種細(xì)菌的含有200 mg·L-1 L-色氨酸的R2A培養(yǎng)基，在28 ℃培養(yǎng)3和5 d，作為陰性對(duì)照。將細(xì)菌以10 000 r·min-1離心，將上清液與Salkowski試劑混合。利用酶標(biāo)儀測(cè)定530 nm處光密度值。試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)。用0、5、10、20、40和60 mg·L-1 IAA的光密度值生成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

1.3 菌株NTBA對(duì)小白菜的促生試驗(yàn)

試驗(yàn)開(kāi)展于2018年5—8月。地點(diǎn)為山東農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，小白菜盆栽試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室光照培養(yǎng)箱中開(kāi)展。

1.3.1 菌株NTBA菌液的獲得 將在LB固體培養(yǎng)基上劃線(xiàn)活化的菌株NTBA，挑取單菌落，置于5 mL的LB培養(yǎng)基中，在28 ℃、200 r·min-1的條件下振蕩培養(yǎng)12～24 h，然后吸取50 μL菌液轉(zhuǎn)移至50 mL的LB培養(yǎng)基中，在28 ℃、180 r·min-1振蕩培養(yǎng)24 h，獲得菌液，用于小白菜的促生試驗(yàn)。

1.3.2 小白菜的盆栽與施菌方法 小白菜為北京青梗奶油小白菜，購(gòu)自北京九方盛遠(yuǎn)種子有限公司。將小白菜種子用無(wú)菌水浸泡16 h，播種于裝有滅菌土壤（121 ℃下濕熱滅菌2 h）的塑料盆中。采用圓形塑料盆，直徑33 cm、深13 cm，每盆播種2粒小白菜種子。

NTBA施菌方法分為菌液澆灌施菌法和浸種法。澆灌施菌法：播種小白菜后，將不同量的1.5.1獲得的菌液澆灌盆土中，A為每盆加入100 μL的NTBA菌液；B為每盆加入10 μL菌液和90 μL無(wú)菌水；C為每盆加入1 μL菌液和99 μL無(wú)菌水。浸種法：D為將小白菜種子用無(wú)菌水浸泡16 h，用1.5.1獲得的菌液浸泡5 min，然后播種。CK為每盆中加入100 μL無(wú)菌水，作為空白對(duì)照。每個(gè)處理5盆。

將小白菜放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25 ℃，相對(duì)濕度60%，光照度為36 μmol·m-2·s-1，光照時(shí)間12 h。

1.3.3 小白菜主要農(nóng)藝性狀測(cè)定方法 小白菜培養(yǎng)10、15、20 d時(shí)，分別測(cè)定葉長(zhǎng)、葉寬、株高、莖粗。將培養(yǎng)20 d時(shí)的小白菜小心取出，并清除根際土壤，測(cè)定根的最大長(zhǎng)度作為根長(zhǎng)；稱(chēng)量小白菜地上部分鮮質(zhì)量，并在干燥箱80 ℃下烘干48 h后測(cè)定干質(zhì)量，計(jì)算小白菜單株平均鮮質(zhì)量與干質(zhì)量。試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和制圖。用IBM SPSS Statistics 20 軟件進(jìn)行單因素方差分析，并用 Duncan's法進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌株NTBA的鑒定

2.1.1 形態(tài)學(xué)特征 菌株NTBA的菌落顏色為乳白色至淺黃色，初表面光滑濕潤(rùn)，后逐漸呈粗糙干燥，菌落扁平，邊緣不整齊，中央平，四周隆起，半透明，無(wú)光澤（圖1-A）；菌體經(jīng)革蘭氏染色后呈紫紅色，為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌（圖1-B）；菌體為長(zhǎng)桿狀，產(chǎn)芽孢，芽孢形成于菌體中部。

2.1.2 分子生物學(xué)鑒定 經(jīng)PCR獲得菌株NTBA 的16S rRNA、gyrA和rpoB片段，并測(cè)序進(jìn)行Blastn，從Genbank選擇典型相關(guān)序列，將其與NTBA的16S rRNA、gyrA和rpoB基因序列構(gòu)建多基因聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)，并以多黏類(lèi)芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）的相關(guān)序列為外群（圖2）。結(jié)果表明，NTBA和解淀粉芽孢桿菌 （B. amyloliquefaciens）之間的相似性更高，在進(jìn)化樹(shù)上聚類(lèi)為一支。結(jié)合NTBA菌落特征和菌體特征，將菌株NTBA鑒定為解淀粉芽孢桿菌。

