楊森林 向楊 楊毅軍

摘要：原發(fā)性肝癌是消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其中肝細(xì)胞癌（HCC）占90％以上。早期HCC以手術(shù)切除為主，且預(yù)后較好，然而因HCC起病隱匿，絕大多數(shù)患者確診時(shí)已進(jìn)展至中晚期，手術(shù)治療效果較差，而非手術(shù)治療方式因?yàn)槠毡榇嬖诓涣挤磻?yīng)大，腫瘤選擇性低等問(wèn)題，療效也不理想，所以目前中晚期HCC治療仍是臨床工作的難點(diǎn)。納米粒（NP）尺寸小、比表面積大，具有多種獨(dú)特的理化性質(zhì)，成為輸送藥物、基因及細(xì)胞活性因子等治療劑的潛在載體。納米遞送系統(tǒng)以NP為載體，通過(guò)功能化修飾，從時(shí)間、空間及劑量上調(diào)控藥物、基因及細(xì)胞活性因子等在體內(nèi)的代謝及轉(zhuǎn)化，在HCC治療中展現(xiàn)出巨大的潛力。本文主要介紹了幾種常見(jiàn)納米遞送系統(tǒng)，包括有機(jī)納米載體、無(wú)機(jī)納米載體、外泌體等在HCC治療中的現(xiàn)狀和優(yōu)勢(shì)，總結(jié)了基于NP的納米載體治療HCC的機(jī)制，為新型納米遞送系統(tǒng)的研發(fā)提供參考。

關(guān)鍵詞：肝細(xì)胞癌；納米技術(shù)；藥物/基因遞送系統(tǒng)；靶向治療

中圖分類號(hào)： R735.7? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A? 文章編號(hào)：1000-503X（2024）03-0384-09

DOI：10.3881/j.issn.1000-503X.15669

Advances in Nanotechnology-Based Drug Delivery Systems in the Treatment of Hepatocellular Carcinoma

YANG Senlin，XIANG Yang，YANG Yijun

Department of Hepatobiliary Surgery，Haikou Affiliated Hospital of Central South University Xiangya School of Medicine，Haikou 570208，China

Corresponding author：XIANG Yang Tel：18876163917，E-mail：xiangyang200611@126.com

ABSTRACT：Primary liver cancer is one of the most common malignant tumors of the digestive system，of which hepatocellular carcinoma （HCC） accounts for more than 90% of the total cases.The patients with early HCC treated by surgical resection generally demonstrate good prognosis.However，due to the insidious onset，HCC in the vast majority of patients has progressed to the mid-to-late stage when being diagnosed.As a result，surgical treatment has unsatisfactory effects，and non-surgical treatment methods generally have severe side effects and low tumor selectivity.Nanoparticles （NP） with small sizes，large specific surface areas，and unique physical and chemical properties have become potential carriers for the delivery of therapeutic agents such as drugs，genes，and cytokines.The nano-delivery systems with NP as the carrier can regulate the metabolism and transformation of drugs，genes，and cytokines in vivo from time，space，and dose via functional modification，showing great potential in the treatment of HCC.This paper introduces the current status and advantages of several common nano-delivery systems，including organic nano-carriers，inorganic nano-carriers，and exosomes，in the treatment of HCC.Furthermore，this paper summarizes the mechanisms of NP-based nano-carriers in treating HCC and provides reference for the development of new nano-delivery systems.

Key words：hepatocellular carcinoma；nanotechnology；drug/gene-delivery system；targeted therapy

Acta Acad Med Sin，2024，46（3）：384-392

原發(fā)性肝癌是消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其中肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）占90％以上，死亡率約為8.3％［1］。HCC的發(fā)病與多種因素相關(guān)，如酒精性肝硬化、糖尿病、乙型和丙型肝炎、吸煙、鐵超載等［2］。目前HCC的治療方法主要有手術(shù)治療（肝切除和肝移植）和非手術(shù)治療（化療栓塞、放療、微波消融和系統(tǒng)治療）。早期HCC以手術(shù)切除為主，預(yù)后較好；然而由于HCC起病隱匿，確診病例多為中晚期，單純手術(shù)治療效果較差。系統(tǒng)治療（如分子靶向藥物治療、免疫治療、化療、基因治療等）是目前治療中晚期HCC的主要方式，可以控制疾病的進(jìn)展，延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間，但系統(tǒng)治療的特異性仍較低，在體內(nèi)非選擇性分布，不良反應(yīng)大，且易耐藥，因此迫切需要探索HCC新療法以滿足臨床需求。

