周迎春，段倩倩，王 倩，王 軍，王 維，沈 艷，劉 華，苗文萍，何長生，朱良強

（安徽省動物疫病預防與控制中心，安徽合肥 230091）

豬圓環(huán)病毒（porcine circovirus，PCV）屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，為小型、無囊膜、無血凝活性的單鏈環(huán)狀DNA 病毒，可引起斷乳仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征、豬皮炎腎病綜合征、仔豬先天震顫等，給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴重經(jīng)濟損失。目前PCV有4 種基因型，分別為豬圓環(huán)病毒1 型（porcine circovirus type 1，PCV1）、豬圓環(huán)病毒2 型（porcine circovirus type 2，PCV2）、豬圓環(huán)病毒3 型（porcine circovirus type 3，PCV3）和豬圓環(huán)病毒4 型（porcine circovirus type 4，PCV4），其中PCV2 和PCV3 感染癥狀相似，與豬皮炎腎病綜合征、呼吸系統(tǒng)疾病、繁殖障礙、多系統(tǒng)炎癥、仔豬腹瀉、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病關系密切，已在我國多個省份廣泛流行[1-3]。庫旭鋼[4]對2016—2021 年采自全國537 個豬場的2 894 份疑似PCV 感染樣品進行檢測，發(fā)現(xiàn)PCV2和PCV3 感染率分別為34.45%和24.95%，混合感染率為12.72%。洪偉鳴等[5]對2017—2018 年在華東地區(qū)規(guī)?；i場采集的210 份臨床樣品進行檢測，發(fā)現(xiàn)PCV2 陽性率高達90.0%。在早年報道中，安徽省豬圓環(huán)病毒病（porcine circovirus associated disease，PCVAD）以PCV2 感染為主，且主要為PCV2b 和PCV2d 亞型，同時也存在PCV3 散發(fā)感染情況[6-7]。

為了解近年來安徽省PCVAD 流行情況，對2020—2022 年采集的950 份豬組織進行了PCV2和PCV3 病原檢測，對650 份豬血清進行了PCV2抗體檢測，以期為安徽省PCVAD 防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2020—2022 年，在安徽省安慶市望江縣、滁州市全椒縣、阜陽市臨泉縣、六安市裕安區(qū)和金安區(qū)的11 個養(yǎng)殖場和2 個屠宰場于每年4～6 月開展1 次檢測采樣。2 個大型養(yǎng)殖場（存欄量≥5 000 頭）每年采集健康豬血清和扁桃體各30～40 份，7 個中型養(yǎng)殖場（存欄量1 000～4 999 頭）各采集20～30份，2 個小型養(yǎng)殖場（存欄量＜1 000 頭）各采集10～20 份，血清和扁桃體一一對應；2 個屠宰場每年采集頜下或腹股溝淋巴結樣品各30～60 份。共采集650 份血清、650 份扁桃體和300 份淋巴結。所有養(yǎng)殖場均已按程序免疫PCV2 滅活疫苗。

1.2 主要試劑

磁珠法病毒核酸提取試劑盒、PCV2＆PCV3熒光PCR 檢測試劑盒、PCV2 抗體ELISA 檢測試劑盒，均購自哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司。

1.3 主要儀器

組織研磨儀（型號為JXFSTPRP-48），購自上海凈信實業(yè)發(fā)展有限公司；全自動核酸提取儀（型號為KingFisher 96），購自美國熱電公司；熒光定量PCR 儀（型號為CFX96），購自BIO-RAD公司；酶標儀（型號為Sunrise），購自TECAN 公司。

1.4 抗體檢測

使用PCV2 抗體ELISA 檢測試劑盒對650 份血清進行檢測。

1.5 病原檢測

使用磁珠法病毒核酸提取試劑盒提取650份扁桃體和300 份淋巴結中的病毒核酸，使用PCV2＆PCV3 熒光PCR 檢測試劑盒進行病毒核酸檢測。

1.6 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 20.0 軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，采用Graphpad Prime 7.0 軟件繪圖。

2 結果和分析

2.1 抗體檢測

2.1.1 不同年份PCV2 抗體檢測 結果（圖1）顯示：2020—2022 年PCV2 抗體陽性率分別為66.16%、74.35%、91.74%，呈逐年升高趨勢；2022 年顯著高于2020 和2021 年（P＜0.05），2020 和2021 年差異不顯著（P＞0.05）。

圖1 2020—2022 年PCV2 抗體陽性率（柱上方字母相同表示差異不顯著（P ＞0.05），不同表示差異顯著（P ＜0.05），下圖同）

2.1.2 不同規(guī)模養(yǎng)殖場PCV2 抗體檢測 結果（圖2）顯示：大、中、小型養(yǎng)殖場的PCV2 抗體陽性率分別為96.79%、72.18%、55.00%；大型養(yǎng)殖場的PCV2 抗體陽性率顯著高于中、小型養(yǎng)殖場（P＜0.05），中型養(yǎng)殖場顯著高于小型養(yǎng)殖場（P＜0.05）。