2.2 解淀粉芽孢桿菌NTBA解磷、解鉀活性與產(chǎn)IAA能力

2.2.1 NTBA解磷活性 測(cè)定NTBA在無(wú)機(jī)磷和有機(jī)磷培養(yǎng)基上培養(yǎng)120 h的菌落直徑（d）和透明圈直徑（D），在無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基上D/d是3.15，在有機(jī)磷培養(yǎng)基上D/d是3.47（圖3），表明NTAB具有解無(wú)機(jī)磷和有機(jī)磷的活性。

2.2.2 NTBA解鉀活性 測(cè)定NTBA在鉀長(zhǎng)石粉培養(yǎng)基上培養(yǎng)120 h的菌落直徑（d）和透明圈直徑（D），計(jì)算得出D/d是1.51（圖4），表明NTAB具有解鉀活性。

2.2.3 NTBA的產(chǎn)IAA能力 將NTBA在含有200 mg·L-1 L-色氨酸的R2A培養(yǎng)基中培養(yǎng)3 d，測(cè)得IAA的含量（ρ，后同）為0.32 mg·L-1，培養(yǎng)5 d，IAA含量為0.42 mg·L-1（圖5），可見(jiàn)NTBA具有產(chǎn)IAA的能力。

2.3 解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜葉片的促生作用

在小白菜培養(yǎng)至10、15和20 d時(shí)，測(cè)定其葉長(zhǎng)、葉寬。培養(yǎng)10 d時(shí)，100、10、1 μL 3個(gè)菌液澆灌處理的小白菜的葉長(zhǎng)比對(duì)照分別顯著增加了71.44%、33.04%、29.75%，葉寬比對(duì)照分別顯著增加了52.77%、36.64%、12.21%；菌液浸種處理的小白菜的葉長(zhǎng)比對(duì)照顯著增加了13.35%，葉寬比對(duì)照增加了57.17%（圖6-A）。培養(yǎng)15 d時(shí)，100、10、1 μL 3個(gè)菌液澆灌處理的小白菜的葉長(zhǎng)比對(duì)照分別顯著增加了48.04%、41.22%、30.58%，葉寬比對(duì)照分別顯著增加了37.85%、47.88%、23.11%；菌液浸種處理的小白菜的葉長(zhǎng)比對(duì)照增加了34.13%，葉寬比對(duì)照增加了45.99%（圖6-B）。培養(yǎng)20 d時(shí)，100、10、1 μL 3個(gè)菌液澆灌處理的小白菜的葉長(zhǎng)比對(duì)照分別顯著增加了38.74%、51.31%、33.78%，葉寬比對(duì)照分別顯著增加了19.11%、21.23%、43.38%；菌液浸種處理的小白菜的葉長(zhǎng)比對(duì)照增加了24.28%，葉寬比對(duì)照增加了24.87%（圖6-C）?？梢?jiàn)解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜的葉片生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用，NTBA菌液澆灌和菌液浸種均能促進(jìn)小白菜葉長(zhǎng)和葉寬的生長(zhǎng)。

將小白菜培養(yǎng)20 d，測(cè)定其鮮質(zhì)量和干質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)不同菌液處理均顯著增加了小白菜鮮質(zhì)量、干質(zhì)量。菌液浸種處理的小白菜鮮質(zhì)量比對(duì)照增加了84.78%，100、10、1 μL 3個(gè)菌液澆灌處理的小白菜鮮質(zhì)量比對(duì)照分別增加了78.99%、76.08%、70.29%。菌液浸種處理的小白菜干質(zhì)量比對(duì)照增加了88.98%，100、10、1 μL 3個(gè)菌液澆灌處理的小白菜干質(zhì)量比對(duì)照分別增加了86.44%、76.27%、31.36%（圖6-D）?？梢?jiàn)，施用NTBA菌液能夠增加小白菜的物質(zhì)積累量，提高其產(chǎn)量。