納米載體具有以下主要優(yōu)勢(shì)：（1）納米載體通過(guò)表面改性或功能化可以促進(jìn)藥物/基因直接靶向運(yùn)輸至HCC組織并穿透細(xì)胞膜屏障，減少非特異性毒性；（2）納米載體可以實(shí)現(xiàn)藥物、基因及細(xì)胞活性因子等多種治療劑的共遞送，有效增強(qiáng)HCC治療效果，緩解耐藥；（3）一些納米載體本身的治療性質(zhì)和物理特性能夠?qū)崿F(xiàn)藥物/基因聯(lián)合光熱治療等，進(jìn)一步提高HCC治療效率［3-5］。近年來(lái)，納米醫(yī)學(xué)在HCC中的研究不斷進(jìn)展，有望成為解決HCC治療難題的有效手段。

本文主要介紹了基于納米技術(shù)的藥物遞送系統(tǒng)在HCC治療中的現(xiàn)狀，并總結(jié)了幾種常見(jiàn)的納米載體（表1），如有機(jī)納米載體、無(wú)機(jī)納米載體、外泌體等在HCC治療中的應(yīng)用進(jìn)展，為新型納米遞送系統(tǒng)的研發(fā)提供參考。

1 納米遞送系統(tǒng)

納米粒（nanoparticles，NP）是由天然或合成的無(wú)機(jī)或有機(jī)高分子材料制成的、粒徑在納米尺度范圍的固態(tài)微粒，具有尺寸小、比表面積大等特點(diǎn)和多種獨(dú)特的物理化學(xué)特性（如膠體、電磁和光熱等）［6］。納米遞送系統(tǒng)以NP為載體，通過(guò)功能化修飾，可以從時(shí)間、空間及劑量上調(diào)控藥物、基因及細(xì)胞活性因子等在體內(nèi)的代謝和轉(zhuǎn)化，在HCC治療中展現(xiàn)出巨大的價(jià)值。

脂質(zhì)體和膠束等是常見(jiàn)的有機(jī)NP，可以增加藥物溶解度、增強(qiáng)藥物滲透和生物利用度，抑制網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的攝取并增強(qiáng)HCC細(xì)胞的內(nèi)化作用，提高HCC治療效果［7］。攜帶基因/藥物的納米遞送系統(tǒng)可以特異性識(shí)別腫瘤部位，在腫瘤微環(huán)境中（低pH和還原性等）響應(yīng)性釋放基因/藥物，從而實(shí)現(xiàn)HCC的協(xié)同治療［8-9］。此外，一些常見(jiàn)的無(wú)機(jī)NP，如金NP、氧化鐵、石墨烯、硒及黑磷等，不僅可以作為納米遞送載體，而且由于其表面等離子體效應(yīng)，還可以作為光熱劑或放療增敏劑，增強(qiáng)HCC治療效果或提升HCC協(xié)同治療水平［10–12］。

2 用于HCC治療的常見(jiàn)納米遞送系統(tǒng)

2.1 有機(jī)納米遞送系統(tǒng)

有機(jī)材料具有高度生物相容性和可生物降解性，但由于其元素多樣性較低，缺乏多功能性，大多數(shù)有機(jī)納米材料僅可用作治療劑遞送載體。盡管有機(jī)納米遞送系統(tǒng)應(yīng)用范圍有限，但在體外和體內(nèi)治療HCC的研究中，其有效性還是得到了證實(shí)。

2.1.1 聚合物

高分子聚合物由多種簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)單元通過(guò)共價(jià)鍵重復(fù)連接而成，可分為天然高聚物和合成高聚物兩大類。常見(jiàn)的高分子聚合物包括聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸、多糖等。聚合物生物相容性好、易于制備及改性，具有良好的生物降解性，因此目前作為納米載體也已廣泛用于各類腫瘤治療研究［13］。