圖2 不同規(guī)模養(yǎng)殖場PCV2 抗體陽性率

2.2 病原檢測

2.2.1 不同年份PCV2 和PCV3 病原檢測 結果（圖3）顯示：2020—2022 年PCV2 感染率分別為57.81%、47.71%和48.57%，PCV3 感染率分別為10.63%、38.86%和32.14%。2020 年PCV2 感染率顯著高于2021 和2022 年（P＜0.05），2021 和2022 年差異不顯著（P＞0.05）；2020 年PCV3感染率顯著低于2021 和2022 年（P＜0.05），2021 和2022 年差異不顯著（P＞0.05）；同一年份的PCV2 感染率均顯著高于PCV3（P＜0.05）。

圖3 2020—2022 年PCV2 和PCV3 病原陽性率

2.2.2 不同環(huán)節(jié)PCV2 和PCV3 病原檢測 結果（圖4）顯示：養(yǎng)殖場的PCV2 和PCV3 感染率分別為44.46%、18.46%，屠宰場分別為66.33%、46.67%；屠宰場的PCV2 和PCV3 感染率均顯著高于養(yǎng)殖場（P＜0.05）。

圖4 不同環(huán)節(jié)PCV2 和PCV3 病原陽性率

2.2.3 不同規(guī)模養(yǎng)殖場PCV2 和PCV3 病原檢測結果（圖5）顯示：大、中、小型養(yǎng)殖場的PCV2感染率分別為88.95%、25.25%、31.67%，PCV3感染率分別為16.32%、20.75%、10.00%。大型養(yǎng)殖場的PCV2 感染率顯著高于中、小型養(yǎng)殖場（P＜0.05），中型和小型養(yǎng)殖場差異不顯著（P＞0.05）；大、中型養(yǎng)殖場的PCV3 感染率顯著高于小型養(yǎng)殖場（P＜0.05），大型和中型養(yǎng)殖場差異不顯著（P＞0.05）。

圖5 不同規(guī)模養(yǎng)殖場PCV2 和PCV3 病原陽性率

3 討論

3.1 PCV 流行情況與時間關系

本研究中，2020—2022 年安徽部分地區(qū)健康豬群中PCV2 抗體陽性率逐年升高，與之對應PCV2 病原陽性率整體呈下降趨勢，但2022 年有小幅回升。一方面說明養(yǎng)殖戶對PCV2 疫苗免疫重視程度高，免疫效果好，產生高水平免疫抗體，從而使感染率降低。另一方面，由于現(xiàn)有的抗體試劑盒尚無法區(qū)分疫苗免疫抗體和野毒感染抗體，本研究中所有PCV2 病原陽性生豬，抗體檢測也均為陽性，其中既包含疫苗免疫抗體，也包含野毒感染抗體，因此抗體陽性率與感染率不完全呈負相關。此外，由于目前無PCV3 商品化疫苗，且PCV2 疫苗對于PCV3 感染無交互免疫力，PCV3 病原陽性率整體呈上升趨勢，從10.63%上升至32.14%，但是同一年份的PCV3 病原陽性率均顯著低于PCV2（P＜0.05），這與河南省部分地區(qū)報道[8]的流行情況一致。

3.2 PCV 流行情況與養(yǎng)殖規(guī)模關系

本研究中，大型養(yǎng)殖場的PCV2 抗體陽性率顯著高于中、小型養(yǎng)殖場（P＜0.05），分析其原因，主要是由于大型養(yǎng)殖場對疫苗免疫的重視程度更高，也更容易推進開展集中免疫。同時，大型養(yǎng)殖場的PCV2 和PCV3 病原陽性率也高于中、小型養(yǎng)殖場。經(jīng)分析，存在兩方面原因：一是大型養(yǎng)殖場具有養(yǎng)殖數(shù)量多、飼養(yǎng)密度大、豬舍面積大、管理難度高等特點，一旦感染PCV，更易流行傳播；二是在非洲豬瘟暴發(fā)之后，豬價飆升，大型養(yǎng)殖場擴群、換種力度驟然加大，豬群流動頻繁，因此PCV 感染風險更高。

3.3 PCV 流行情況與流通環(huán)節(jié)關系

本研究中，屠宰場生豬PCV2 和PCV3 的感染率均顯著高于養(yǎng)殖場（P＜0.05），表明屠宰環(huán)節(jié)PCV 感染風險高。生豬養(yǎng)殖場大多建在農村和山區(qū)，環(huán)境相對偏遠封閉，人員、物資流通受限，與外界病原之間存在物理屏障；相比之下，屠宰場連接生豬產銷，是高風險物流、車流和人流的集散地，并且生豬在流通過程中容易產生應激反應，疫苗保護效果逐漸減弱，因此對PCV2 更加易感。同時，PCV 可通過豬血球蛋白粉、血漿蛋白粉、肉骨粉等飼料原料從屠宰環(huán)節(jié)再次進入養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，進一步加劇PCVAD 發(fā)生[9]。

4 結論

近年來安徽省PCVAD 防控取得一定成效，但是PCV2 仍存在廣泛感染，PCV3 愈加流行；屠宰場的感染風險高于養(yǎng)殖場，大型養(yǎng)殖場的感染風險高于中、小型養(yǎng)殖場。建議持續(xù)做好PCV2 免疫工作，加強屠宰場的風險監(jiān)測及大型養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理和生物安全管理，嚴防PCV2 和PCV3 在養(yǎng)殖和屠宰環(huán)節(jié)流通傳播。