2.4 解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜株高和莖粗的促生作用

NTBA菌液的不同處理均顯著增加了小白菜的株高。菌液澆灌處理100、10、1 μL和菌液浸種處理，培養(yǎng)10 d時(shí)，小白菜的株高比對(duì)照分別增加了59.11%、29.61%、26.28%和39.94%；培養(yǎng)15 d時(shí)比對(duì)照分別增加了43.27%、20.86%、28.29%和28.94%；培養(yǎng)20 d時(shí)，比對(duì)照分別增加了33.30%、19.10%、21.68%和20.61（圖7-A）。說(shuō)明NTBA對(duì)小白菜株高具有促生作用。

NTBA菌液的不同處理均顯著增加了小白菜的莖粗。菌液澆灌處理100、10、1 μL和菌液浸種處理，培養(yǎng)10 d時(shí)，小白菜的莖粗比對(duì)照分別增加了26.19%、11.90%、14.29%和21.43%，培養(yǎng)15 d時(shí)比對(duì)照分別增加了38.39%、29.46%、33.93和33.93%，培養(yǎng)20 d時(shí)比對(duì)照分別增加了30.60%、15.73%、30.26%和24.62%（圖7-B）。說(shuō)明NTBA對(duì)小白菜莖粗具有促生作用。

2.5 解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜根系的促生作用

培養(yǎng)20 d，不同處理對(duì)小白菜根系的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，根長(zhǎng)均顯著大于對(duì)照；澆灌施用不同量的NTBA菌液，其作用效果彼此之間有顯著差異，施用100、10、1 μL的NTBA菌液的小白菜根長(zhǎng)比對(duì)照分別增加了118.98%、83.94%、45.99%；NTBA菌液浸種處理的小白菜根長(zhǎng)比對(duì)照增加了63.50%（圖8）?？梢?jiàn)，解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜根系生長(zhǎng)有顯著促進(jìn)作用，菌液澆灌處理與菌液浸種處理均能達(dá)到良好的根系促生作用。

3 討論與結(jié)論

微生物肥料是綠色、可持續(xù)生態(tài)農(nóng)業(yè)不可或缺的投入品，在作物生產(chǎn)中發(fā)揮著重要作用。筆者獲得的煙草內(nèi)生細(xì)菌解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜具有明顯的促生活性，可增加小白菜的物質(zhì)積累量，促進(jìn)其產(chǎn)量提高。前人研究表明植物促生菌S3-1能夠使出苗45 d的小白菜葉片長(zhǎng)度最大增加23.14%[23]，假單胞菌配施有機(jī)肥能夠增加小白菜產(chǎn)量65.97%[24]，筆者采用NTBA原液澆灌處理，使培養(yǎng)10 d的小白菜葉長(zhǎng)增加了71.44%，培養(yǎng)20 d的小白菜鮮質(zhì)量增加了78.99%，顯示出NTBA作為農(nóng)業(yè)微生物資源的良好潛力。

解淀粉芽孢桿菌來(lái)源較廣泛，筆者獲得了植物內(nèi)生細(xì)菌解淀粉芽孢桿菌NTBA。內(nèi)生細(xì)菌往往具有對(duì)植物的促生活性、抗病蟲(chóng)害活性等功能，其功能通常是因?yàn)閮?nèi)生菌具有促進(jìn)植物吸收礦質(zhì)養(yǎng)分、聯(lián)合固氮作用、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生激素等作用機(jī)制[25-26]。本試驗(yàn)分離得到的解淀粉芽孢桿菌NTBA具有較高的解無(wú)機(jī)磷、有機(jī)磷和解鉀活性，以及產(chǎn)IAA的能力，其對(duì)小白菜的促生作用與該活性機(jī)制相關(guān)。

在農(nóng)業(yè)微生物資源中，芽孢桿菌通常被認(rèn)為具有較大的應(yīng)用潛力和價(jià)值，其對(duì)植物有益，對(duì)生態(tài)環(huán)境安全，在穩(wěn)定性與化學(xué)農(nóng)藥的相容性等方面明顯優(yōu)于非芽孢桿菌和真菌等微生物[27-28]。通常解淀粉芽孢桿菌不僅具有對(duì)植物的促生活性，同時(shí)也可以通過(guò)自身合成抗菌物質(zhì)、阻止致病菌定殖、誘導(dǎo)抗性等方式來(lái)防治植物病害[29-33]。因此，后續(xù)研究中可以進(jìn)一步測(cè)定和確定NTBA對(duì)植物病害的防治效果，探討其作為植物病害防治的生防菌劑及作為植物促生菌劑的潛力，擴(kuò)大其應(yīng)用的廣譜性。