PEG可以涂覆在NP表面以增加體內(nèi)循環(huán)穩(wěn)定性，通過(guò)化學(xué)修飾后可用于治療劑遞送［14］。Tang等［15］開發(fā)了一種以PEG為載體、索拉非尼為治療劑、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican 3，GPC 3）為靶向配體的納米遞送系統(tǒng)，研究發(fā)現(xiàn)這種納米遞送系統(tǒng)可以顯著抑制肝癌細(xì)胞株HepG2（以下簡(jiǎn)稱HepG2）異種移植瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)，且無(wú)明顯不良反應(yīng)。聚乳酸-乙醇酸具有良好的生物相容性和可控降解性，而d-α-生育酚PEG1000琥珀酸酯的親水性和乳化作用可增強(qiáng)藥物吸收，提高載體穩(wěn)定性。Dong等［16］通過(guò)化學(xué)交聯(lián)法將兩者與N-乙酰半乳糖胺結(jié)合，合成了一種N-乙酰半乳糖胺-聚乳酸-乙醇酸-d-α-生育酚PEG1000琥珀酸酯NP（以下簡(jiǎn)稱EGPTN），并將具有潛在抗腫瘤作用的大黃素負(fù)載于EGPTN上，體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EGPTN具有高細(xì)胞毒性和細(xì)胞凋亡率，并且在HCC小鼠模型的體內(nèi)抗腫瘤作用也優(yōu)于其他組。

Cavallaro等［17］合成了一種基于α，β-聚（N-2-羥乙基）-D，L-天冬氨酰胺的新型陽(yáng)離子聚合物（以下簡(jiǎn)稱PHEA），能有效遞送針對(duì)轉(zhuǎn)錄因子E2F1的siRNA（以下簡(jiǎn)稱siE2F1），用于HCC的靶向給藥。他們將PHEA與二乙三胺（以下簡(jiǎn)稱DETA）和含有半乳糖的PEG衍生物（以下簡(jiǎn)稱PEG-GAL）進(jìn)行后續(xù)衍生化反應(yīng)，得到聚合物載體PHEA-DETA-PEG-GAL，其中半乳糖作為配體可以靶向高表達(dá)去唾液酸糖蛋白受體的HCC細(xì)胞。在這些細(xì)胞中，PHEA-DETA-PEG-GAL/siE2F1聚合物可誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子E2F1和其調(diào)控基因的表達(dá)水平降低，從而抑制細(xì)胞增殖。另一項(xiàng)研究［18］合成了一種聚［N-（丙-2-烯?；?β-D-乙酰半乳糖胺］-b-聚（N-異丙基丙烯酰胺）的二嵌段共聚物，用于負(fù)載阿霉素（Doxorubicin，DOX），這種共聚物組成的NP尺寸均勻、包封率高、粒徑可控，并且可在低pH環(huán)境中迅速釋放DOX，發(fā)揮持久有效的抗腫瘤作用。

多糖是由單糖通過(guò)糖苷鍵連接而成的天然聚合物，如殼聚糖、果膠、海藻酸鹽、纖維素、淀粉等，作為輔料在制藥工程和臨床上應(yīng)用已久，具有無(wú)毒、無(wú)反應(yīng)性、良好的生物相容性和易大規(guī)模獲得及價(jià)格相對(duì)較低等優(yōu)勢(shì)，還可以增加藥物的穩(wěn)定性和生物利用度［19］。Zhan等［20］將四臂PEG苯甲醛和N-羧乙基殼聚糖結(jié)合制備了一種可注射水凝膠，可通過(guò)pH調(diào)控該水凝膠在不同環(huán)境下的溶脹和降解，起到藥物緩釋作用；此外，負(fù)載DOX的水凝膠對(duì)HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)有很強(qiáng)的抑制作用，體內(nèi)抗腫瘤模型實(shí)驗(yàn)也表明其在5d內(nèi)即可顯著抑制HCC生長(zhǎng)。

聚合物納米遞送系統(tǒng)是生物技術(shù)的前沿和熱點(diǎn)，然而如何提高靶向藥物的包封率、體內(nèi)穩(wěn)定性和治療靈敏度等，仍需進(jìn)一步研究，目前研究者正致力于通過(guò)表面修飾改性、優(yōu)化載體的合成方式等技術(shù)來(lái)提高藥物靶向性和腫瘤治療效率（表1）。

2.1.2 脂質(zhì)體

脂質(zhì)體是具有類脂質(zhì)雙分子層的微囊泡，主要成分為磷脂和膽固醇，具有生物相容性好、生物可降解和非免疫原性等特點(diǎn)，已廣泛用于遞送小分子藥物和核酸，是一種理想的納米載體［21］。研究者通過(guò)對(duì)脂質(zhì)體進(jìn)行化學(xué)修飾，可實(shí)現(xiàn)治療劑的靶向遞送，從而提高HCC的治療效率。

Li等［22］制備了一種甘草次酸和花生凝集素雙配體修飾的DOX脂質(zhì)體靶向遞送系統(tǒng)，用于增強(qiáng)肝腫瘤的靶向性和療效。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)甘草次酸可與HCC細(xì)胞膜表面高表達(dá)的甘草次酸受體結(jié)合，同時(shí)HCC細(xì)胞膜中的MUC1黏蛋白可以特異性結(jié)合花生凝集素，進(jìn)一步提高了人肝癌SMMC-7721細(xì)胞對(duì)載體的攝取和積蓄，使該系統(tǒng)能更好地靶向HCC，減少DOX對(duì)正常細(xì)胞的損傷。靶向配體的穩(wěn)定性和靶向能力是影響癌癥治療效率中的重要因素，LT7是一種對(duì)腫瘤細(xì)胞過(guò)度表達(dá)的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體，且也是具有高親和力的多肽。為了提高LT7的穩(wěn)定性和靶向性，Tang等［23］設(shè)計(jì)了一種LT7的逆轉(zhuǎn)錄類似物（DT7），作為脂質(zhì)體NP的HCC靶向配體，這種負(fù)載多西他賽的脂質(zhì)體NP，在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性和靶向性，同時(shí)其抗腫瘤作用也更明顯。

非編碼RNA在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，miRNA可以調(diào)控HCC生長(zhǎng)［24］。研究者利用脂質(zhì)體將DOX和miR-101共遞送至HCC細(xì)胞，一方面增強(qiáng)了HCC靶向治療的敏感性和抗腫瘤活性，另一方面可以通過(guò)靶向相關(guān)基因調(diào)節(jié)HCC的增殖、凋亡、遷移/侵襲、耐藥和干性等生物學(xué)行為；該研究結(jié)果顯示這種聯(lián)合治療在體內(nèi)外均可產(chǎn)生顯著的協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)，提高了多重耐藥HCC的療效［25］。為了減少化療藥物的毒性，Zhou等［26］合成了一種3-半乳糖苷酶-3-O-硬脂酰脫氧甘草次酸配體，并用其修飾的脂質(zhì)體包裹斑蝥素，這種新型靶向載體對(duì)HepG2細(xì)胞具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性和遷移抑制作用。

脂質(zhì)體作為藥物遞送載體具有諸多優(yōu)勢(shì)，但仍存在包封率低、儲(chǔ)存穩(wěn)定性差、釋放控制不良等問(wèn)題，研究者可通過(guò)表面修飾，改善穩(wěn)定性差、藥物緩釋不可控等缺點(diǎn)后，開發(fā)出真正有效的HCC靶向載體［27］（表1）。

2.1.3 其他有機(jī)納米遞送系統(tǒng)

Varshney等［28］使用二肽（精氨酸、α，β-脫氫苯丙氨酸）自組裝NP遞送系統(tǒng)，并通過(guò)裝配靶向分子乳糖酸，實(shí)現(xiàn)抑癌基因miR-199a-3p的有效遞送，使其在Huh7細(xì)胞內(nèi)的水平顯著增加，進(jìn)而抑制了細(xì)胞增殖和遷移，并在體外誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡和靶基因雷帕霉素靶蛋白的下調(diào)，同時(shí)在HCC荷瘤裸鼠中也表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤效果。較大的生物分子（如牛血清白蛋白）也已被用來(lái)設(shè)計(jì)納米遞送系統(tǒng)，并成功地遞送姜黃素、DOX和紫杉醇等藥物［29］。這些系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是使用常見(jiàn)的蛋白質(zhì)可以增加該系統(tǒng)在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間。此外，Ishiguro等［30］使用了更大的生物結(jié)構(gòu)，從牛奶中分離出100～200 nm的囊泡，并成功用其遞送siRNA來(lái)治療HCC。

2.2 無(wú)機(jī)納米遞送系統(tǒng)

無(wú)機(jī)納米遞送系統(tǒng)的制備主要包括金屬材料及其氧化物、介孔二氧化硅、磁性NP、氧化石墨烯、黑磷等。無(wú)機(jī)NP不僅尺寸、形態(tài)可控性好，比表面積大，而且其光、電、磁等特性有利于實(shí)現(xiàn)藥物靶向輸送、光熱協(xié)同治療、體內(nèi)成像等功能，在腫瘤靶向給藥、藥物緩釋、協(xié)同治療等顯示出廣闊的應(yīng)用前景。