筆者的研究結(jié)果表明，解淀粉芽孢桿菌NTBA對(duì)小白菜具有促生作用，通常解淀粉芽孢桿菌的促生活性對(duì)植物具有普遍性[34-35]，那么NTBA也可能存在廣泛的促生活性。本研究結(jié)果表明，NTBA具有作為農(nóng)用微生物的潛力，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供了有價(jià)值的微生物資源，也為農(nóng)用微生物的發(fā)掘與利用提供一定的參考。

參考文獻(xiàn)

[1] 張瑞福，沈其榮．微生物肥料新型功能作用機(jī)理與根際定殖增強(qiáng)策略[J]．微生物學(xué)雜志，2024，44（1）：1-11．

[2] 李常猛．微生物肥料研究文獻(xiàn)綜述[J]．河南農(nóng)業(yè)，2018（1）：26-27．

[3] 康貽軍，程潔，梅麗娟，等．植物根際促生菌作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]．應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2010，21（1）：232-238．

[4] LI X Y，MA S J，MENG Y．et al．Characterization of antagonistic bacteria Paenibacillus polymyxa ZYPP18 and the effects on plant growth[J]．Plants，2023，12（13）：2504．

[5] 胡金雪，樊建英，相叢超，等．枯草芽孢桿菌對(duì)馬鈴薯的促生防病效應(yīng)[J]．中國(guó)瓜菜，2023，36（10）：121-128．

[6] 蘇正川，熊仁科，羅小艷．解淀粉芽孢桿菌的作用及其產(chǎn)品開(kāi)發(fā)[J]．農(nóng)藥科學(xué)與管理，2019，40（6）：21-30．

[7] IDRIS E E，BOCHOW H，ROSS H，et al．Use of Bacillus subtilis as biocontrol agent．VI．Phytohormone-like action of culture filtrates prepared from plant growth-promoting Bacillus amyloliquefaciens FZB24，F(xiàn)ZB42，F(xiàn)ZB45 and Bacillus subtilis FZB37[J]．Journal of Plant Diseases And Protection，2004，111（6）：583-597．

[8] CHOWDHURY S P，DIETEL K，RAENDLER M，et al．Effects of Bacillus amyloliquefaciens FZB42 on lettuce growth and health under pathogen pressure and its impact on the rhizosphere bacterial community[J]．PLOS ONE，2013，8（7）：e68818．

[9] 常文智，馬鳴超，陳慧君，等．膠質(zhì)類(lèi)芽胞桿菌對(duì)花生生長(zhǎng)和土壤微生物學(xué)性狀的影響[J]．應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2014，20（2）：185-191．

[10] 周向平，滕凱，肖啟明，等．貝萊斯芽胞桿菌F10促生作用及對(duì)煙草青枯病的防治效果[J]．煙草科技，2022，55（7）：9-16．

[11] GUO S，ZHANG J W，DONG L H，et al．Fengycin produced by Bacillus subtilis NCD-2 is involved in suppression of clubroot on Chinese cabbage[J]．Biological Control，2019，136：104001．

[12] 姚麗瑾，王琦，付學(xué)池，等．小麥紋枯病生防芽孢桿菌的篩選及鑒定[J]．中國(guó)生物防治，2008，24（1）：53-57．

[13] LI Y，HAN L R，ZHANG Y Y．et al．Biological control of apple ring rot on fruit by Bacillus amyloliquefaciens 9001[J]．Plant Pathology Journal，2013，29（2）：168-173．

[14] 舒健虹，王子苑，曾慶飛，等．基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析阿氏芽孢桿菌R60對(duì)玉米抗旱性的影響[J]．南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2023，54（8）：2340-2351．

[15] 梁恒心，鄒茜，周志忠，等．微生物菌肥對(duì)甘蔗生長(zhǎng)的影響及其施用方法的研究進(jìn)展[J]．中國(guó)糖料，2024，46（1）：79-86．

[16] 李雪，李容歐，孔美懿，等．解淀粉芽孢桿菌SQ-2對(duì)水稻的促生作用[J]．生物技術(shù)通報(bào)，2024，40（2）：109-119．