2.2.1 金屬及其氧化物

金NP具有小尺寸和典型的陰離子電荷，是研究最多的NP之一［31］。金NP不僅可以作為將藥物/基因遞送到靶向部位的載體，而且由于其表面等離子體效應(yīng)，也可以作為光熱劑或放療增敏劑［32-33］。

Cai等［34］構(gòu)建了一種抗miR-221的金NP，用于評(píng)價(jià)抗miR-221金NP與索拉非尼對(duì)肝癌細(xì)胞的協(xié)同作用。結(jié)果表明金NP可通過(guò)抑制miR-221/p27/DNMT1信號(hào)通路發(fā)揮抗腫瘤作用，而且抗miR-221金NP對(duì)索拉非尼具有化療增敏作用，因此金NP可能成為HCC治療的新選擇。此外，銀NP也被用于HCC治療研究，Benyettou等［35］將DOX負(fù)載于阿侖膦酸鈉包被的銀NP，發(fā)現(xiàn)DOX負(fù)載于阿侖膦酸鈉包被的銀NP后，在體外的抗腫瘤活性明顯高于單獨(dú)使用DOX。這種銀NP還可以容納其他靶向藥物，構(gòu)成一個(gè)通用的納米遞送系統(tǒng)，可明顯提高治療HCC的靶向藥物療效。

金屬氧化物NP不僅廣泛應(yīng)用于傳感和催化等領(lǐng)域，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也展現(xiàn)出獨(dú)特且廣泛的應(yīng)用潛力。金屬氧化物NP既能充當(dāng)治療劑直接參與疾病治療，又能作為MRI造影劑，從而促進(jìn)診斷的準(zhǔn)確性和治療的有效性。作為治療劑，金屬氧化物NP可以通過(guò)多種機(jī)制發(fā)揮作用，如某些金屬氧化物NP能夠通過(guò)負(fù)載藥物并可控釋放，實(shí)現(xiàn)對(duì)病灶區(qū)域的靶向治療，減少對(duì)健康組織的損害。此外，金屬氧化物NP還能作為光熱療法或光動(dòng)力療法的媒介，吸收特定波長(zhǎng)的光能后產(chǎn)生熱效應(yīng)或活性氧，殺死腫瘤細(xì)胞，如二氧化鈦在光照下可以產(chǎn)生自由基，具有殺菌和抗癌作用。在MRI應(yīng)用上，超順磁性氧化鐵NP由于其優(yōu)異的磁學(xué)性質(zhì)，能夠在外部磁場(chǎng)的作用下改變周圍的水分子運(yùn)動(dòng)，從而影響MRI信號(hào)強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)對(duì)特定組織或病灶的高對(duì)比度成像，對(duì)于早期診斷、疾病監(jiān)測(cè)及治療效果評(píng)估具有重要意義［36］。Tang等［37］通過(guò)電噴霧技術(shù)，制備了DOX-超順磁性氧化鐵-硫酸軟骨素/殼聚糖微粒作為HCC治療的藥物遞送系統(tǒng)，結(jié)果表明其不僅對(duì)HCC細(xì)胞具有明顯的毒性作用，而且還能實(shí)現(xiàn)藥物緩釋。

2.2.2 其他無(wú)機(jī)納米遞送系統(tǒng)

介孔二氧化硅NP不僅生物相容性好、易于合成，而且還具有高比表面積和大孔率，對(duì)小分子藥物、蛋白質(zhì)和基因等有較高的負(fù)載量［38］。Ji等［39］將聚多巴胺和兩性離子聚合物附載于介孔二氧化硅NP表面組成納米遞送系統(tǒng)，研究表明該納米遞送系統(tǒng)具有較高的載藥量和良好的膠體穩(wěn)定性，經(jīng)由人肝癌HepG2細(xì)胞特異性攝取后，能夠在低pH環(huán)境中實(shí)現(xiàn)藥物緩釋，顯示出優(yōu)異的HCC治療能力。此外，氧化石墨烯、黑磷納米片、硒等具有優(yōu)異光熱轉(zhuǎn)換性能的無(wú)機(jī)納米材料可以實(shí)現(xiàn)多模式協(xié)同治療，進(jìn)一步提高HCC治療效率，如Yin等［40］制備的具有靶向性的多功能氧化石墨烯納米片，在近紅外光照射下可實(shí)現(xiàn)基因光熱協(xié)同治療，增強(qiáng)腫瘤療效。

無(wú)機(jī)NP作為藥物/基因遞送載體在腫瘤靶向治療中的作用已在很多研究中證實(shí)。通過(guò)控制粒子的尺寸和形態(tài)，能有效搭載各種治療藥物和抑癌基因；而在附載多種功能化合物后，還可實(shí)現(xiàn)藥物控釋，提高藥物利用率，實(shí)現(xiàn)診療一體化和多模式聯(lián)合治療，提高HCC的診斷和治療效率（表1）。

2.3 外泌體遞送系統(tǒng)

外泌體是一類具有脂質(zhì)雙分子層，直徑為30～100 nm的細(xì)胞外囊泡，廣泛分布于人體的各種體液中，可以在特定條件下釋放信號(hào)分子，介導(dǎo)細(xì)胞通訊，調(diào)節(jié)細(xì)胞修復(fù)、生長(zhǎng)和分化［41］。外泌體具有雙層膜結(jié)構(gòu)、低免疫原性和腫瘤歸巢能力，成為用于腫瘤治療的天然載體，在藥物/基因遞送系統(tǒng)研究中得到了快速發(fā)展［42］。

Liang等［43］利用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體包裹抗腫瘤藥物去甲斑蝥素組成納米遞送系統(tǒng)，結(jié)果顯示其在小鼠HCC模型中表現(xiàn)出歸巢效應(yīng)，對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向和抑制作用明顯，同時(shí)該納米遞送系統(tǒng)還可通過(guò)增加細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞氧化應(yīng)激來(lái)修復(fù)受損的肝組織。也有研究者利用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體作為載體，將siGRP78（針對(duì)伴侶蛋白GRP78的siRNA）運(yùn)送到HCC細(xì)胞，抑制其體外生長(zhǎng)和侵襲［44］。Mahati等［45］設(shè)計(jì)了一種負(fù)載miR-26a的抗GPC 3單鏈抗體修飾的外泌體，可以有效地將miR-26a遞送至GPC 3表達(dá)陽(yáng)性的HCC細(xì)胞，通過(guò)調(diào)節(jié)miR-26a下游靶基因的表達(dá)來(lái)抑制細(xì)胞增殖和遷移，在體內(nèi)顯示出良好的抗腫瘤效果。Li等［46］將透明質(zhì)酸修飾于負(fù)載DOX的外泌體，使其可以選擇性地到達(dá)CD44高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

外泌體作為蛋白質(zhì)和功能性RNA的天然載體，具有許多優(yōu)異的特性，如穩(wěn)定性、生物相容性、生物屏障通透性、低毒性和低免疫原性等，這些使其成為腫瘤治療劑遞送的有力載體。然而，如何大規(guī)模生產(chǎn)純度高、質(zhì)量可控的外泌體仍是目前面臨的最大難題，且外泌體的提取、純化、鑒定、儲(chǔ)存等也無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，因此，研究者需要進(jìn)一步開發(fā)和改進(jìn)基于外泌體的納米遞送系統(tǒng)，制定一套科學(xué)、全面且實(shí)用的外泌體提取、純化、鑒定和儲(chǔ)存的標(biāo)準(zhǔn)流程，以實(shí)現(xiàn)其臨床轉(zhuǎn)化和大規(guī)模應(yīng)用（表1）。

3 基于納米遞送系統(tǒng)的HCC靶向治療機(jī)制

納米遞送系統(tǒng)的靶向方式主要包括被動(dòng)靶向和主動(dòng)靶向。被動(dòng)靶向是一種基于腫瘤內(nèi)血管滲透的藥物聚集方式，影響其效率的因素主要有NP粒徑、形態(tài)、表面電荷及疏水性等［47］。其主要機(jī)制為高通透性和滯留效應(yīng)，即由于腫瘤組織血管內(nèi)皮間隙較正常組織寬，NP更容易通過(guò)滲透在腫瘤部位聚集［48-50］。