[17] 楊雪，謝永麗，陳蘭，等．青海沙地白刺根際解淀粉芽孢桿菌DGL1的牧草促生活性及其基因組分析[J]．草地學(xué)報(bào)，2021，29（8）：1637-1648．

[18] 張開(kāi)祥，馬宏秀，楊俊濤，等．解淀粉芽孢桿菌在蔬菜減肥增效中的應(yīng)用效果研究[J]．現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2021（19）：75-77．

[19] 張玉苗．農(nóng)業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M]．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2019．

[20] REASONER D J，GELDERICH E E．A new medium for the enumeration and subculture of bacteria from potable water[J]．Applied and Environmental Microbiology，1985，49（1）：1-7．

[21] SAHA M，MAURYA B R，Meena V S，et al．Identification and characterization of potassium solubilizing bacteria（KSB） from Indo-gangetic plains of India[J]．Biocatalysis and Agricultural Biotechnology，2016，7：202-209．

[22] SUGUMARAN P，JANARTHANAM B．Solubilization of potassium containing minerals by bacteria and their effect on plant growth[J]．World Journal of Agricultural Sciences，2007，3（3）：350-355．

[23] 陸文蔚，徐逍瑤，張麗雯．植物促生菌對(duì)設(shè)施土壤氮循環(huán)細(xì)菌群落及小白菜生長(zhǎng)的影響[J]．上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2023，39（1）：1-8．

[24] 賀國(guó)祥，張杰，孟會(huì)生，等．假單胞菌配施雞糞對(duì)小白菜產(chǎn)量及品質(zhì)的影響[J]．山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，50（10）：1438-1445．

[25] 施國(guó)駒，李菊馨，吳耿寰，等．生防細(xì)菌作用機(jī)理及其防治荔枝病害應(yīng)用情況[J]．農(nóng)業(yè)研究與應(yīng)用，2019，32（2）：38-41．

[26] 陳澤斌，楊躍華，夏振遠(yuǎn)，等．煙草內(nèi)生促生細(xì)菌的篩選及在漂浮育苗中的應(yīng)用效果[J]．中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2013，19（1）：70-75．

[27] 杜麗華，張維瑞，袁王?。獾矸垩挎邨U菌次生代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)展[J]．農(nóng)業(yè)與生態(tài)境，2018（6）：128．

[28] 胡忠亮，鄭催云，田興一，等．解淀粉芽孢桿菌在環(huán)境保護(hù)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]．農(nóng)藥，2016，55（4）：241-245．

[29] WU G W，LIU Y P，XU Y．et al．Exploring elicitors of the beneficial rhizobacterium Bacillus amyloliquefaciens SQR9 to induce plant systemic resistance and their interactions with plant signaling pathways[J]．Molecular Plant-Microbe Interactions，2018，31（5）：560-567．

[30] 林福呈，李德葆．枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）S9對(duì)植物病原真菌的溶菌作用[J]．植物病理學(xué)報(bào)，2003，33（2）：174-177．

[31] SINGH P，XIE J，QI Y，et al．A thermotolerant marine Bacillus amyloliquefaciens S185 producing iturin A5 for antifungal activity against Fusarium oxysporum f. sp. cubense[J]．Marine Drugs，2021，19（9）：516．

[32] HO T H，CHUANG C Y，ZHENG J L，et al．Bacillus amyloliquefaciens strain PMB05 intensifies plant immune responses to confer resistance against bacterial wilt of tomato[J]．Phytopathology，2020，110（12）：1877-1885．

[33] WANG C J，WANG Y Z，CHU Z H，et al．Endophytic Bacillus amyloliquefaciens YTB1407 elicits resistance against two fungal pathogens in sweet potato （Ipomoea batatas（L．）Lam．）[J]．Journal of Plant Physiology，2020，253：153260．

[34] 邱思鑫．防病、促生植物內(nèi)生芽孢桿菌的研究[D]．福州：福建農(nóng)林大學(xué)2004．

[35] SPAEPRN S，DOBBELAERE S，CROONENBORGHS A，et al．Effects of Azospirillum brasilense indole-3-acetic acid production on inoculated wheat plants[J]．Plant and Soil，2008，312（1/2）：15-23．