主動(dòng)靶向是納米載體進(jìn)入細(xì)胞的主要方式，主要機(jī)制是將配體與納米載體結(jié)合，利用其對(duì)細(xì)胞的親和作用，通過(guò)優(yōu)先識(shí)別或與腫瘤微環(huán)境中過(guò)度表達(dá)或特異性表達(dá)的受體結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)靶向作用［51］。NP進(jìn)入機(jī)體后，首先通過(guò)被動(dòng)靶向的高通透性和滯留效應(yīng)在HCC細(xì)胞外基質(zhì)中積聚，再由粒子表面的標(biāo)志物或配體與靶細(xì)胞上的特異性受體結(jié)合，刺激細(xì)胞膜上的蛋白構(gòu)象發(fā)生變化，隨后納米載體通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，并在特定的腫瘤微環(huán)境下釋放藥物或基因，殺滅腫瘤細(xì)胞［52］（圖1）。這種特異性配體-受體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)遞送可以突破機(jī)體生物膜屏障，提高NP的輸送效率［53］。

HCC細(xì)胞表達(dá)諸多特異性受體，如去唾液酸糖蛋白受體、GPC 3、葉酸受體等，這些高表達(dá)的特異性受體提供了新的靶向結(jié)合位點(diǎn)，因此構(gòu)建具有特異性配體的藥物/基因載體成為開發(fā)靶向HCC的新型納米遞送系統(tǒng)的關(guān)鍵［54-55］。Pranatharthiharan等［56］制備了一種普魯蘭多糖與DOX負(fù)載復(fù)合NP遞送系統(tǒng)，可與HepG2細(xì)胞上去唾液酸糖蛋白受體特異性結(jié)合，普魯蘭多糖通過(guò)影響腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)中膠原蛋白的數(shù)量和結(jié)構(gòu)，改善NP對(duì)腫瘤細(xì)胞的滲透性，同時(shí)通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)證明該系統(tǒng)在小鼠HCC模型中顯示出良好的減瘤效果。Feng等［57］將一種GPC 3特異性結(jié)合肽和索拉非尼負(fù)載于納米載體，結(jié)果表明該載體可以改善索拉非尼的水溶性，增加載藥量，延長(zhǎng)血漿半衰期，實(shí)現(xiàn)緩釋，具有良好的細(xì)胞攝取和抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。此外，還有研究利用葉酸修飾的聚氧乙烯聚氧丙烯醚三嵌段共聚物（F127，美國(guó)食品藥品管理局已批準(zhǔn)的一種用于制藥的非離子型表面活性劑）負(fù)載疏水性的抗腫瘤藥物水飛薊賓，制備了一種靶向納米膠束，結(jié)果表明該膠束可與HCC細(xì)胞上的葉酸受體特異性結(jié)合，顯著提高了水飛薊賓的治療效果［58］。

4 結(jié)語(yǔ)

基于NP的納米遞送系統(tǒng)一方面可以攜帶多種藥物、基因及細(xì)胞活性因子，靶向遞送至腫瘤部位，發(fā)揮抗腫瘤作用；另一方面還可作為顯像劑、光熱劑及放療劑，通過(guò)光熱聯(lián)合治療，提高腫瘤治療效果。大部分與納米遞送系統(tǒng)相關(guān)的研究仍處于實(shí)驗(yàn)階段，臨床應(yīng)用依然面臨諸多問(wèn)題：（1）納米載體的理化性質(zhì)、穩(wěn)定性、生物相容性、可降解性等特性需要進(jìn)一步優(yōu)化；（2）還需深入探索腫瘤微環(huán)境下HCC與NP之間的相互作用機(jī)制，以尋找新的特異性治療靶點(diǎn)和更敏感的腫瘤響應(yīng)方式。因此，設(shè)計(jì)出一種生物相容性好、穩(wěn)定性高、毒性低的納米載藥體系，準(zhǔn)確地將治療藥物/基因高效釋放到HCC細(xì)胞，仍是未來(lái)HCC治療研究的主要方向，此外研究者還需要進(jìn)一步探究納米遞送系統(tǒng)進(jìn)入體內(nèi)后的有效性和安全性，才能更好地促進(jìn)其臨床轉(zhuǎn)化。

利益沖突 所有作者聲明無(wú)利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明 所有作者都參與文章選題、設(shè)計(jì)；楊森林：文獻(xiàn)搜集、篩選工作；楊森林、楊毅軍：起草論文，按編輯部的修改意見(jiàn)進(jìn)行核修，對(duì)學(xué)術(shù)問(wèn)題進(jìn)行解答；楊森林、向楊：論文修訂、終審和定稿，并同意對(duì)研究工作誠(chéng)信負(fù)責(zé)

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（收稿日期：2023-05-09）